Subpopulace B lymfocytů v klinické imunologii

Transkript

1 Subpopulace B lymfocytů v klinické imunologii Marcela Vlková Ústav klinické imunologie a alergologie, FN u sv. Anny v Brně

2 B lymfocyty základními buňkami specifické humorální imunity primární funkce - produkce protilátek imunoglobulinů (Ig) Ig- zaměřeny proti mikroorganismům nebo jejich toxinům působících v tělních tekutinách či dutinách tj. mimo buňky

3 Tucker W. LeBien and Thomas F. Tedder. Blood 2008; 112:

4 Vývoj B lymfocytů Tucker W. LeBien and Thomas F. Tedder. Blood 2008; 112:

5 BCR receptor Coombs RR, Feinstein A, Wilson AB. Immunoglobulin determinants on the surface of human lymphocytes. Lancet 1969;2: Molekuly Ig přítomny na povrchu B lymfocytu jako součást specifického receptoru pro antigen BCR komplexu: Ig + transmembránové molekuly Igα, Igβ (CD79α, CD79β)

6 Povrchové znaky B lymfocytů CD19 - celá vývojová linie B lymfocytů CD20 - maturované B lymfocyty CD21 - C3d a EBV receptor CD22 lektin pro α2,6-sialicylovou kys. CD23 nízce afinitní receptor pro IgE CD24 GPI glykoprotein s neznámou funkcí CD27, CD38, CD72, CD80, CD40.

7 CD znaky a vývoj B lymfocytů T1 B T2 B FO B MZ B P-SW PLB CD CD CD /+ - - IgM /- IgD /- CD CD /- +++

8 Sledování subpopulací B lymfocytů v periferní krvi MZ IgM high IgD low CD21 high CD23 - IgD IgM high IgD low CD21 - CD23 - T1 Transientní B lymfocyty T2 IgM high IgD + CD21 + CD23 + IgM l low IgD high CD21 + CD23 + FO I.přep. B IgG,IgA or IgE CD27 Paměťové B lymfocyty IgM AFC IgG,IgA or IgE Plasmatické bb. CD38 (Modified from C. Schiff)

9 IgD PE Loder J et al J Exp Med Naivní 1999;190:75-89 Klein U et al J Exp Med 1998;188: CD19+ CD20+ CD27- CD21+/- CD38+/- s IgM+ s IgD+ IgM paměťové CD19+ CD20-/+ CD27+ CD21+ CD38- s IgM+ s IgD+ Plasmablasty CD19+/- CD20 -- CD27++ CD21 - CD38++ s IgM + s IgD-/+ Paměťové IgG, IgA, IgE CD19+, CD20-/+ CD21+ CD27+, CD38-/+ CD23+ s IgM-, s IgD- CD27 FITC Agematsu K et al Immunol Today 2000; 21:

10 Protilátkové imunodeficity Zvýšená náchylnost k bakteriálním infekcím, zejména respiračního systému. Jako infekční agens dominují opouzdřené baktérie- Haemophily, pneumokoky, St aureus Infekce mají tendence ke komplikacím objevují se pneumonie, sinusitidy, otitidy. Pacienti mohou trpět meningitidami, chronickými průjmy, artritidami. Nástup příznaků po vymizení mateřských protilátek. Ale primární humorální imunodeficit -CVID se může manifestovat v kterémkoliv věku pacienta! 10

11 Nejčastější typy primárních humorálních imunodeficiencí 11

12 Běžný variabilní imunodeficit CVID heterogenní skupina onemocnění, vyznačující se porušenou schopností tvorby protilátek produkovaných B lymfocyty: snížené hladiny sérového IgG, IgA; hladina IgM bývá variabilní patogeneze těchto chorob nebyla dosud až na některé výjimky objasněna ( např. deficit ICOS, BAFF-R, TACI CD19, CD20.) popsány B i T lymfocytární defekty vedoucí k neschopnosti kooperace mezi B a T lymfocyty porucha v produkci protilátek 12

13 Běžný variabilní imunodeficit CVID patogeneze těchto chorob nebyla dosud až na některé výjimky objasněna v příbuzenstvu častý výskyt selektivního deficitu IgA!!! 13

14 Selektivní deficit IgA nejčastější porucha tvorby protilátek s frekvencí 1:400 v ČR postižení jedinci - minimální nebo žádné příznaky imunodeficitu prokázán zvýšený výskyt autoimunitních chorob, snad i alergií laboratorní definice - hladina IgA menší než 0.05g/l při nesnížených hladinách IgG a IgM může se jednat o lehčí fenotypovou manifestaci stejného genetického základu vedoucího k závažnějšímu onemocnění CVID (přechod IgAD CVID) možný výskyt anti-iga protilátek 14

15 Vyšetření počtu B-lymfocytů 15

16 Vyšetření počtu B-lymfocytů Absence B-lymfocytů pacienti s X-vázanou agamaglobulinémií autosomálně recesivními agamaglobulinémiemi asi 10% pacientů s CVID Goodův syndrom X-LP Normální počet B-lymfocytů CVID IgAD hyper-igm syndromy přechodná hypogamaglobulinémie kojenců 16

17 Vyšetření zastoupení B-lymfocytárních subpopulací 17

18 Transientní B-lymfocyty Zdravý dárce Pupečníková krev 18

19 Vyšetření zastoupení B lymfocytárních subpopulací CD19+ CD21+/- CD20+ CD27- CD23+ CD38l+/- s IgM+ s IgD+ Naivní CD19+ CD20-/+ CD27+ CD38-/+ s IgM+ s IgD+ IgM paměťové CD21+ CD23+ IgD PE Paměťové IgG, IgA, IgE CD19+, CD20-/+ CD27+, CD38-/+ s IgM-, s IgD- CD21+ CD23+ CD27 FITC 19

20 Zdravá kontrola Pacient CVID IgD IgD CD27 CD27 20

21 Vyšetření zastoupení B lymfocytárních subpopulací CD21low B lymfocyty 21

22 Výsledky vyšetření B-lymfocytárních subpopulací u pacientů s CVID Pokles: Plazmablastů (CD27++ CD38++IgM+/-) Izotypově přepnutých paměťových B lymfocytů (CD27+IgM-IgD-) Vzestup: naivních (CD27-IgD+), transientních (CD24++IgM++CD38++) CD21low (CD21-CD38-) B-lymfocytů 22

23 Pacienti s IgA deficitem 23

24 Pacienti s IgA deficitem 24

25 Výsledky vyšetření B-lymfocytárních subpopulací u pacientů s IgAD U části pacientů nalezen pokles izotypově přepnutých paměťových B-lymfocytů vzestup CD21low B-lymfocytů korelace mezi % i absolutním počtem izotypově přepnutých paměťových B lymfocytů a hladinou IgG 25

26 Poděkování Prof. MUDr. Jiří Litzman, CSc. MUDr. Dagmar Štikarovská MUDr. Zdeňka Pikulová MUDr. Dana Bartoňková Sestřičky ÚKIA Mgr. Jana Nechvátalová Mgr. Olga Tichá, Ph.D. RNDr. Martina Štouračová Kolektiv laborantů ÚKIA!!!! 26

27 Děkuji za pozornost 27