65596 9 Česky Systémové informace Pro analyzátor cobas e 4: číslo testu 2 Pro analyzátory MODULAR AALYTICS E7, cobas e 6 a cobas e 62: Číslo kódu aplikace 557 Upozornění Hodnoty progrp naměřené ve vzorcích pacientů se mohou lišit v závislosti na použitém postupu stanovení. Laboratorní nález musí proto vždy obsahovat informaci o použité metodě stanovení progrp. Hodnoty progrp, stanovené ve vzorku pacientů rozdílnými testy, nelze mezi sebou přímo porovnávat, mohly by vést k chybné lékařské interpretaci. Jestliže dojde během monitorování léčby ke změně metody stanovení progrp, měly by být hodnoty progrp, získané po této změně, potvrzeny paralelním měřením použitím obou metod. Použití Imunochemické kvantitativní stanovení progrp v lidském séru a plazmě. Stanovení slouží jako pomůcka při diferenciální diagnostice rakoviny plic a při vedení léčby pacientů s malobuněčným karcinomem plic ve spojení s jinými klinickými metodami. Výsledky musí být interpretovány ve spojení s dalšími metodami v souladu se standardními klinickými pokyny. Elektrochemiluminiscenční imunostanovení ECLIA je určeno pro použití na analyzátorech imunostanovení Elecsys a cobas e. Souhrn Peptid uvolňující gastrin (GRP) je důležitá regulační molekula, související s řadou fyziologických a patofyziologických procesů u lidí. Je to hormon produkovaný ve střevě a savčí protějšek bombesinu u obojživelníků, původně izolovaný z prasečího žaludku 2, který je rozšířen v celé nervové soustavě savců a v gastrointestinálním a dýchacím traktu. Po odštěpení signálního peptidu je jeho preprotein skládající se ze 48 aminokyselin dále upraven na GRP skládající se z 27 aminokyselin a ProGRP z 68 aminokyselin. Kvůli krátkému biologickému poločasu v trvání 2 minut není možné měřit GRP v krvi. 4 Z tohoto důvodu bylo vyvinuto stanovení pro měření progrp ( 98), karboxyterminální oblasti společné pro druhy lidských variant progrp, a bylo dokázáno, že hladiny progrp ( 98) v séru slouží jako spolehlivý biomarker u pacientů s malobuněčným karcinomem plic (SCLC). 2,5,6,7 Stanovení měří progrp ( 98) v plazmě a séru. ProGRP a neuronspecifická enoláza (SE) jsou 2 molekuly, které jsou spojené s neuroendokrinními tkáněmi a tumory. Zvýšené hladiny progrp se uvádí u několika druhů neuroendokrinních tumorů, včetně malobuněčného karcinomu plic, karcinoidů, nediferencovaného velkobuněčného karcinomu plic s neuroendokrinními rysy, medulárního karcinomu štítné žlázy, 8 jiných neuroendokrinních maligních onemocnění, 8 a u části karcinomů prostaty s neuroendokrinními rysy nereagujúcích na androgeny. 9 ProGRP u benigních onemocnění: Koncentrace progrp v séru v rozmezí 2 až 5 se podle literatury považují za normální. Ve studii pacientů s benigním onemocněním (kromě pacientů se selháním ledvin), včetně onemocnění jater, byly však u 2.5 pacientů zjištěny abnormální hladiny > 5 progrp v séru. Všechny hladiny byly < 8. Selhání ledvin bylo jediným zdrojem významného nárůstu hladin tohoto biomarkeru. Zvýšené hladiny progrp jsou vysoce specifické pro SCLC a progrp se uvádí jako nejcitlivější biomarker pro SCLC ve srovnání s benigním onemocněním plic. 2 Klinická studie se stanovením (podrobněji popsaná v části "Očekávané hodnoty") potvrdila vysokou specifičnost stanovení pro SCLC v diferenciální diagnostice. ProGRP u karcinomu plic: ProGRP se uvádí jako specifický biomarker pro SCLC, ale abnormální hladiny lze detekovat u malé podskupiny pacientů s nemalobuněčným MODULAR AALYTICS E7 cobas e 4 cobas e 6 cobas e 62 karcinomem plic (SCLC). Tyto koncentrace jsou významně nižší než sérové hladiny progrp zjištěné u pacientů se SCLC. 7 Sérové hladiny progrp korelují se stádiem nádoru. ProGRP v diferenciální diagnostice karcinomu plic: Vysoké hladiny progrp (> 2 ) u pacientů s karcinomem plic (bez selhání ledvin) znamenají vysokou pravděpodobnost přítomnosti SCLC. ProGRP v maligních onemocněních jiných než karcinom plic: Zvýšené hladiny progrp v séru lze nalézt zejména u pacientů s SCLC nebo neuroendokrinními tumory. 4 Zvýšená hladina progrp u pacientů s dobře diferencovanými neuroendokrinními tumory indikuje přítomnost primárního tumoru v plících a koreluje se špatnou prognózou. 5 Mírně zvýšené hladiny progrp v séru byly zjištěny u pacientů s jiným maligními onemocněním bez selhání ledvin, ale 99.7 z nich mělo hladiny <. Použitím cut-off hodnoty 5 jako jednoho z kritérií, byla pomocí výsledku stanovení progrp předpovězená diagnóza SCLC s citlivostí 72.5. ProGRP při monitorování pacientů s SCLC: Řada výzkumníků uvádí, že progrp je užitečný při monitorovaní léčby pacientů s SCLC a při detekci rekurence onemocnění. 6,7 Klinická studie se stanovením (podrobněji popsaná v části Očekávané hodnoty ), potvrdila užitečnost tohoto biomarkeru při monitorování léčby a sledování pacientů s různými režimy léčby. ProGRP bývá při SCLC navrhován jako biomarker volby. Toto je podpořeno citlivostí progrp při SCLC, jakož i specifičností při jiných maligních onemocněních, přítomností normálních hodnot při většině onemocnění, vyjma selhání ledvin, a absencí falešně pozitivních výsledků při hemolýze a dobrým rozlišením mezi normálním rozsahem a hladinami u pacientů s SCLC. SE může být komplementárním biomarkerem u SCLC a kombinace SE a progrp zvyšuje preciznost histologické diagnostiky, stanovení prognózy a následného sledování. 8 Hladiny progrp jsou zvýšené v raných stádiích SCLC. Jelikož je výskyt SCLC v populaci nízký, nedoporučujeme používání stanovení Elecsys ProGRP jako screeningového testu v běžné populaci. Princip testu Sendvičový princip. Celková doba stanovení: 8 minut.. inkubace: µl vzorku, biotinylovaná monoklonální protilátka specifická pro ProGRP a monoklonální protilátka specifická pro ProGRP, značená rutheniovým komplexem a) reagují za tvorby sendvičového komplexu. 2. inkubace: Po přidání mikročástic potažených streptavidinem se komplex váže na pevnou fázi prostřednictvím interakce mezi biotinem a streptavidinem. Reakční směs je nasáta do měřící cely, kde jsou mikročástice s navázanými komplexy zachyceny prostřednictvím magnetu. enavázané složky jsou odstraněny roztokem ProCell/ProCell M. Přivedené napětí na pracovní elektrodě vyvolá chemiluminiscenční emisi fotonů, která je změřena fotonásobičem. Výsledky se stanovují pomocí kalibrační křivky, která je specificky vytvořena pro přístroj 2bodovou kalibrací, a master křivky, která se do přístroje načte z čárového kódu reagencie nebo elektronického čárového kódu. a) Tris(2,2'-bipyridyl)ruthenium(II)-komplex (Ru(bpy) ) Reagencie - pracovní roztoky Reagenční rackpack je označen jako ProGRP. 28-, V 6. Česky / 8
M R R2 Mikročástice potažené streptavidinem (průhledné víčko), nádobka, 6.5 ml: Streptavidinem potažené mikročástice,.72 mg/ml; konzervans. Anti-ProGRP-Ab~biotin (šedé víčko), nádobka, 9 ml: Biotinylovaná monoklonální protilátka proti progrp (myší).5 mg/l; fosfátový pufr 4 mmol/l, ph 7.; konzervans. Anti-ProGRP-Ab~Ru(bpy) (černé víčko), nádobka, 9 ml: Monoklonální protilátka proti progrp (myší), značená rutheniovým komplexem 2. mg/l; fosfátový pufr 4 mmol/l, ph 7.; konzervans. Bezpečnostní opatření a varování Pro diagnostické použití in vitro. Dodržujte běžná bezpečnostní opatření nutná pro nakládání se všemi reagenciemi. Likvidace všech odpadních materiálů musí probíhat v souladu s místními předpisy. Bezpečnostní listy jsou pro odborné uživatele dostupné na vyžádání. U všech reagencií a druhů vzorků (vzorky, kalibrátory a kontroly) zabraňte vytvoření pěny. Zacházení s reagenciemi Reagencie v soupravě jsou sestaveny tak, že tvoří komplet připravený k použití a nemohou být odděleny. Všechny informace, potřebné pro správnou činnost, jsou načteny z příslušného čárového kódu reagencie. Uskladnění a stabilita Skladujte při 2 8 C. emrazit. Reagenční soupravu Elecsys skladujte ve vzpřímené poloze, aby byla zajištěna dostupnost všech mikročástic během automatického míchání před použitím. Stabilita: neotevřené při 2 8 C po otevření při 2 8 C v analyzátorech do uvedeného data exspirace 2 týdnů 42 dní Odběr vzorků a příprava ProGRP může být degradován v séru endogenními proteázami, vytvořenými během srážení krve. Proto se předpokládá, že progrp je stabilnější v plazmě, než v séru. Plazma je dle literatury preferovaným vzorkem. 9 Pro provedení stanovení je však možné použít i sérum, jelikož protilátky se ve stanovení vážou na místa méně náchylná na štěpení proteázou. Pouze níže uvedené vzorky byly testované a jsou přijatelné. Sérum odebrané standardní odběrovou soupravou nebo pomocí zkumavek se separačním gelem. Li heparinizovaná, K 2 EDTA a K EDTA plazma, jakož i zkumavky s Li heparinem, obsahující separační gel. Kritérium: Sklon.9. + úsek na ose ± 6, korelační koeficient.95. Stabilní 72 hodin při 2 8 C, 9 hodin při 2 C, 2 týdnů při -2 C (± 5 C). Vzorky lze zmrazit 2krát. (Kritéria přijatelnosti: Pro sérum a plazmu: < 6 ± 6 > 6 ±. Pro sérum navíc až pro vzorků: < 6 ± 8 > 6 ±.) Uvedené druhy vzorků byly testované s vybranými typy odběrových zkumavek, které byly komerčně dostupné v té době, tzn., že do testu nebyly zařazené všechny typy zkumavek všech výrobců. Systémy odběru vzorků různých výrobců mohou obsahovat různé materiály, které mohou mít v některých případech zásadní vliv na výsledky. Při zpracování vzorků v primárních zkumavkách (systémy odběru vzorků) dodržujte pokyny jejich výrobce. Vzorky obsahující precipitáty centrifugujte před provedením stanovení. epoužívejte teplem inaktivované vzorky. epoužívejte vzorky a kontroly stabilizované azidem. Před měřením zajistěte, aby vzorky, kalibrátory a kontroly měly teplotu 2 25 C. Vzhledem k možnému odparu roztoků by měly být vzorky, kalibrátory a kontroly v analyzátoru analyzovány/stanoveny do 2 hodin. Dodávaný materiál Reagencie jsou uvedeny v části "Reagencie - pracovní roztoky". Potřebný materiál (ale nedodávaný se soupravou) 655979, ProGRP CalSet, pro 4 x ml 6559889, PreciControl ProGRP, pro 4 x ml 7679, PreciControl Lung Cancer, pro 4 x ml 699879, Diluent MultiAssay, 2 x 6 ml diluentu vzorku Celkové vybavení laboratoře MODULAR AALYTICS E7 nebo analyzátor cobas e Příslušenství pro analyzátor cobas e 4: 66298822, ProCell, 6 x 8 ml systémový pufr 6629722, CleanCell, 6 x 8 ml čistící roztok pro měřící celu 94622, Elecsys SysWash, x 5 ml promývací přísada 959, Adapter for SysClean 7682, Assay Cup, 6 x 6 reakčních nádobek 76799, AssayTip, x 2 pipetovacích špiček 857, Clean Liner Příslušenství pro analyzátory MODULAR AALYTICS E7, cobas e 6 a cobas e 62: 48849, ProCell M, 2 x 2 L systémový pufr 488299, CleanCell M, 2 x 2 L čistící roztok pro měřící celu 24, PC/CC Cups, 2 kalíšků pro předehřátí ProCell M a CleanCell M před užitím 5729, ProbeWash M, 2 x 7 ml čistícího roztoku pro finalizaci a mytí během změny reagencií 48999, PreClean M, 5 x 6 ml systémový čistící roztok 227, AssayTip/AssayCup, 48 kazet x 84 reakčních nádobek nebo pipetovacích špiček, odpadní vaky 25, WasteLiner, odpadní vaky 2765, SysClean Adapter M Příslušenství pro všechny analyzátory: 29856, ISE Cleaning Solution/Elecsys SysClean, 5 x ml systémový čistící roztok Stanovení Optimálního využití stanovení dosáhnete, budete-li dodržovat pokyny uvedené v dokumentaci pro příslušný analyzátor. Pokyny ke stanovení specifické pro analyzátor vyhledejte v příslušném návodu k použití. Promíchání mikročástic před použitím proběhne automaticky. ačtěte specifické parametry pro test z čárového kódu reagencie. Ve výjimečných případech, kdy nelze načíst čárový kód, zadejte 5místní sekvenci čísel (kromě analyzátoru cobas e 62). Analyzátory MODULAR AALYTICS E7, cobas e 6 a cobas e 62: Je vyžadován roztok PreClean M. Vytemperujte chlazené reagencie na přibl. 2 C a umístěte je do reagenčního kotouče (2 C) analyzátoru. Zabraňte tvorbě pěny. Systém automaticky reguluje teplotu reagencií a otvírá a zavírá nádobky. Kalibrace ávaznost: Tato metoda byla standardizovaná dle metody ARCHITECT ProGRP od Abbott Diagnostics. Každá reagenční souprava Elecsys je opatřena štítkem s čárovým kódem obsahujícím specifické informace pro kalibraci dané šarže reagencií. Předdefinovaná master křivka je uzpůsobena pro analyzátor pomocí příslušného CalSet. 2 / 8 28-, V 6. Česky
Frekvence kalibrace: Kalibrace se musí provádět jednou pro celou šarži reagencií novými reagenciemi (tj. ne více než 24 hodin od registrace reagenční soupravy v analyzátoru). Kalibrační interval lze po přijatelné verifikaci kalibrace laboratoří prodloužit. Obnovení kalibrace se doporučuje: po měsíci (28 dní) při používání stejné šarže reagencií po 7 dnech (při používání stejné reagenční soupravy v analyzátoru) dle potřeby: např. výsledky kontroly kvality jsou mimo definované rozmezí Kontrola kvality Pro kontrolu kvality používejte PreciControl Lung Cancer nebo PreciControl ProGRP. avíc lze použít i jiný vhodný kontrolní materiál. Kontroly pro rozdílné koncentrační rozmezí by měly být jednotlivě stanoveny nejméně jednou za 24 hodin při používání testu, alespoň x na soupravu reagencií a po každé kalibraci. Kontrolní intervaly a meze by měly být uzpůsobeny pro každou laboratoř dle individuálních požadavků. aměřené hodnoty by se měly pohybovat v definovaných mezích. Každá laboratoř by měla mít vypracovaná nápravná opatření pro případ, že hodnoty překročí definované meze. Je-li to nutné, zopakujte měření příslušného vzorku. Sledujte příslušná vládní nařízení a lokální směrnice kontroly kvality. Upozornění: Kontroly nejsou označeny čárovým kódem a musí být proto použity jako externí kontroly. Všechny hodnoty a rozmezí musí být zadány ručně. Čtěte, prosím, část "QC" v návodu k obsluze nebo online nápovědu softwaru přístroje. Kontroly neoznačené čárovým kódem: Do analyzátoru může být pro každou kontrolní hladinu zadána pouze jedna cílová hodnota a rozmezí. Cílové hodnoty, specifické pro šarži reagencie, musí být zadány znovu pokaždé, když je použita specifická šarže reagencie s jinými cílovými hodnotami a rozmezím kontrol. Dvě šarže reagencií s různými cílovými hodnotami a rozmezím nelze použít paralelně ve stejné sérii. Přesné cílové hodnoty a rozmezí specifické pro šarži jsou vytištěny na přiloženém (nebo elektronicky dostupném) letáku hodnot v reagenční soupravě nebo soupravě PreciControl. Ujistěte se, prosím, že jsou použity správné hodnoty. Výpočet Analyzátor automaticky počítá koncentraci analytu pro každý vzorek v. Omezení - interference Byl testován účinek následujících látek a léků na využití stanovení. Interference byla testovaná do uvedených koncentrací a nebyl pozorovaný žádný vliv na výsledky. Kritérium: Výtěžnost ± 6 počáteční hodnoty 6 a v rámci ± počáteční hodnoty > 6. Látky Sloučenina Albumin Bilirubin Biotin Hemoglobin IgA IgG IgM Intralipid Revmatoidní faktory Testované koncentrace 2 g/l µmol/l nebo 66 mg/dl 5 ng/ml.62 mmol/l nebo. g/dl g/l 7 g/l 2.9 g/l 2 mg/dl do 54 IU/mL Vzorky by neměly být odebrány pacientům podstupujícím léčbu s vysokými dávkami biotinu (tj. > 5 mg/den) po dobu nejméně 8 hodin od podání poslední dávky biotinu. Efekt nadbytku antigenu (hook efekt) nebyl zaznamenaný pro progrp do koncentrace. In vitro testy se prováděly na 6 běžně užívaných léčivech. ebyla zjištěná žádná interference. Běžně používané léky Léky Acetaminofen Acetylcystein Kys. acetylsalicylová Ampicilin Kys. askorbová Cefoxitin Cyklosporin Doxycyklin Heparin Ibuprofen Levodopa Metyldopa Metronidazol Fenylbutazon Rifampicin Theofylin Testované koncentrace 2 µg/ml 5 µg/ml µg/ml µg/ml µg/ml 25 µg/ml 5 µg/ml 5 µg/ml 5 U/L 5 µg/ml 2 µg/ml 2 µg/ml 2 µg/ml 4 µg/ml 6 µg/ml µg/ml Kromě toho byla testovaná následující speciální léčiva. ebyla zjištěná žádná interference. Speciální léky používané při léčbě rakoviny Látka Avastin Karboplatina Cisplatina Cyklofosfamid Dexamethason Docetaxel Doxorubicin Epoetin Erlotinib Etoposid Gefitinib Gemcitabin hydrochlorid Ifosfamid Lomustin Methotrexát Metoklopramid eupogen Paclitaxel Topotecan hydrochlorid Vinkristin sulfát Vinorelbin tartrát Testované koncentrace 75 µg/ml 6 µg/ml 8 µg/ml 5 µg/ml 2 µg/ml 2.5 µg/ml 72 µg/ml 25 mu/l 5 µg/ml µg/ml 25 µg/ml 5 µg/ml 24 µg/ml 72.5 µg/ml 5 µg/ml 7.5 µg/ml.9 µg/ml µg/ml 2.25 µg/ml. µg/ml 5. µg/ml Ve vzácných případech je možné pozorovat interferenci způsobenou velmi vysokým titrem protilátek proti test specifickým protilátkám, streptavidinu nebo rutheniu. Tyto účinky jsou minimalizovány vhodným navržením testu. Pro diagnostické účely je vždy nezbytné používat výsledky ve spojení s anamnestickými údaji pacienta, klinickým vyšetřením a jinými nálezy. 28-, V 6. Česky / 8
Limity a rozmezí Měřící rozsah.-5 (definováno mezí detekce a maximem master křivky). Hodnoty pod mezí detekce se vykazují jako <.. Hodnoty nad měřícím rozsahem se vykazují jako > 5 (nebo až 5 při násobném ředění vzorku). Dolní meze měření Mez blanku, mez detekce a mez stanovitelnosti Stanovení je navrženo tak, aby mělo následující dolní meze měření: Mez blanku = 2. Mez detekce =. Mez stanovitelnosti = 7. s celkovou přípustnou chybou Mez blanku, mez detekce a mez stanovitelnosti byly měřeny v souladu s požadavky CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) EP7 A. Mez blanku je hodnotou 95. u z n 6 měření vzorku bez obsahu analytu v průběhu několika nezávislých sérií. Mez blanku odpovídá koncentraci, pod kterou jsou vzorky bez analytu zjištěny s pravděpodobností 95. Mez detekce se měří na základě meze blanku a standardní odchylky vzorků s nízkou koncentrací. Mez detekce odpovídá nejnižší koncentraci analytu, kterou lze detekovat (hodnota nad mezí blanku s pravděpodobností 95 ). Mez stanovitelnosti je definovaná jako nejnižší množství analytu ve vzorku, které lze přesně kvantifikovat s celkovou přípustnou relativní chybou. Byla provedena studie, založená na směrnici CLSI, protokolu EP7 A2 použitím 5 vzorků koňského séra a naředěné lidské plazmy, každý na mez blanku, resp. na mez detekce. Vzorky byly testované v 6 sériích po dobu dnů na 2 analyzátorech, které poskytly n = 6 hodnot. Mez blanku a mez detekce byly vypočítané jako.6, resp. 2.2. Pro mez stanovitelnosti byly vzorky lidské plazmy naředěné a změřené v 6 sériích po dobu dnů na 2 analyzátorech. Při celkové přípustné chybě byla mez stanovitelnosti.99. Linearita Stanovení je lineární v celém měřícím rozsahu od. 5. Vzorky byly připravené dle CLSI EP6 A, naředěním vzorků sér a plazem, každý s Diluent MultiAssay ve více krocích v rozmezí od > 5 až po mez blanku. Ředění Vzorky s koncentrací progrp nad měřícím rozsahem lze ředit s Diluent MultiAssay. Doporučený poměr ředění je : (buď automaticky na analyzátorech nebo ručně). Koncentrace ředěného vzorku musí být > 5. Po ručním naředění výsledek vynásobte faktorem ředění. Po naředění analyzátorem počítá software automaticky s ředěním při výpočtu koncentrace vzorku. Očekávané hodnoty Studie v Evropě a Číně se stanovením na 85 vzorcích od zdravých dospělých jedinců (67 žen, 478 mužů) ve věku v rozmezí 2 až 79 let, poskytla následující výsledky (studie Roche č. RD525 a RD788). Jelikož je známo, že selhání ledvin zvyšuje hladiny ProGRP 2, byly do této studie zahrnuti pouze pacienti s egfr (odhadovanou glomerulární filtrací), vypočítané dle rovnice CKD-EPI (Chronic Kidney Disease Epidemiology Collaboration) 2. Hodnoty ProGRP v séru a plazmě (kombinované výsledky z Evropy a Číny): Sérum n = 5. ProGRP () Medián 95. (95 CI b) ) 22. 4. 68. (64.2-74.4) 97.5. (95 CI) 77.7 (74.4-86.5) Li-heparinizovaná plazma n = 698 EDTA plazma n = 844 b) CI = interval spolehlivost 5. ProGRP () Medián 95. (95 CI b) ) 25.7 4.4 68. (6.7-74.5) 22.8 6.4 59.5 (55.8-6.4) 97.5. (95 CI) 77. (7.-.) 67.5 (6.4-76.9) Hodnoty ProGRP (kombinované výsledky séra a plazmy) dle regionu studie: Čína n = 46 Evropa n = 99 5. ProGRP () Medián 95. (95 CI) 28. 42.7 65.7 (59.9-86.5) 2.5 9.5 66. (62.8-72.6) 97.5. (95 CI) 74.4 (65.2-7.) 77.7 (74.5-92.) Každá laboratoř by si měla prověřit převoditelnost očekávaných hodnot na svou populaci pacientů, a je-li to nutné, stanovit si vlastní referenční rozmezí. Hodnoty progrp u zdravých jedinců a v různých typech benigních a maligních chorob Procentuální rozložení hodnot stanovení ProGRP, získaných ve 4 klinických centrech v Evropě a 2 klinických centrech v Číně, stanovením z 2767 vzorků sér, je shrnuta v tabulce níže: Zdraví jedinci Celkem Hodnoty () <..-5 5.-.-2 > 2 Kuřáci 92 Bývalí kuřáci 74 Absolutní nekuřáci Benigní onemocnění Benigní onemocnění plic Renální onemocnění 68 9 Jiná benigní 4 onemocnění c) Rakovina SCLC 26 SCLC 85 SCLC/SCLC mix 8 Mezoteliom 28 5 (79.7) 57 (77.) 474 (76.7) 76 (76.) 5 (55.6) (79.) (5.) 69 (72.6) 2 (25.) 25 (89.) 9 (2.) 6 (2.6) 6 (22.) 2 (2.) (.) 28 (9.6) 2 (9.7) 29 (24.5) 2 (25.) (.7) (.4) 8 (.) (.) (.) 2 (.4) 9 (9.2) 2 (.4) 6 (66.) (.5) 4 (5.) 4 / 8 28-, V 6. Česky
Medulární štítné žlázy euroendokrinní karcinom Celkem Hodnoty () <..-5 5.-.-2 > 2 5 22 Prsa 52 Ovarií 6 Prostaty Kolorektální 64 Jiná maligní 5 onemocnění d) 2 (.) 9 (4.9) 4 (76.9) 25 (69.4) 8 (58.) 46 (7.9) 86 (74.8) (6.7) 5 (22.7) 2 (2.) 9 (25.) 9 (29.) 5 (2.4) 25 (2.7) (.6) (2.8) 4 (2.9) (4.7) 4 (.5) 2 (8.) 5 (22.7) c) Jiná benigní onemocnění zahrnují onemocnění jater, metabolismu, autoimunity a zánětlivá onemocnění. Benigní onemocnění plic zahrnují pneumonii, astma, COPD a tuberkulózu. (2.8) d) Jiná maligní onemocnění zahrnují renální, jaterní, pankreatické, gastrointestinální, žaludeční a cervikální tumory a lymfomy. Použití ProGRP pro primární diferenciální diagnostiku rakoviny plic Schopnost progrp odlišit SCLC od SCLC byla zkoumána ve studii s 59 pacienty v 5 centrech v Evropě a Číně (26 SCLC a 85 SCLC) a hladiny progrp byly korelovány s biopsií potvrzenou histologií. Distribuce hodnot je zobrazena v krabicovém grafu a tabulce 2 x 2 níže: y 2 2 5 2 5 2 x = : SCLC, Čína (n = 5), 2: SCLC, Evropa (n = 748), : SCLC, Čína (n = 7), 4: SCLC, Evropa (n = 69) y = ProGRP sérum () ProGRP 8. ProGRP > 8. 85 (8.5 ) 2 4 x SCLC SCLC 8 45 856 (8.8 ) 42 6 2 (9.2 ) 26 (9.5 ) 59 ( ) Hodnota cut-off při 95 specifičnosti (založeno na skupině SCLC) byla 8.. Korelace hodnot a stádia pro 89, 85, pacientů s SCLC, SCLC, resp. benigním onemocněním plic, je zobrazena v následující tabulce: Klinický stav 5. Stádium I-II SCLC Stádium III SCLC Stádium IV SCLC Stádium I-IV SCLC Benigní onemocnění plic Medián ProGRP 95. 7.9 75.9 25 66 2.9 545 277 2 5. 748 24 85 6.7 8.7 8. 4.8 6. 8.8 Citlivost progrp u pacientů se stádiem I-IV SCLC vs. SCLC a vs. benigní onemocnění plic při předem specifikované specifičnosti 95, jakož i hodnoty v oblasti pod křivkou (AUC), jsou zobrazeny v tabulce níže. Cut-off Citlivost AUC (95 CI) SCLC vs. SCLC 8. 78.2.898 (.868-.928) SCLC vs. benigní onemocnění plic SCLC vs. jiná maligní onemocnění 8.8 78.2.9 (.882-.94) 9 66..864 (.8-.898) Monitorování odpovědi na léčbu u pacientů s diagnostikovaným SCLC Užitečnost stanovení při monitorování odpovědi na léčbu u pacientů s SCLC byla měřena v klinické studii, která probíhala v 6 centrech v Evropě a Číně, a která zahrnovala celkem 29 vzorků krve od 4 pacientů v první a druhé linii léčby (hlavně režimy se 2 cytostatiky, z kterých jedno je platinový preparát, a topotekan). CT vyšetření probíhalo dle místních standardů. Hladiny progrp se měřily při každém CT vyšetření. Hladiny progrp před léčbou byly korelovány s hladinami progrp získanými v době, kdy byla zobrazovacími metodami pozorována maximální odpověď nádoru na léčbu ( maximální odpověď ; n = 25 pacientů). ásledující tabulka zobrazuje přehled demografických proměnných v této analýze: Proměnná Evropa Čína Všechna místa Věk Pohlaví 45 7 25 Průměr 62.7 6. 62. Min/Max 6/8 27/8 27/8 Ženy 67 8 85 Muži 78 52 Etnická Bělošská 28 28 skupina Čínská 7 7 Kuřácké návyky Kuřáci 6 4 Bývalí kuřáci 9 52 Absolutní nekuřáci Bez specifikace 7 2 4 4 28-, V 6. Česky 5 / 8
Proměnná Evropa Čína Všechna místa Linie léčby při maximální odpovědi Léčba. linie 88 57 45 Léčba 2. linie 6 7 4 Léčba. linie a jiná léčba 2 6 27 egativní změna progrp byla definovaná jako procentuální pokles v době maximální odpovědi v porovnání s hladinami před léčbou. ásledující tabulka ukazuje příslušnou citlivost a specifičnost použitím různých hladin cut-off pro procentuální pokles progrp. ereagující pacienti jsou definovaní jako pacienti, u kterých došlo k progresi onemocnění, které bylo prokázáno zobrazovací metodou, na rozdíl od pacientů, u kterých došlo ke kontrole nádoru ( reagujícící pacienti ). Cut-off e) ProGRP Citlivost f) Specifičnost g) PPV h) PV i) -5 82.8 65.6 27. 96. -6 89.7 6.8 26.8 97.5-7 89.7 55.4 2.9 97.2-8 9. 48.9 22. 97.8-9 96.6 9.8 2. 98.7 e) Změna mezi počáteční koncentrací a koncentrací při maximální odpovědi f) Správně zjištění nereagující pacienti g) Potenciálně ušetřené CT vyšetření u reagujících pacientů h) PPV = pozitivní prediktivní hodnota i) PV = negativní prediktivní hodnota PV a PPV jsou založené na prevalenci reagujících a nereagujících pacientů pozorovaných v této klinické studii. V následujícím grafu jsou zobrazené změny hladin progrp mezi počáteční koncentrací a koncentrací při maximální odpovědi. Šedá linie představuje průměrnou změnu pro všechny pacienty zahrnuté do studie. Reagující pacienti, n = 86 y 5 7 9 x = návštěvy, y = ProGRP () ereagující pacienti, n = 29 x y 5 7 9 x = návštěvy, y = ProGRP () ásledné monitorování primárně léčených pacientů se SCLC Užitečnost stanovení jako pomůcky při následném monitorování po chemoterapii je zobrazeno na příkladu níže. Graf zobrazuje hodnoty progrp u pacienta v čase léčby první linií (režim karboplatina/etopozid) a následném sledování. Žena, 72 let Stádium onemocnění dle UICC (Union Internationale Contre le Cancer): IV, Stádium onemocnění dle TM (Classification of Malignant Tumours): T4 Mb y V V2 V PR V4 V o V2 o x V o PD 9 4 6 89 62 26 x = dny, y = ProGRP () V = návštěva, PR = parciální remise, = stabilní onemocnění, PD = progresivní onemocnění = léčba první linie, o = následné sledování Je třeba brát v úvahu následující fakta Jsou-li výsledky progrp v rozporu s klinickými nálezy, doporučuje se pro potvrzení výsledku další testování. Pro diagnostické účely by výsledky měly být použity ve spojení s dalšími údaji; např. symptomy, výsledky jiných testů, klinickým vyšetřením, atd. Výsledky vykazujte ve spojení s druhem vzorku. Zvýšené koncentrace progrp byly pozorovány u pacientů s renální dysfunkcí. Mezi hladinami progrp v séru a koncentrací kreatininu v séru u pacientů s renální dysfunkcí je výrazná korelace. 2 V případě vysokých hladin progrp, které neodpovídají diagnostickému a klinickému popisu pacienta, by měly být vyhodnoceny hladiny kreatininu v séru. x 6 / 8 28-, V 6. Česky
Hladiny progrp, bez ohledu na hodnotu, by neměly sloužit jako absolutní důkaz přítomnosti nebo absence maligního onemocnění. U pacientů s podezřením nebo potvrzeným karcinomem je pro diagnózu a následnou léčbu potřeba zvážit další vhodné testy a postupy. Koncentrace progrp v daném vzorku, stanoveného stanovením různých výrobců, se mohou lišit kvůli rozdílům v testovacích metodách, kalibraci a specifičnosti reagencií. Specifické údaje o využití Údaje o využití, typické pro analyzátory, jsou uvedeny níže. Výsledky získané v různých laboratořích se mohou lišit. Preciznost Preciznost byla stanovena použitím reagencií Elecsys, vzorků a kontrol podle protokolu (EP5 A2) CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute): 2 série denně v duplikátech, každý po 2 dní (n = 84). Získané byly následující výsledky: Vzorek Analyzátory cobas e 4 Prům. Opakovatelnost VK Mezilehlá preciznost Lidská plazma 6.65.7 2.6.28 4.2 Lidská plazma 2 57.8.574..4 2.4 Lidská plazma 468.45.7.5 2.2 Lidská plazma 4 242 8.8.8 52. 2. Lidská plazma 5 452 4.4.9 9 2.4 PC j) ProGRP 5.7.25.7.4.2 PC ProGRP2 69 4.59.8 2.. PC LC k) 6..9.5 2..4 PC LC2 822 7.8..8.7 j) PC = PreciControl k) LC = Lung Cancer Analyzátory MODULAR AALYTICS E7, cobas e 6 a cobas e 62 Vzorek Prům. Opakovatelnost VK VK Mezilehlá preciznost Lidská plazma 7.2.27.7.49 6.8 Lidská plazma 2 6..577.9.8. Lidská plazma 478 5.. 7.7.7 Lidská plazma 4 25 2.8.9 8.8. Lidská plazma 5 48 7..7 57.8 PC ProGRP 9.4.457.2.62 4. PC ProGRP2 678 5.9.8 24..6 PC LC 6.9.828. 2.6.4 PC LC2 872 6.6.8 9. 2.2 Porovnání metod Porovnání stanovení na analyzátoru cobas e 6 (y) s manuálním ProGRP ELISA (x) poskytlo následující korelace: Počet stanovených vzorků séra: 5 Passing/Bablok 22 Lineární regrese y =.49x + 4.8 y =.4x +.2 τ =.8 r =.988 Koncentrace vzorků byly v rozmezí přibližně až 484. Porovnání stanovení na analyzátoru cobas e 6 (y) s automatizovanou metodou ProGRP (x) poskytlo následující korelace: VK Počet změřených vzorků K 2 EDTA plazmy: 66 Passing/Bablok 22 Lineární regrese y =.997x - 2.68 y =.x - 4.8 τ =.852 r =.996 Koncentrace vzorků byly v rozmezí přibližně až 468. Analytická specifičnost Specifičnost stanovení je nastavena tak, aby měla křížové reaktivity při testování gastrin releasing peptidu (GRP) při koncentraci ng/ml. Studie byla provedena se stanovením Elecsys ProGRP, na základě pokynu CLSI, Protocol EP7 A2. Alikvoty lidské plazmy, obsahující progrp v rozmezí od 4 do 7, byly doplněny GRP v koncentraci 4 ng/ml a testovány na progrp. Křížová reaktivita GRP byla vypočítaná jako menší než.. l) l) Reprezentativní údaje; výsledky se v jednotlivých laboratořích mohou od těchto údajů lišit. Odkazy Korse CM, Holdenrieder S, Zhi X-y, et al. Multicenter evaluation of a new progastrin-releasing peptide (ProGRP) immunoassay across Europe and China. Clin Chim Acta 25;48:88-95. 2 Miyake Y, Kodama T, Yamaguchi K. Pro-gastrin-releasing peptide (-98) is a specific marker in patients with small cell lung carcinoma. Cancer Res 994;54:26-24. Ischia J, Patel O, Shulkes A, et al. Gastrin-releasing peptide: Different forms, different functions. Biofactors 29;5:69-75. 4 Holst JJ, Hansen M, Bork E, et al. Elevated plasma concentrations of c- flanking gastrin-releasing peptide in small-cell lung cancer. J Clin Oncol 989;2:8-88. 5 Aoyagi K, Miyake Y, Urakami K, et al. Enzyme immunoassay of immunoreactive progastrin-releasing peptide (-98) as tumor marker for small-cell lung carcinoma: development and evaluation. Clin Chem 995;4:57-54. 6 Yamaguchi K, Aoyagi K, Urakami K, et al. Enzyme-linked immunosorbent assay of pro-gastrine-releasing peptide for small cell lung cancer patients in comparison with neuron-specific enolase measurement. Jpn J Cancer Res 995;86:698-75. 7 Stieber P, Dienemann H, Schalhorn A, et al. Pro-gastrin-releasing peptide (ProGRP) - a useful marker in small cell lung carcinomas. Anticancer Res 999;9:267-2678. 8 Inaji H, Komoike Y, Motomura K, et al. Demonstration and diagnostic significance of Pro-gastrin-releasing peptide in medullary thyroid carcinoma. Oncology 2;59:22-25. 9 Yashi M, Terauchi F, ukui A, et al. Small-cell neuroendocrine carcinoma as a variant form of prostate cancer recurrence: a case report and short literature review. Urol Oncol 26;24:-7. Molina R, Augé JM, Bosch X, et al. Usefulness of serum tumor markers, including progastrin-releasing peptide in patients with lung cancer: correlation with histology. Tumor Biol 29;:2-29. Molina R, Augé JM, Alicarte J, et al. Pro-gastrin-releasing peptide in patients with benign and malignant diseases. Tumor Biol 24;25:56-6. 2 Stieber P, Yamaguchi K. ProGRP enables diagnosis of small-cell lung cancer. In: Diamandiis EP, Fritsche HA, Lilja H, et al. (eds): Tumor Markers. Physiology, Pathobiology, Technology and Clinical Applications. AACC Press, Washington, 22; pp 57-52. Molina R, Filella X, Augé JM. ProGRP: a new biomarker for small cell lung cancer. Clin Biochem 24;7:55-5. 4 Korse CM, Taal BG, Vincent A, et al. Choice of tumour markers in patients with neuroendocrine tumours is dependent on the histological grade. A marker study of Chromogranin A, euron specific enolase, Progastrin-releasing peptide and cytokeratin fragments. Eur J Cancer 22;48:662-67. 5 Korse CM, Taal BG, Bonfrer JMG, et al. An elevated progastrinreleasing peptide level in patients with well-differentiated neuroendocrine tumours indicates a primary tumour in the lung and predicts a shorter survival. Ann Oncol 2;22:2625-26. 28-, V 6. Česky 7 / 8
6 Okusaka T, Eguchi K, Kasai T, et al. Serum levels of pro-gastrinreleasing peptide for follow-up of patients with small cell lung cancer. Clin Cancer Res 997;:2-27. 7 Yamaguchi K, Abe K, Kameya T, et al. Production and molecular size heterogeneity of immunoreactive gastrinreleasing peptide in fetal and adult lungs and primary lung tumors. Cancer Res 98;4:92-99. 8 Molina R. ProGRP: A ew Biomarker for Small Cell Lung Cancer. EJCMO 29;:25-2. 9 ordlund MS, Bjerner J, Warren DJ, et al. Progastrin-releasing peptide: stability in plasma/serum and upper reference limit. Tumor Biol 28;29:24-2. 2 Kamata K, Uchida M, Takeuchi Y, et al. Increased serum concentrations of pro-gastrin-releasing peptide in patients with renal dysfunction. ephrol Dial Transplant 996;:267-27. 2 Levey AS, Stevens LA, Schmid CH, et al. A new equation to estimate glomerular filtration rate. Ann Intern Med 29;5:64-62. 22 Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 988 ov;26():78-79. Pro více informací čtěte prosím příslušný návod k použití daného analyzátoru, jednotlivé aplikační listy, informace o produktu a metodické listy všech potřebných komponent (jsou-li dostupné ve Vaší zemi). Tečka se v tomto metodickém listu vždy používá jako desetinný oddělovač k označení hranice mezi celými a desetinnými místy desetinného čísla. Oddělení tisíců se nepoužívá. Antigeny progrp a protilátky použité v produktech Roche ProGRP mají licenci Fujirebio Diagnostics, Inc. Symboly Roche Diagnostics používá kromě symbolů a znaků uvedených v normě ISO 522 následující znaky (pro USA: pro definici použitých symbolů navštivte stránku https://usdiagnostics.roche.com): GTI Obsah soupravy Analyzátory/přístroje, na kterých lze reagencie použít Reagencie Kalibrátor Objem po rekonstituci nebo promíchání Globální číslo obchodní položky Doplnění, odstranění nebo změny textu jsou označeny pruhem podél textu. 27, Roche Diagnostics Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 6, D-685 Mannheim www.roche.com 8 / 8 28-, V 6. Česky