Stanovení PNH klonů průtokovou cytometrií
|
|
- Dušan Kopecký
- před 7 lety
- Počet zobrazení:
Transkript
1 Stanovení PNH klonů průtokovou cytometrií Iuri Marinov, ÚHKT, Praha Motolský minikurz - Praha, 2015
2 Přežití (%) Paroxysmální noční hemoglobinurie (PNH)- vzácné onemocnění s život ohrožujícími komplikacemi 100 Přežití po stanovení diagnózy (1) 2-6 případů/milion/ročně (3) Úmrtnost do 5 let: 35% (1) Výskyt u všech věkových skupin (med=30 let) (4,5) Kontrolní skupina (věk / pohlaví) Nízká kvalita života (1,6) 20 Nemocní s PNH Progrese onemocnění (1,2) Roky (1) Hillmen P et al. NEJM 1995; 333:1253-8; (2) Parker C et al. Blood 2005;106(12): ; (3) Hill A et al. Blood 2006;108:985; (4) Moyo VM et al. BJH 2004;126:133-38; (5) Nishimura J et al. Med 2004;83: ; (6) Socié G et al. Lancet 1996;348:573-7; (7) Peffault de Latour R et al. Blood 2008;112(8):
3 PNH- patofyziologie Somatická mutace v genu pig-a, který kóduje protein nezbytný pro iniciální fázi syntézy GPI-kotvy 1,2 Částečný nebo kompletní deficit GPI-kotvených proteinů CD59 GPI kotva CD55 1. McKeage K. Drugs. 2011;71(17): Adapté de : Johnson RJ et al. J Clin Pathol: Mol Pathol. 2002;55: Brodsky R. Paroxysmal Nocturnal Hemoglobinuria. dans : Hematology - Basic Principles and Practices. 4th ed. R Hoffman; EJ Benz; S Shattil et al. eds. Philadelphie, PA: Elsevier Churchill Livingstone; 2005;
4 PNH- patogeneze Absence povrchových antigenů CD55 a CD59 vede k deficitu inhibičních systémů aktivovaného komplementu
5 Expanze PNH klonu 1 1 etapa Somatická mutace v genu PIG-A 2 etapa Imunitní ataka proti GPI kotveným proteinům 3 etapa Selekce, růst, expanze PNH klonu 1. Adaptováno od Inoue N et al. Int J Hematol. 2003;77:
6 Chronická hemolýza hlavní příčina klinických komplikací a úmrtnosti Trombóza Renální insuficience Plicní hypertenze Vliv na celkové přežití Aktivace komplementu Mezenteriální trombóza Dyspnoe Dysfagie Volný hemoglobin/anémie NO (oxid dusnatý) Únava Hemoglobinurie Nevýkonnost Vliv na kvalitu života 1. International PNH Interest Group. Blood. 2005;106: Brodsky R. Hematology - Basic Principles and Practices. 4th ed. 2005; Rother RP et al. JAMA. 2005;293: Socie G et al. Lancet. 1996;348: Hill A et al. Br J Haematol. 2007;137: Lee JW et al. Hematologica. 2010;95(s2): Abstract #505 and Hill A et al. Br J Haematol. 2010; May;149(3): Hillmen P et al. Am J Hematol. 2010;85:
7 Proč provádět PNH screening 35% pacientů umírá v rámci 5 let i přes podpůrnou terapii Časný záchyt ovlivňuje terapeutickou strategii a úspěšnost léčby u PNH s aplazií kostní dřeně Přítomnost PNH klonů u PNH s aplazií KD předpovídá odpověď na imunosupresivní terapii Může dojit k nárůstu malých PNH klonů V současné době existuje efektivní terapie (1) Hillmen P et al. NEJM 1995; 333:1253-8; (2) Sugimori C et al. Blood 2006;107:
8 Průtoková cytometrie - časová osa Od r implementace FCM Od r metoda volby pro stanovení PNH klonů Od r ICCS guidelines Od r Practical guidelines: podklad pro standardizaci Od r Harmonizace a Standardizace Od r Nové techniky
9 Validace PNH vyšetření Pre-analytické požadavky - požadavky na vzorek (odběr, skladování, doprava ) - požadavky na reagencie (selekce klonů, titrace MoAb, výběr vhodných kontrol) Analytické požadavky - linearita a preciznost hodnot relativní fluorescence - rozlišení slabě positivních populací - reprodukovatelnost výsledků měření - reprodukovatelnost výsledků v čase a sérii v jednotlivých a mezi jednotlivými laboratořemi (harmonizace, standardizace) Post-analytické požadavky - přesnost: porovnávání k očekávaným výsledkům - specifičnost: série měření ve vztahu k referenční metodě - citlivost: schopnost odlišit abnormální populaci od normálních populací - opakovatelnost (v sérii) mezilehlá preciznost (mezi sériemi) - odhad nejistoty výsledků měření (alespoň formou mezilehlé preciznosti)
10 Pre-analytické požadavky- požadavky na vzorek Materiál Antikoagulační činidlo Množství Stabilita vzorku Skladování Periferní krev EDTA nebo heparin 1-3 ml 7 dní pro Ery, 48 h pro Leuko 4 o C po 24 h Lyzační činidlo Ery - neprovádí Komerční lyzační roztok, NH4Cl Cílové populace Ery Granulocty Monocyty pro konfirmaci Lymfocyty nevyšetřujeme 1. Borowitz et al.;cytometry 2010;178B; Sutherland et al. ;Cytometry 2012; 82B; Marinov et al.;cytometry 2013;84B; Sutherland et al. Cytometry 2014:. 5. Marinov et al.;ijlh:2014 accepted
11 Doporučené reagencie pro analýzu PNH Ery 2 barevný test: CD235a-FITC / CD59-PE CD235a optimální pro gate na Ery CD235a způsobuje agregaci Ery (nutná titrace) FITC je preferovaný fluorochrom CD59 vykazuje lepší signal:noise poměr PE je preferovaný fluorochrom pro CD59 CD55 se nedoporučuje - slabá intenzita signálu (nízká epitopová denzita) - špatné rozlišení PNH Erytrocytů typu II a III 1. Borowitz et al.;cytometry 2010;178B; Sutherland et al. ;Cytometry 2012; 82B;
12 Doporučené reagencie pro analýzu PNH Leuko Reagencie Buňky barevný G FLAER CD24 CD15 CD45 4 barevný M FLAER CD14 CD64 (33) CD45 4 barevný G+M FLAER CD24 CD14 CD33 5 barevný G+M FLAER CD24 CD14 CD15 CD45 5 barevný G+M FLAER CD24 CD14 CD15 CD64/33 5 barevný G+M FLAER CD157 CD15 CD45 CD64 6 barevný G+M FLAER CD24 CD14 CD15 CD45 CD64 6 barevný G+M FLAER CD24 CD14 CD15 CD45 CD33 GPI- reagencie Reagencie na gate 1. Borowitz et al.;cytometry 2010;178B; Sutherland et al. ;Cytometry 2012; 82B;
13 Doporučené klony pro PNH Leuko Cílová populace Ery Leuko MP / Fluorochrom (BD/BC) Význam Becton Dickinson Beckman Coulter CD59 (PE/PE) GPI-kotvený MEM-43 OV9A2 CD235a (FITC/FITC) CD15 (APC/PC5) CD15 (efluor450) Gate na Ery KC16 JC159 MEM-43 OV9A2 KC16 JC159 Gate na Gr H198 80H5 Gate na Gr MMA MMA FLAER GPI-kotvený NA NA CD24 (PE/PE) GPI-kotvený SN3 ML5 CD64 (APC/PC5) SN3 ALB9 Gate na Mo CD14 (PE/PE) GPI-kotvený 61D3 MφP9 61D3 RMO52 CD157 (PE/PE) GPI-kotvený SY11B5 SY11B5 CD45 (PerCP- Cy5.5/PC7 Vyloučení debris 2D1 J33 Sutherland et al.; Cytometry; 2012; 82B:
14 Pre-analytické požadavky- požadavky na reagencie Titrace monoklonálních protilátek Snížení množství Sériové ředění
15 Analytické požadavky Linearita a preciznost hodnot relativní fluorescence Rozlišení slabě positivních populací Reprodukovatelnost výsledků měření Reprodukovatelnost výsledků v čase a sérii v jednotlivých a mezi jednotlivými laboratořemi
16 Analytické požadavky Plně automatizovaný proces pro digitální přístroje: Baseline setting (1-2 krát do roka, kdykoliv po údržbě): min - kontrola linearity - kontrola citlivosti - nastavení PMT voltage - nastavení optického pozadí - optimalizace elektronického šumu - nastavení cílových hodnot fluorescenční intenzity pro optimální rozlišení - nastavení časové prodlevy laserů (BD přístroje) Performance check (denně): 5 min - stanovuje a koriguje odchylky od základního (baseline) nastavení
17 Analytické požadavky Nastavení pro specifickou aplikaci (application setting): - area scaling (korekce hodnot pro FS-area a FS-height ) - optimalizace PMT signálů - digitální korekce spektrálního přísvitu PNH- kontrola nastavení cytometru na lymfocytech B-ly PNH Ly Ba T-ly
18 Post analytické požadavky Přesnost - shoda mezi průměrnými hodnotami získanými z velkého počtu měření a příslušnou referenční hodnotou - není aplikovatelná pro FCM testy (chybí referenční materiál) Specifičnost - analytická specifičnost (MP) - klinická specifičnost: testování série vzorků a hodnocení abnormality ve srovnání s příslušnou referenční metodou (série měření ve vztahu k referenční metodě) Citlivost - schopnost odlišit abnormální populaci od normálních populací - diluční testy 1. Barnett et al.; Cytometry 2013; 84B; Wood et al.;cytometry 2013;84B;
19 Post analytické požadavky Nepřesnost 1,2 - opakovatelnost: > 5 vzorků připravit a 3 krát změřit v jednom pracovním cyklu. CV <10% (<20% pro populace < 0.1%) - mezilehlá preciznost: > 5 vzorků 3 krát připravit a 3 krát změřit v samostatných pracovních cyklech (restart a re-kalibrace přístroje). CV <10% (<20% pro populace < 0.1%) Účast v cyklech EKK a/nebo MLP 3 1. Barnett et al.;cytometry 2013; 84B; Wood et al.;cytometry 2013;84B; , 3. Marinov et al.;cytometry 2013;84B;
20 Post analytické požadavky Hlášení výsledků - velikost PNH klonů v Ery, Gr a Mo populacích - vždy uvádět aktuální citlivost vyšetření (LOD) - používat správnou terminologii > 1% PNH clone 0.1-1% Minor PNH clone 0.1% Rare cells with GPI deficiency
21 PNH Ery: 2 barevný test Periferní krev (EDTA) vždy ředit 1: µl výchozího ředění na test Přidáváme příslušné množství titrovaných CD59-PE a CD235a-FITC Inkubujeme ve tmě při pokojové teplotě cca 20 minut Nutno promýt v PBS Nastavení objemu na 0.5-1ml (PBS) Důkladně protřepat!!! (< 2% agregátů) Akvizice na průtokovém cytometru
22 PNH Ery- ruční nastavení cytometru Nastavení Light scatter and PMT Optimalizace FS a SS neznačených Ery v Log : Log scatter plotu Gate na singlety Vynulovat kompenzační nastavení Nastavit PMT pro FL-1 a FL-2 pro optimální zobrazení Ery
23 PNH Ery- ruční nastavení cytometru Akvizice CD59 značených Ery a nastavit FL1 Fl2 kompenzace Akvizice CD235 značených Ery a nastavit FL2 FL1 kompenzace
24 PNH Ery- ruční nastavení cytometru Akvizice CD235a a CD59 značených Ery a stanovit umístění normálních Ery ( typ I) Akvizice vyšetřovaného vzorku
25 PNH Ery- automatické nastavení cytometru Korekce signálů pro FS-area a FS-height Nastavení PMT (> 2,5 rsd z baseline) Digitální kompenzace spektrálního přísvitu
26 PNH Ery Nefiltrované PBS!!!
27 PNH Ery Poorly stained normal RBC Courtesy of A. Illingworth Hodnocení z dot plot, z histogramu méně přínosné
28 PNH Ery-výkonnostní charakteristiky Clone size PNH clone N* Min. Max. Mean SD CV (%) >20% RBC II+III 3/ / / / / / % RBC II+III 3/ / /3 11.8/ / /5.3 <1% RBC II+ III 3/10 0.4/ / / / /6.1 * Opakovatelnost v sérii / mezilehlá preciznost Marinov et al.;clin HemLab Med, 2013; 51: Marinov et al.;clinlab, 2014;60:;
29 PNH Ery-mezilaboratorní opakovatelnost v sérii PNH Ery type III (big clone)-precision analysis PNH Ery type III (small clone)-precision analysis PNH Ery type III (minor clone)-precision analysis Ref. center Ref. center Ref. center > 20% Ref. center ,87 47,85 47,71 49,28 49, ,38 48,37 47,70 48,65 48, ,02 48,14 47,38 48,71 47,76 Mean 46,76 48,12 47,60 48,88 48,73 SD 0,27 0,21 0,15 0,28 0,86 CV 0,58 0,44 0,32 0,58 1,76 5%- 20% Ref. center ,10 11,16 10,45 11,48 9, ,96 10,77 10,59 11,72 9, ,24 10,86 10,39 11,45 10,44 Mean 10,10 10,93 10,48 11,55 10,10 SD 0,11 0,17 0,08 0,12 0,24 CV 1,13 1,53 0,80 1,05 0,24 < 1% Ref. center ,44 0,37 0,40 0,48 0, ,39 0,39 0,41 0,49 0, ,42 0,47 0,42 0,44 0,38 Mean 0,42 0,41 0,41 0,47 0,40 SD 0,02 0,04 0,01 0,02 0,02 CV 4,93 10,54 1,99 4,60 4,08 Marinov et al. Cytometry; 2013; 84B;
30 PNH Ery-mezilaboratorní mezilehlá preciznost PNH Ery type III (big clone)- reproducibility 60 PNH Ery type III (minor clone)-reproducibility Ref. center Ref. center > 20% Ref ,12 48,56 49,06 51,34 48, ,64 47,96 48,58 50,71 48, ,10 48,61 47,66 49,98 49, ,58 47,93 46,95 50,65 48, ,73 47,76 46,86 50,42 49,27 Mean 47,23 48,16 47,82 50,62 49,11 SD 0,71 0,35 0,87 0,44 0,24 CV 1,51 0,73 1,83 0,87 0,48 Marinov et al. Cytometry; 2013; 84B; %- 20% Ref ,27 11,59 11,01 10,97 10, ,69 11,27 10,88 12,49 10, ,67 11,07 10,83 11,50 10, ,11 11,34 10,97 11,44 10, ,97 11,12 10,49 11,30 10,86 Mean 10,34 11,28 10,84 11,54 10,81 SD 0,29 0,18 0,18 0,51 0,13 CV 2,82 1,63 1,70 4,41 1,23 < 1% Ref ,45 0,42 0,44 0,47 0, ,42 0,44 0,44 0,44 0, ,48 0,42 0,45 0,50 0, ,44 0,44 0,45 0,48 0, ,39 0,38 0,41 0,43 0,36 Mean 0,44 0,42 0,44 0,46 0,42 SD 0,03 0,02 0,01 0,03 0,04 CV 6,90 5,22 3,36 5,55 9,04
31 PNH Ery- lineární regrese Ref. center vs center 1 (RBC) y = 1,0227x R² = 0, Pearson r: Pearson r: Ref. center vs center 3 (RBC) y = 1,0387x R² = 0, Pearson r: Pearson r: Marinov et al. Cytometry; 2013; 84B; Ref. center vs center 2 (RBC) y = 1,0092x R² = Ref. center vs center 4 (RBC) y = 1,0157x R² =
32 PNH Ery- Bland Altmann Wilcoxon rank test: P= 0,08 (> 0.05) Wilcoxon rank test: P= 0,06 (> 0.05) Wilcoxon rank test: P= 0,053 (> 0.05) Wilcoxon rank test: P= 0,15 (> 0.05) Marinov et al. Cytometry; 2013; 84B;
33 PNH Leuko µl periferní krev (EDTA) Příslušné množství titrovaných MP Inkubace ve tmě a pokojové teplotě 30 minut Lyzace erytrocytů (Immunoprep, Optilyse, FACS Lyse, NH4Cl..) 1 promytí v PBA Nastavení objemu na 0.5-1ml (PBA) Akvizice na průtokovém cytometru
34 PNH Leuko 4 barevný protokol Beckman Coulter Gr FLAER-Alexa Fluor 488 CD24-PE (SN3,ALB9) CD15-PC5 (80H5) CD45-PC7 (J33) Mo FLAER-Alexa Fluor 488 CD14-PE (61D3,RMO52) CD64-PC5 (22) CD45-PC7 (J33) Becton Dickinson Gr FLAER-Alexa Fluor 488 CD24-PE (SN3,ML5) CD15-APC (H198) CD45-PerCP-C5.5 (2D1) Mo FLAER-Alexa Fluor 488 CD14-PE (61D3,MφP9) CD64-APC (10.1) CD45-PerCP-C5.5 (2D1) Sutherland et al.; Cytometry; 2012; 82B:
35 PNH Leuko - manuální nastavení Nastavení PMT signálů 1. Gr + GPI + MP na gate: umístění normálních Gr cytometru (4 barevný test) 2. Gr + MP na gate: umístění PNH Gr 3. Akvizice vyšetřovacího vzorku
36 PNH Leuko-nastavení cytometru ( 5 barev) Application settings Korekce hodnot pro FS-Area a FS-Height (area scaling)
37 PNH Leuko analýza - nastavení cytometru ( 5 colors) Nastavení optimálních PMT signálů (>2,5 rsd z nastavení baseline)
38 PNH Leuko analýza - nastavení cytometru ( 5 colors) Digitální kompenzace spektrálního přísvitu
39 Zobrazení PNH Granulocytů
40 Zobrazení PNH Monocytů
41 PNH Leuko -výkonnostní charakteristiky (4 barevný test) Clone size PNH clone Protocol N Min. Max. Mean SD CV (%) > 20% 1-20% Gr Mo Gr Mo < 1% Gr 4-color 3/ / / / / /0.3 5-color 3/ / / / / /0.1 6-color 3/ / / / / /0.1 4-color 3/ / / / / /0.1 5-color 3/ / / / / /0.1 6-color 3/ / / /99 0.3/ /0.2 4-color 3/ / / / / /3.6 5-color 3/ / / / / /1.7 6-color 3/ / / /12 0.1/ /1.5 4-color 3/10 9.9/ / / /.1 2.6/3.1 5-color 3/10 9.6/ / / / / color 3/ / /2 10.2/ / / color 3/10 0.5/ / / / /3.1 5-color 3/10 0.5/ / /0.5 0/0.02 1/2.9 6-color 3/10 0.5/ / /0.5 0/ /2.9 Marinov et al.;clin HemLab Med, 2013; 51: Marinov et al.;clinlab, 2014;60:;
42 Lineární regrese Bland Altmann (Gra) Marinov et al.;clin HemLab Med, 2013; 51: Marinov et al.;clinlab, 2014;60:;
43 Lineární regrese Bland Altmann (Mo) Marinov et al.;clin HemLab Med, 2013; 51: Marinov et al.;clinlab, 2014;60:;
44 PNH Gr: mezilaboratorní opakovatelnost v sérii PNH Gr (big clone)-precision analysis PNH Gr (small clone)-precision analysis PNH Gr (minor clone)-precision analysis Ref. center Ref. center Ref. center > 20% Ref. center ,66 98,31 99,74 99,73 99, ,64 98,64 99,72 99,65 99, ,65 98,57 99,73 99,71 99,23 Mean 99,65 98,51 99,73 99,70 99,49 SD 0,01 0,14 0,01 0,03 0,18 CV 0,01 0,14 0,01 0,03 0,18 5%- 20% Ref. center ,73 6,56 6,53 6,32 8, ,84 6,67 6,47 6,21 7, ,76 6,85 6,69 6,29 7,79 Mean 6,78 6,69 6,56 6,27 7,95 SD 0,05 0,12 0,09 0,05 0,13 CV 0,69 1,79 1,41 0,74 1,59 < 1% Ref. center ,64 0,53 0,51 0,53 0, ,64 0,51 0,72 0,58 0, ,59 0,50 0,56 0,51 0,26 Mean 0,62 0,51 0,60 0,54 0,25 SD 0,02 0,01 0,09 0,03 0,02 CV 3,78 2,43 15,01 5,45 7,64 Marinov et al. Cytometry; 2013; 84B;
45 PNH Mo: mezilaboratorní opakovatelnost v sérii PNH Mo (big clone)-precision analysis Ref. center > 20% Ref. center ,65 95,29 99,27 98,95 99, ,66 96,41 99,06 98,18 99, ,70 95,77 99,22 98,35 99,54 Mean 99,67 95,82 99,18 98,49 99,38 SD 0,02 0,46 0,09 0,33 0,11 CV 0,02 0,48 0,09 0,34 0,11 PNH Mo (small clone)-precision analysis Ref. center %- 20% Ref. center ,89 8,42 9,64 8,44 9, ,91 8,72 10,10 8,58 8, ,90 9,32 9,80 8,55 9,01 Mean 8,90 8,82 9,85 8,52 9,25 SD 0,01 0,37 0,19 0,06 0,37 CV 0,09 4,24 1,94 0,71 3,95 PNH Mo (minor clone)-precision analysis Ref. center < 1% Ref. center ,70 0,79 0,88 0,93 1, ,65 0,81 1,01 0,93 1, ,73 0,78 1,24 0,97 1,12 Mean 0,69 0,79 1,04 0,94 1,20 SD 0,03 0, 01 0,15 0,02 0,05 CV 4,76 1, 57 14,27 2,00 4,54 Marinov et al. Cytometry; 2013; 84B;
46 PNH Gr: mezilaboratorní mezilehlá preciznost PNH Gr (big clone)-reproducibility PNH Gr (small clone)-reproducibility PNH Gr (minor clone) - reproducibility Ref. center Ref. center Ref. center > 20% Ref ,67 99,22 99,76 99,63 99, ,71 98,74 99,70 99,25 99, ,72 98,97 99,73 99,45 99, ,74 98,87 99,67 99,34 99, ,76 98,35 99,78 99,54 99,68 Mean 99,72 98,83 99,73 99,44 99,68 SD 0,03 0,29 0,04 0,14 0,02 CV 0,03 0,29 0,04 0,14 0,02 Marinov et al. Cytometry; 2013; 84B; %- 20% Ref ,58 6,23 6,23 5,30 7, ,35 6,86 6,28 5,63 7, ,47 6,84 6,29 5,41 8, ,41 6,59 6,17 5,99 8, ,61 6,63 6,71 6,06 8,15 Mean 6,48 6,63 6,34 5,68 8,05 SD 0,10 0,23 0,19 0,53 0,18 CV 1,52 3,43 3,03 5,34 2,20 < 1% Ref ,56 0,46 0,63 0,49 0, ,66 0,54 0,55 0,54 0, ,67 0,44 0,63 0,53 0, ,59 0,48 0,53 0,55 0, ,67 0,49 0,57 0,52 0,25 Mean 0,63 0,48 0,58 0,53 0,23 SD 0,05 0,03 0,04 0,02 0,02 CV 7,31 6,99 7,08 3,91 10,33
47 PNH Mo: mezilaboratorní mezilehlá preciznost PNH Mo (big clone)- reproducibility PNH Mo (small clone) - reproducibility PNH Mo (minor clone) - reproducibility Ref. center Ref. center Ref. center > 20% Ref ,58 96,31 99,09 98,86 99, ,64 95,23 99,36 98,12 99, ,55 96,35 99,16 98,28 99, ,50 95,61 99,34 98,39 99, ,64 96,05 99,00 98,28 99,68 Mean 99,58 95,91 99,19 98,39 99,56 SD 0,05 0,43 0,14 0,25 0,07 CV 0,05 0,45 0,14 0,25 0,07 Marinov et al. Cytometry; 2013; 84B; %- 20% Ref ,75 9,29 9,97 8,84 9, ,10 8,04 10,42 8,22 9, ,10 8,49 9,85 8,59 8, ,45 9,09 10,39 8,01 8, ,86 9,08 9,95 7,96 8,65 Mean 8,45 8,80 10,12 8,32 8,80 SD 0,49 0,46 0,24 0,34 0,26 CV 5,80 5,27 2,37 4,09 2,90 < 1% Ref ,79 0,83 1,05 0,93 1, ,85 0,80 0,74 1,15 1, ,82 1,02 0,97 0,93 1, ,89 0,57 0,93 0,96 1, ,92 0,79 0,80 0,84 1,11 Mean 0,85 0,8 0,90 0,96 1,23 SD 0,05 0,14 0,11 0,10 0,19 CV 5,47 17,83 12,59 10,63 15,40
48 NH Leuko- mezilaboratorní lineární regrese Ref. center vs center 1 (WBC) y = 0,9755x R² = 0, Ref. center vs center 2 (WBC) y = 0,9984x R² = 0, Pearson r: Pearson r: Ref. center vs center 3 (WBC) y = 0,9933x R² = 0, Pearson r: Pearson r: Ref. center vs center 4 (WBC) y = 0,9975x R² = 0, Marinov et al. Cytometry; 2013; 84B;
49 PNH Leuko-Bland Altmann Wilcoxon rank test: P= 0,56 (> 0.05) Wilcoxon rank test: P= 0,56 (> 0.05) Wilcoxon rank test: P= 0,21 (> 0.05) Wilcoxon rank test: P= 1,0 (> 0.05) Marinov et al. Cytometry; 2013; 84B;
50 PNH Leuko 6 barevný test Beckman Coulter platform v průběhu validace Becton Dickinson platform Gr+ Mo FLAER- Alexa 488 CD24-PE (SN3) CD15-APC (H198) CD14-PerCP-C5.5 (61D3) CD64-PC7 (10.10 CD45-APC-H7 (2D1) Marinov et al.;clin HemLab Med, 2013; 51: Marinov et al.;clinlab, 2014;60:;
51 PNH Leuko -výkonnostní charakteristiky (6 barevný test) Clone size PNH clone Protocol N Min. Max. Mean SD CV (%) > 20% 1-20% Gr Mo Gr Mo < 1% Gr 4-color 3/ / / / / /0.3 5-color 3/ / / / / /0.1 6-color 3/ / / / / /0.1 4-color 3/ / / / / /0.1 5-color 3/ / / / / /0.1 6-color 3/ / / /99 0.3/ /0.2 4-color 3/ / / / / /3.6 5-color 3/ / / / / /1.7 6-color 3/ / / /12 0.1/ /1.5 4-color 3/10 9.9/ / / /.1 2.6/3.1 5-color 3/10 9.6/ / / / / color 3/ / /2 10.2/ / / color 3/10 0.5/ / / / /3.1 5-color 3/10 0.5/ / /0.5 0/0.02 1/2.9 6-color 3/10 0.5/ / /0.5 0/ /2.9 Marinov et al.;clin HemLab Med, 2013; 51: Marinov et al.;clinlab, 2014;60:;
52 PNH Leuko 6 barevný protokol
53 PNH Leuko 5 barevný protokol (CD157) Beckman Coulter platform Gr+ Mo FLAER-Alexa Fluor 488 CD157-PE (SY11B5) CD15-PC5 (80H5) CD64-ECD (22) CD45 PC7 (J33) Becton Dickinson platform Gr+ Mo FLAER-Alexa Fluor 488 CD157-PE (SY11B5) CD15-APC (H198) CD64-PC7 (10.1) CD45 PerCP-C5.5 (2D1) Sutherland et al.:cytometry; 2013 Marinov et al.;ijlh, 2014
54 PNH Leuko 5 barevný protokol
55 PNH Leuko-výkonnostní charakteristiky (5 barevný test) Clone size > 20% 1-20% PNH clone Gr Mo Gr Mo Protocol N Min. Max. Mean SD CV (%) 5-color 3/3 51.3/ / / / /0.1 6-color 3/3 51.5/ / / / /0.1 5-color 3/3 73.5/ / / / /0.7 6-color 3/3 74.6/ / / / /0.7 5-color 3/3 7.4/ / / / /0.7 6-color 3/3 6.9/ / /15.1 0/ /1.6 5-color 3/3 18.4/ / / / /2.6 6-color 3/3 18.8/ / /36 0.1/ /1.6 5-color 3/3 0.3/ / /0.2 0/0 3/3.7 < 1% Gr 6-color 3/3 0.3/ / /0.2 0/0 5.8/4 Mo 5-color 3/3 0.8/ / /0.5 0/0 8.1/4.8 6-color 3/3 0.8/ / /0.6 0/0 5.4/3.2 Marinov et al.;ijlh, 2014
56 % p o s it iv e % p o s it iv e % p o s it iv e PNH Leuko- opakovatelnost v sérii (5 barevný test) (a ) (b ) In t r a - a s s a y p r e c is io n - m e d iu m c lo n e (c ) In t r a - a s s a y p r e c is io n - m in o r c lo n e In t r a - a s s a y p r e c is io n - b ig c lo n e G r-5 c G r-6 c M o -5 c M o -6 c P o p u la t io n - p r o t o c o l 0 G r-5 c G r-6 c M o -5 c M o -6 c P o p u la t io n - p r o t o c o l G r-5 c G r-6 c M o -5 c M o -6 c P o p u la t io n - p r o t o c o l VC 5c: 0.88%-0.20% VC 6c: 0.42%-0.72% VC 5c: 2.40%-0.31% VC 6c: 2.29%-0.28% VC 5c: 3.02%-5.83% VC 6c: 8.14%-5.41% Marinov et al.;ijlh, 2014
57 % p o s it iv e % p o s it iv e % p o s it iv e PNH Leuko: mezilehlá preciznost (5 barevný test) (d ) In t e r - a s s a y p r e c is io n - b ig c lo n e (e ) In t e r - a s s a y p r e c is io n - m e d iu m c lo n e (f) 5. 0 In t e r - a s s a y p r e c is io n - m in o r c lo n e G r-5 c G r-6 c M o -5 c M o -6 c P o p u la t io n - p r o t o c o l 0 G r-5 c G r-6 c M o -5 c M o -6 c P o p u la t io n - p r o t o c o l G r-5 c G r-6 c M o -5 c M o -6 c P o p u la t io n - p r o t o c o l VC 5c: 0.09%-0.08% VC 6c: 0.49%-0.72% VC 5c: 0.71%-1.63% VC 6c: 2.15%-1.55% VC 5c: 3.71%-4.04% VC 6c: 4.80%-3.19% Marinov et al.;ijlh, 2014
58 PNH Leuko: lineární regrese (5 barevný test) (a) c vs. 6c (Granulocytes) y = x r² = (b) c vs. 6c (Monocytes) y = 0.997x r² = Pearson r: 0.99 Pearson r: 0.99 Marinov et al.;ijlh, 2014
59 D i f f e r e n c e i n r e s u lt s D i f f e r e n c e i n r e s u lt s PNH Leuko: Bland Altmann (5 barevný test) (c ) 5. 0 M e a n b ia s : (d ) 5. 0 M e a n b ia s : M e a n o f r e s u lt s ( 5 c v s. 6 c ) ( G r a n u lo c y t e s ) M e a n o f r e s u lt s ( 5 c v s. 6 c ) ( M o n o c y t e s ) Wilcoxon rank test: P= 0.23 (> 0.05) Wilcoxon rank test: P=0.08 (> 0.05) Marinov et al.;ijlh, 2014
60 CD24-Granulocytes CD24-Granulocytes CD14-Granulocytes CD24-Granulocytes CD24-Granulocytes Monitorování minoritních PNH klonů (AA) Září 2008 Prosinec 2008 Březen 2009 Květen 2009 FLAER-GPI Anchor Marker FLAER-GPI Anchor Marker FLAER-GPI Anchor Marker FLAER-GPI Anchor Marker Gr. klon: 3.8% Gr klon : 7.6% Gr klon : 14.2% Gr klon : 23.3% Ery klon : 0.8% Ery klon : 1.6% Ery klon : 1.8% Ery klon : 2.4% CD59 GPI Anchor Protein CD59 GPI Anchor Protein CD59 GPI Anchor Protein CD59 GPI Anchor Protein 3 months 6 months 9 měsíců Vývoj PNH klonu v průběhu jednoho roku Source- Dahl-Chase Diagnostic Services.
Validace doporučených postupů pro diagnostiku a monitorování PNH průtokovou cytometrií. Martina Kohoutová, ÚHKT, Praha Iuri Marinov, ÚHKT, Praha
Validace doporučených postupů pro diagnostiku a monitorování PNH průtokovou cytometrií Martina Kohoutová, ÚHKT, Praha Iuri Marinov, ÚHKT, Praha 1 PNH- patofyziologie Somatická mutace v genu pig-a, který
VíceStandardizace v průtokové cytometrii. Hana Glier, Martin Špryngar Konference Analytická cytometrie VII Mikulov, 2013
Standardizace v průtokové cytometrii Hana Glier, Martin Špryngar Konference Analytická cytometrie VII Mikulov, 2013 Osnova 1. Standardizace měření - co a proč standardizovat 2. Platforma BD CS&T modul
VíceImunofenotypizace leukemií z kostní dřeně, periferní krve, výpotku a mozkomíšního moku průtokovou cytometrií
Imunofenotypizace leukemií z kostní dřeně, periferní krve, výpotku a mozkomíšního moku průtokovou cytometrií 1) Použití validovaných kitů od výrobce značka CE/IVD 2) Home made metoda s vlastní (laboratoří
VíceNastavení metod pro imunofenotypizaci krevních. EXBIO Praha, a.s.
Nastavení metod pro imunofenotypizaci krevních buněk pomocí průtokové cytometrie Martin Špryngar EXBIO Praha, a.s. Obsah: Porovnání vícebarevné vs. dvoubarevné cytometrie Požadavky průtokové cytometrie
VíceFunkční testy: BasoFlowEx Kit FagoFlowEx Kit
Mgr. Martin Čonka EXBIO Praha, a.s. Funkční testy: BasoFlowEx Kit FagoFlowEx Kit Funkční testy napodobení biologický procesů in vitro nehrozí nebezpečí ohrožení pacienta v průběhu testování možná analýza
VícePolychromatická cytometrie - setup experimentu
Polychromatická cytometrie - setup experimentu Polychromatická cytometrie - setup experimentu Cíl: Najít nejlepší kompromis Hladina exprese Intenzita fluorochromu Četnost subsetu buněk Kvalitativní x kvantitativní
VíceMnohobarevná cytometrie v klinické diagnostice
Mnohobarevná cytometrie v klinické diagnostice Mgr. Marcela Vlková, Ph.D. Ústav klinické imunologie a alergologie, FN u sv. Anny v Brně Průtoková cytometrie v klinické laboratoři Relativní a absolutní
VíceMarcela Vlková ÚKIA, FNUSA, Brno Veronika Kanderová CLIP, 2. LF UK a FN Motol, Praha VALIDACE A VERIFIKACE V PRŮTOKOVÉ CYTOMETRII
Marcela Vlková ÚKIA, FNUSA, Brno Veronika Kanderová CLIP, 2. LF UK a FN Motol, Praha VALIDACE A VERIFIKACE V PRŮTOKOVÉ CYTOMETRII KONTROLA KVALITY Výsledky analytických měření mají silný dopad v praxi:
VíceAnalytické znaky laboratorní metody Interní kontrola kvality Externí kontrola kvality
Analytické znaky laboratorní metody Interní kontrola kvality Externí kontrola kvality RNDr. Alena Mikušková FN Brno Pracoviště dětské medicíny, OKB amikuskova@fnbrno.cz Analytické znaky laboratorní metody
VíceVyužití mnohobarevné průtokové cytometrie pro vyšetření lymfocytárních subpopulací Jana Nechvátalová
Využití mnohobarevné průtokové cytometrie pro vyšetření lymfocytárních subpopulací Jana Nechvátalová Ústav klinické imunologie a alergologie Fakultní nemocnice u sv. Anny v Brně PRIMÁRNÍ IMUNODEFICIENCE
VíceNová doporučení o interní kontrole kvality krevního obrazu. Soňa Vytisková
Nová doporučení o interní kontrole kvality krevního obrazu Soňa Vytisková 1 2 3 4 5 ÚVOD Programy vnitřní kontroly kvality klinických laboratoří mají sice svá obecná pravidla, ale je nutné je individuálně
VíceKAZUISTIKY V BUNĚČNÉ IMUNOLOGII. UŽIVATELSKÉ SETKÁNÍ PRŮTOKOVÉ CYTOMETRIE BECKMAN COULTER Ing. Pavla Plačková
KAZUISTIKY V BUNĚČNÉ IMUNOLOGII UŽIVATELSKÉ SETKÁNÍ PRŮTOKOVÉ CYTOMETRIE BECKMAN COULTER 13.-14. 5. 2018 Ing. Pavla Plačková IMUNITNÍ SYSTÉM udržování integrity organizmu obranyschopnost autotolerance
VíceMETODY VYŠETŘOVÁNÍ BUNĚČNÉ IMUNITY. Veřejné zdravotnictví
METODY VYŠETŘOVÁNÍ BUNĚČNÉ IMUNITY Veřejné zdravotnictví METODY VYŠETŘOVÁNÍ BUNĚČNÉ IMUNITY průtoková cytometrie metody stanovení funkční aktivity lymfocytů testy fagocytárních funkcí Průtoková cytometrie
VíceNová doporučení o interní kontrole kvality koagulačních vyšetření. RNDr. Ingrid V. Hrachovinová, Ph.D. Laboratoř pro poruchy hemostázy, ÚHKT Praha
Nová doporučení o interní kontrole kvality koagulačních vyšetření RNDr. Ingrid V. Hrachovinová, Ph.D. Laboratoř pro poruchy hemostázy, ÚHKT Praha Proč vnitřní kontrola kvality (VKK) ve vyšetření hemostázy?
VíceZákladní koagulační testy
Základní koagulační testy testy globální Dělení testů postihují celý systém (i více) testy skupinové (screening( screening) postihují určitou část koagulačního systému umožňují odlišení poruch vnitřní
VíceNové metody v průtokové cytometrii. Vlas T., Holubová M., Lysák D., Panzner P.
Nové metody v průtokové cytometrii Vlas T., Holubová M., Lysák D., Panzner P. Průtoková cytometrie Analytická metoda využívající interakce částic a záření. Technika se vyvinula z počítačů částic Počítače
VíceKontrola kvality. Marcela Vlková ÚKIA, FNUSA Veronika Kanderová CLIP, FN Motol
Kontrola kvality Marcela Vlková ÚKIA, FNUSA Veronika Kanderová CLIP, FN Motol Kontrola kvality Výsledky analytických měření mají silný dopad v praxi: v klinických laboratořích mohou rozhodným a někdy i
VíceFluoroSpheres Kód K0110
FluoroSpheres Kód K0110 6. vydání Kalibrační kuličky pro denní monitorování průtokového cytometru. Činidla obsažená v kitu lze použít pro 40 kalibrací. (108650-004) SSK0110CE_02/CZ/2015.12 p. 1/9 Obsah
VíceSPC NH_OKL 02 Metody hematologie
Strana č./celkem stran: 1/8 Obsah Anti-Xa aktivita LMWH ( anti-xa aktivita nízkomolekulárního heparinu)... 1 AT Antitrombin... 2 APTT (aktivovaný parciální tromboplastinový test) poměr... 2 D - dimery...
VícePrincipy a instrumentace
Průtoková cytometrie Principy a instrumentace Ing. Antonín Hlaváček Úvod Průtoková cytometrie je moderní laboratorní metoda měření a analýza fyzikálních -chemických vlastností buňky během průchodu laserovým
VíceMimodřeňová expanze plazmocytů do CNS u mnohočetného myelomu
Setkání uživatelů Průtokové cytometrie Beckman Coulter, 13.-14.5.2018, Valeč Mimodřeňová expanze plazmocytů do CNS u mnohočetného myelomu Říhová Lucie a kol. OKH, FN Brno BMG při ÚPF, LF MU Lokalizace
VíceSPC NH_OKL 02 Metody hematologie
Strana č./celkem stran: 1/9 Obsah Anti-Xa aktivita LMWH ( anti-xa aktivita nízkomolekulárního heparinu)... 1 AT Antitrombin... 2 APTT (aktivovaný parciální tromboplastinový test) poměr... 2 D - dimery...
VíceFlowcytometrie u MG. - zasedání pracovní skupiny. Lucie Kovářová a kol. OKH, FN Brno
Flowcytometrie u MG - zasedání pracovní skupiny Lucie Kovářová a kol. OKH, FN Brno 2/26 Program setkání Program setkání 1) Využití flow cytometrie u MG 2) Zkušenosti jednotlivých center - zhodnocení dotazníku
VíceKomplementový systém
Komplementový systém klinický seminář nefrologie 1.12.2015 Příklady indikací pro analýzu komplementu Možnost screeningového vyšetření funkční aktivity jednotlivých drah komplementu Způsob hodnocení Frekvence
VíceSEZNAM LABORATORNÍCH VYŠETŘENÍ PHEM Centrální laboratoře, LKCHI Pracoviště hematologie
Příloha č. 2 Laboratorní příručky LKCHI SEZNAM LABORATORNÍCH VYŠETŘENÍ PHEM Centrální laboratoře, LKCHI Pracoviště hematologie Vypracovala: Mgr. Naďa Roučková, vedoucí PHEM Biologické referenční intervaly:
VíceValidace stanovení volných monoklonálních lehkých řetězců v České republice
Validace stanovení volných monoklonálních lehkých řetězců v České republice Vávrová, J., Tichý, M., Friedecký, B., Maisnar, V., Hájek, R., Čermáková, Z., Dastych, M., Gottwaldová, J., Kučera, P., Krotká,
VíceJaké máme leukémie? Akutní myeloidní leukémie (AML) Akutní lymfoblastická leukémie (ALL) Chronické leukémie, myelodysplastický syndrom,
Akutní myeloidní leukémie (AML) Jaké máme leukémie? Akutní lymfoblastická leukémie (ALL) Chronické leukémie, myelodysplastický syndrom, Chronické leukémie, mnohočetný myelom, Někdy to není tak jednoznačné
VíceRoman Hájek. Zbytkové nádorové onemocnění. Mikulov 5.září, 2015
Roman Hájek Zbytkové nádorové onemocnění Mikulov 5.září, 2015 Zbytkové nádorové onemocnění 1. Minimal residual disease (MRD) Proč lékaře zbytkové nádorové onemocnění stále více zajímá? Protože se zásadně
VíceIng. Martina Almáši, Ph.D. OKH-LEHABI FN Brno, Babákova myelomová skupina při Ústavu patologické fyziologie, LF MU, Brno
Zpracování a využití biologického materiálu pro výzkumné účely od nemocných s monoklonální gamapatií Ing. Martina Almáši, Ph.D. OKH-LEHABI FN Brno, Babákova myelomová skupina při Ústavu patologické fyziologie,
VíceProgrese HIV infekce z pohledu laboratorní imunologie
Progrese HIV infekce z pohledu laboratorní imunologie 1 Lochmanová A., 2 Olbrechtová L., 2 Kolčáková J., 2 Zjevíková A. 1 OIA ZÚ Ostrava 2 klinika infekčních nemocí, FN Ostrava HIV infekce onemocnění s
VíceVýsledky léčby Waldenströmovy makroglobulinemie na IHOK FN Brno
C Z E C H G R O U P C Z E C H G R O U P Výsledky léčby Waldenströmovy makroglobulinemie na IHOK FN Brno Luděk Pour IHOK FN Brno 10-11.4. 2015 XIII. Roční setkání CMG C M G Č E S K Á M YE LO M O VÁ S K
VíceStanovení základních lymfocytárních populací -Příprava k akreditaci IVD metoda
Stanovení základních lymfocytárních populací -Příprava k akreditaci IVD metoda Mgr. Marcela Vlková, Ph.D; Mgr. Olga Tichá, Ph.D. Ústav klinické alergologie a imunologie, FNUSA, Brno RNDr. Veronika Kanderová,
VíceValidační protokol LT CRP HS II (ADVIA 1800)
Validační protokol LT CRP HS II (ADVIA 1800) Datum vydání: 9.5.2011 Zpracoval: Ing. Luděk Šprongl Pracoviště: Centrální laboratoř, Šumperská nemocnice a.s. Validační protokol LT CRP HS II 1. CÍL, PŘEDMĚT
VícePetr Breinek. BC_HbA1c_N2011 1
Glykovaný hemoglobin ba1c Petr Breinek B_bA1c_N2011 1 Glykovaný hemoglobin (ba1c) Ukazatel dlouhodobé kompenzace diabetu Diagnostika onemocnění Kontrola terapie Včasné odhalení hrozících komplikací V roce
VíceProtokol o zkoušce č.j. 1/2016, počet stran 12, strana číslo 1. V Praze dne Č.j. 1/2016
Protokol o zkoušce č.j. 1/2016, počet stran 12, strana číslo 1 Referenční laboratoř pro klinickou biochemii při Ústavu lékařské biochemie a laboratorní diagnostiky VFN Karlovo nám. 32, 121 11 Praha 2,
VíceSeznam vyšetření. Nesrážlivá periferní krev nebo kostní dřeň
VD.PCE 08 Laboratorní příručka Příloha č. 1: Seznam vyšetření Molekulární hematologie a hematoonkologie Vyšetření mutačního stavu IgV H u CLL Detekce přestavby IgV H u jiných B lymfoproliferací RNA nebo
VíceSeznámení s novým vydáním normy ISO 15197:2013. Drahomíra Springer. ÚLBLD VFN a 1.LF UK Praha
Seznámení s novým vydáním normy ISO 15197:2013 Drahomíra Springer ÚLBLD VFN a 1.LF UK Praha Glukometr POCT Selfmonitoring Malý, spolehlivý, správný Zdravotnictví a jeho zásadní otázka cena kvalita dostupnost
VíceRoman Hájek Tomáš Jelínek. Plazmocelulární leukémie (PCL)
Roman Hájek Tomáš Jelínek Plazmocelulární leukémie (PCL) Definice (1) vzácná forma plazmocelulární dyskrázie nejagresivnější z lidských monoklonálních gamapatií incidence: 0,04/100 000 obyvatel evropské
VíceHLA B27: molekulární marker Ankylozující spondylitidy. Peter Novota. 16.2.2016, Praha
HLA B27: molekulární marker Ankylozující spondylitidy Peter Novota 16.2.2016, Praha HLA B součást MHC komplexu HLA I. třídy (chromosom 6) úsek značně polymorfní antigeny se vyskytují na povrchu buněk podílí
VíceVerifikace sérologických testů v imunologických laboratořích ISO 15189 5.5 Postupy vyšetření
Verifikace sérologických testů v imunologických laboratořích ISO 15189 5.5 Postupy vyšetření Andrea Vinciková Centrum imunologie a mikrobiologie Zdravotní ústav se sídlem v Ústí nad Labem Validace Ověřování,
VíceZavedení nového přístroje v hematologické laboratoři
Doporučení laboratorní sekce České hematologické společnosti ČLS JEP Zpracoval: S. Vytisková, J. Juráňová, I. Malíková Recenzent: - Schváleno Laboratorní sekcí ČHS ČLS JEP: 9.3.2017 Schváleno výborem ČHS
VíceVerze 07 Příloha č. 1
Hematologicko-transfuzní dělení ABECEDNÍ SEZNAM VYŠETŘENÍ S REFERENČNÍMI HODNOTAMI AB0 Hemolytické omocnění novorozence : Imunohematologická Srážlivá žilní bo pupečníková krev 1x zkumavka 4-6 ml plast
VíceProtokol o testování systému glukometr měřící proužky Glukometr BioHermes GluCoA1c
Protokol o testování č.j. 4/2019, počet stran 12, strana číslo 1 Referenční laboratoř pro klinickou biochemii při Ústavu lékařské biochemie a laboratorní diagnostiky VFN Karlovo nám. 32, 121 11 Praha 2,
VícePolychromatická cytometrie v hemato-onkologii
Polychromatická cytometrie v hemato-onkologii Tomáš Kalina, Ester Mejstříková, Ondřej Hrušák Klinika dětské hematologie a onkologie Univerzita Karlova, 2. LF a FN Motol - cytometrie http://clip.lf2.cuni.cz
VíceMagPurix Blood DNA Extraction Kit 200
MagPurix Blood DNA Extraction Kit 200 Kat. č. ZP02001-48 Doba zpracování: 50-60 minut pro MagPurix 12S 50-70 minut pro MagPurix 24 Použití Souprava MagPurix Blood DNA Extraction Kit 200 je určena pro izolátor
VíceSeznam vyšetření. Detekce markerů: F2 (protrombin) G20210A, F5 Leiden (G1691A), MTHFR C677T, MTHFR A1298C, PAI-1 4G/5G, F5 Cambridge a Hong Kong
VD.PCE 02 Laboratorní příručka Příloha č. 2: Seznam vyšetření Molekulární hematologie a hematoonkologie Detekce markerů: F2 (protrombin) G20210A, F5 Leiden (G1691A), MTHFR C677T, MTHFR A1298C, PAI-1 4G/5G,
VíceProtokol o testování systému glukometr měřící proužky Glukometr Contour PLUS
Protokol o zkoušce č.j. 1/2014, počet stran 12, strana číslo 1 Referenční laboratoř pro klinickou biochemii při Ústavu lékařské biochemie a laboratorní diagnostiky VFN Karlovo nám. 32, 121 11 Praha 2,
VíceVYUŽITÍ A VALIDACE AUTOMATICKÉHO FOTOMETRU V ANALÝZE VOD
Citace Kantorová J., Kohutová J., Chmelová M., Němcová V.: Využití a validace automatického fotometru v analýze vod. Sborník konference Pitná voda 2008, s. 349-352. W&ET Team, Č. Budějovice 2008. ISBN
VíceVyužití flowcytometrie v diagnostice lymfoproliferativních onemocnění kazuistiky
Využití flowcytometrie v diagnostice lymfoproliferativních onemocnění kazuistiky PAVLA BRADÁČOVÁ, ODDĚLENÍ KLINICKÉ HEMATOLOGIE MASARYKOVA NEMOCNICE ÚSTÍ NAD LABEM SETKÁNÍ UŽIVATELŮ PRŮTOKOVÉ CYTOMETRIE
VíceRozšířený protokol 1/2012 o testování systému glukometr měřící proužky Wellion Calla light na žádost zadavatele
Protokol o zkoušce č.j. 4/2012, počet stran 14, strana číslo 1 Referenční laboratoř pro klinickou biochemii při Ústavu lékařské biochemie a laboratorní diagnostiky VFN Karlovo nám. 32, 121 11 Praha 2,
VíceIMUNOENZYMATICKÉ SOUPRAVY K DIAGNOSTICE CYTOMEGALOVIROVÉ INFEKCE
INFEKČNÍ SÉROLOGIE Virologie IMUNOENZYMATICKÉ SOUPRAVY K DIAGNOSTICE CYTOMEGALOVIROVÉ INFEKCE Cytomegalovirus ELISA soupravy jsou určeny ke stanovení specifických protilátek třídy IgA, IgG a IgM v lidském
VíceParametry metod automatické fotometrické analýzy
Parametry metod automatické fotometrické analýzy Každá metoda prováděná automatickým biochemickým analyzátorem má v softwaru řídícího počítače nadefinované parametry: číslo (aplikační kód) metody název
Vícestrojů umožň lní vstupní infiltraci Mgr. Silvie Dudová, RNDr. Iva Burešová, Drahomíra Kyjovská
Možnosti a změny při p i zpracování vzorků kostní dřeně po aktivaci přístrojp strojů umožň žňujících ch selekci MM buněk k ve vysoké čistotě i při p i minimáln lní vstupní infiltraci Mgr. Silvie Dudová,
VícePRŮTOKOVÁ CYTOMETRIE. Princip a využití. Lucie Říhová OKH, FN Brno
PRŮTOKOVÁ CYTOMETRIE Princip a využití Lucie Říhová OKH, FN Brno Průtokový cytometr flow cytometrie (flow+cyto+metrie) specializovanější varianta fluorescenčního mikroskopu v kombinaci s krevním analyzátorem
VíceCytogenetické vyšetřovací metody v onkohematologii Zuzana Zemanová
Cytogenetické vyšetřovací metody v onkohematologii Zuzana Zemanová Centrum nádorové cytogenetiky Ústav klinické biochemie a laboratorní diagnostiky VFN a 1. LF UK v Praze Klinický význam cytogenetických
VíceProtokol o srovnání POCT EUROLyser CRP s akreditovanou metodou stanovení CRP imunoturbidimetricky na analyzátoru Unicel DxC 800
Protokol o zkoušce č.j. 3/2016, počet stran 8, strana číslo 1 Referenční laboratoř pro klinickou biochemii při Ústavu lékařské biochemie a laboratorní diagnostiky VFN Karlovo nám. 32, 121 11 Praha 2, tel.:
VíceAplikace průtokové cytometrie v klinické imunologii a hematologii
Aplikace průtokové cytometrie v klinické imunologii a hematologii Lukáš Kubala kubalal@ibp.cz Laboratoř patofyziologie volných radikálů BFÚ AV ČR Imunologie - Stanovení statusu imunitního systému Vrozené
VíceObecné zásady interpretace výsledků - mikrobiologie vody
Obecné zásady interpretace výsledků - mikrobiologie vody Hodnocení rozborů vody Konzultační den RNDr. Jaroslav Šašek ČSN P ENV ISO 13843: 2002 Jakost vod - Pokyny pro validaci mikrobiologických metod Mez
VíceHuntingtonova choroba
Huntingtonova choroba Renata Gaillyová OLG FN Brno Huntingtonova choroba je dědičné neurodegenerativní onemocnění mozku, které postihuje jedince obojího pohlaví příznaky se obvykle začínají objevovat mezi
VícePříspěvek k hodnocení prognostického potenciálu indexu proliferace a apoptózy plazmatických buněk u mnohočetného myelomu
Příspěvek k hodnocení prognostického potenciálu indexu proliferace a apoptózy plazmatických buněk u mnohočetného myelomu Minařík J., Ordeltová M., Ščudla V., Vytřasová, M., Bačovský J., Špidlová A. III.interní
VíceMolekulární hematologie a hematoonkologie
VD.PCE 02 Laboratorní příručka Příloha č. 2: Seznam vyšetření GENETIKA Molekulární hematologie a hematoonkologie Detekce markerů: F2 (protrombin) G20210A, F5 Leiden (G1691A F2 (protrombin) G20210A, F5
VíceVYŠETŘENÍ FETOMATERNÁLNÍ HEMORRHAGIE POMOCÍ PRŮTOKOVÉ CYTOMETRIE
VYŠETŘENÍ FETOMATERNÁLNÍ HEMORRHAGIE POMOCÍ Zajíc T. 1, Kamenická H. 2, Kuťková D. 2, Veselá I. 2, Bydžovská I. 3, Zemanová D. 3, Gavendová H. 3, Procházková R. 2 Krajská nemocnice Liberec, a.s. 1 Oddělení
VíceLaboratoř rutinního provozu
Informátor Hemato-onkologické kliniky FNOL 2/2011 é Změna referenčních mezí krevního obrazu pro dospělé a děti Laboratoř rutinního provozu Laboratoř rutinního provozu HOK FNOL sděluje všem žadatelům o
VíceNÁVOD K POUŽITÍ VÁPNÍK 600 KATALOGOVÉ ČÍSLO 207
NÁVOD K POUŽITÍ VÁPNÍK 600 KATALOGOVÉ ČÍSLO 207 POUŽITÍ Souprava Vápník 600 se používá ke kvantitativnímu stanovení koncentrace vápenatých iontů v séru a moči. SOUHRN V lidském organismu je vázána převážná
VíceProtokol o zkoušce č.j. 5/2014, počet stran 13, strana číslo 1. V Praze dne Č.j. 5/2014
Protokol o zkoušce č.j. 5/2014, počet stran 13, strana číslo 1 Referenční laboratoř pro klinickou biochemii při Ústavu lékařské biochemie a laboratorní diagnostiky VFN Karlovo nám. 32, 121 11 Praha 2,
VíceVÝZNAM NĚKTERÝCH FAKTORŮ PREANALYTICKÉ FÁZE V MOLEKULÁRNÍ BIOLOGII
VÝZNAM NĚKTERÝCH FAKTORŮ PREANALYTICKÉ FÁZE V MOLEKULÁRNÍ BIOLOGII Plíšková L., Hrochová K., Kutová R. Ústav klinické biochemie a diagnostiky FN Hradec Králové PREANALYTICKÁ FÁZE V MOLEKULÁRNÍ BIOLOGII
VíceProGastrin-Releasing Peptide (ProGRP) u nemocných s malobuněčným karcinomem plic
ProGastrin-Releasing Peptide (ProGRP) u nemocných s malobuněčným karcinomem plic FONS Symposium klinické biochemie Pardubice, 23.9. 25.9.202 M. Tomíšková, J. Skřičková, I. Klabenešová, M. Dastych 2 Klinika
VíceMonitoring složek ŽP - instrumentální analytické metody
Monitoring složek ŽP - instrumentální analytické metody Seznámení se základními principy sledování pohybu polutantů v životním prostředí. Přehled používaných analytických metod. Způsoby monitoringu kvality
VíceSkrytá tvář laboratorních metod? J. Havlasová, Interimun s.r.o.
Skrytá tvář laboratorních metod? J. Havlasová, Interimun s.r.o. Vlastnosti charakterizující laboratorní metodu: 1. z hlediska analytického přesnost/ správnost ( nejistota měření ) analytická citlivost
Vícelaboratorní technologie
Evaluace imunoanalytického systému Olympus AU3000i Firma OLYMPUS uvedla na trh imunoanalytický systém AU3000i. Přístroj pracuje na principu heterogenní imunoanalýzy s technologií paramagnetických mikročástic
VícePodrobný seznam vyšetření - hematologie
Obsah - HEMATOLOGIE 201 Agregace trombocytů ADP... 2 202 Agregace trombocytů Epinefrin... 2 203 Agregace trombocytů Kolagen... 2 204 Antitrombin III... 3 205 Aktivovaný parciální tromboplastinový čas...
VíceVK obecně o akreditaci, důležité kapitoly normy ISO 15189 MV obecně o validaci a verifikaci Marcela Vlková ÚKIA, FN u sv.
Program: Veronika Kanderová CLIP Cytometrie, 2. LF UK a FN Motol, Praha VK obecně o akreditaci, důležité kapitoly normy ISO 15189 MV obecně o validaci a verifikaci Marcela Vlková ÚKIA, FN u sv. Anny, Brno
VíceVeronika Janů Šárka Kopelentová Petr Kučera. Oddělení alergologie a klinické imunologie FNKV Praha
Veronika Janů Šárka Kopelentová Petr Kučera Oddělení alergologie a klinické imunologie FNKV Praha interakce antigenu s protilátkou probíhá pouze v místech epitopů Jeden antigen může na svém povrchu nést
VíceJak analyzovat monoklonální gamapatie
Jak analyzovat monoklonální gamapatie -od stanovení diagnózy až po detekci léčebné odpovědi Říhová Lucie a kol. OKH, FN Brno BMG při ÚPF, LF MU Monoklonální gamapatie(mg) heterogenní skupina onemocnění
VíceProtilátky proti Helicobacter pylori (IgG) Návod na použití ELISA testu
Protilátky proti Helicobacter pylori (IgG) Návod na použití ELISA testu Objednací číslo Určení Ig-třída Substrát Formát EI 2080-9601 G Helicobacter pylori IgG Ag-potažené mikrotitrační jamky 96 x 01 (96)
VíceZÁSADY SPRÁVNÉ LABORATORNÍ PRAXE VYBRANÁ USTANOVENÍ PRAKTICKÉ APLIKACE
ZÁSADY SPRÁVNÉ LABORATORNÍ PRAXE VYBRANÁ USTANOVENÍ PRAKTICKÉ APLIKACE Zabezpečování jakosti v laboratorní praxi je významnou součástí práce každé laboratoře. Problematiku jakosti řeší řada předpisů, z
VíceProtokol o testování systému glukometr měřící proužky Glukometr Contour PLUS
Protokol o zkoušce č.j. 1/2014, počet stran 12, strana číslo 1 Referenční laboratoř pro klinickou biochemii při Ústavu lékařské biochemie a laboratorní diagnostiky VFN Karlovo nám. 32, 121 11 Praha 2,
VíceCHORUS CARDIOLIPIN-G
CHORUS CARDIOLIPIN-G 86046 (36 testů) Výrobce: DIESSE Diagnostica Senese Via delle Rose 10 53035 Monteriggioni (Siena) Itálie OBSAH 1 Úvod... 3 2 Princip testu... 3 3 Složení soupravy... 3 4 Další potřebné
VíceElecsys SCC první zkušenosti z rutinní praxe. Ing. Pavla Eliášová Oddělení klinické biochemie Masarykova nemocnice v Ústí nad Labem
Elecsys SCC první zkušenosti z rutinní praxe Ing. Pavla Eliášová Oddělení klinické biochemie Masarykova nemocnice v Ústí nad Labem Antigen SCC Glykoprotein s molekulovou hmotností 42 kd dva základní typy
VíceSrovnání hematologického analyzátoru Heska Element HT5 a veterinárního hematologického analyzátoru IDEXX ProCyte DX v klinickém prostředí
Srovnání hematologického analyzátoru Heska Element HT5 a veterinárního hematologického analyzátoru IDEXX ProCyte DX v klinickém prostředí Úvod Hematologický analyzátor od společnosti Heska a veterinární
VíceCA15-3 IRMA Souprava CA15-3 IRMA umožňuje přímé in-vitro kvantitativní stanovení s tumorem asociovaného antigenu CA15-3 v lidském séru
Informace o výrobku Informace o ostatních produktech jsou dostupné na www.demeditec.com Návod k použití CA15-3 IRMA Souprava CA15-3 IRMA umožňuje přímé in-vitro kvantitativní stanovení s tumorem asociovaného
VíceProtokol o zkoušce č.j. 2/2013, počet stran 12, strana číslo 1. Zkušební laboratoř č akreditovaná ČIA podle ČSN EN ISO/IEC 17025
Protokol o zkoušce č.j. 2/2013, počet stran 12, strana číslo 1 Referenční laboratoř pro klinickou biochemii při Ústavu lékařské biochemie a laboratorní diagnostiky VFN Karlovo nám. 32, 121 11 Praha 2,
VíceKalibrace analytických metod
Kalibrace analytických metod Petr Breinek BC_Kalibrace_2010 Měřící zařízení (zjednodušeně přístroje) pro měření fyzikálních veličin musí být výrobci kalibrovaná Objem: pipety Teplota (+37 C definovaná
VíceKortizol, ACTH. Olga Bálková Roche s.r.o., Diagnostics Division
Kortizol, ACTH Olga Bálková Roche s.r.o., Diagnostics Division ACTH: biochemie a fyziologie Hormon peptidové povahy, 39 AMK Produkován předním lalokem hypofýzy Cirkadiánní rytmus nejvyšší koncentrace v
VíceValidace sérologických testů výrobcem. Vidia spol. s r.o. Ing. František Konečný IV/2012
Validace sérologických testů výrobcem Vidia spol. s r.o. Ing. František Konečný IV/2012 Legislativa Zákon č. 123/2000 Sb. o zdravotnických prostředcích ve znění pozdějších předpisů Nařízení vlády č. 453/2004
VíceMgr. Zuzana Kufová , Mikulov. Genomické analýzy u Waldenströmovy makroglobulinémie
Mgr. Zuzana Kufová 10.4.2015, Mikulov Genomické analýzy u Waldenströmovy makroglobulinémie Obsah přednášky Genomický profil u WM Mutace v genu MYD88 Mutace v genu CXCR4 Diagnostika Výsledky http://socratic.org/questions/how-do-functional-groups-affect-the-structure-and-function-of-macromolecules
VíceIntracelulární detekce Foxp3
Intracelulární detekce Foxp3 Ústav imunologie 2.LFUK a FN Motol Daniela Rožková, Jan Laštovička T regulační lymfocyty (Treg) Jsou definovány funkčně svou schopností potlačovat aktivaci a proliferaci CD4+
VíceMarcela Vlková Jana Nechvátalová. FN u sv. Anny v Brně LF MU Brno
Marcela Vlková Jana Nechvátalová FN u sv. Anny v Brně LF MU Brno Leukocytární subpopulace CD45 CD45 Lymfocytární subpopulace Fenotypizace základní subpopulace T a B lymfocytů a NK buněk subpopulace základních
VíceSpeciální koagulační vyšetření II
Speciální koagulační vyšetření II Přirozené inhibitory Antitrombin Systém PC/PS (ProC Global) Protein C Protein S APC-rezistence Antitrombin Vyšetření funkční aktivity fotometricky (IIa, Xa) Vyšetření
VíceČeská Myelomová Skupina na poli mnohočetného myelomu
Česká Myelomová Skupina na poli mnohočetného myelomu Vladimír Maisnar IV. interní hematologická klinika LF UK a FN Hradec Králové Lázně Bělohrad, 10. září 2016 Epidemiologická data: MM 1% všech malignit,
VíceBeličková 1, J Veselá 1, E Stará 1, Z Zemanová 2, A Jonášová 2, J Čermák 1
Beličková 1, J Veselá 1, E Stará 1, Z Zemanová 2, A Jonášová 2, J Čermák 1 1 Ústav hematologie a krevní transfuze, Praha 2 Všeobecná fakultní nemocnice, Praha MDS Myelodysplastický syndrom (MDS) je heterogenní
VíceIMUNOTERAPIE NÁDORŮ MOČOVÉHO MĚCHÝŘE. Michaela Matoušková
IMUNOTERAPIE NÁDORŮ MOČOVÉHO MĚCHÝŘE Michaela Matoušková IMUNOTERAPIE ZN Z UROTELU lokalizovaná onemocnění - BCG VAKCÍNA pokročilá onemocnění BCG VAKCÍNA po instilaci vazba BCG k fibronektinu produkovanému
VíceRocheáda v rozhodování aneb testování HPV ve screeningu cervikálního karcinomu 2013
Rocheáda v rozhodování aneb testování HPV ve screeningu cervikálního karcinomu 2013 Igor Blanárik, Olga Bálková, Roche s.r.o., Diagnostics Division Konference AACL, Praha, 22. března 2013 Detekce HPV a
VíceKrevní buňky budeme měřit spektrálně
Publikováno z 2. lékařská fakulta Univerzity Karlovy (https://www.lf2.cuni.cz) LF2 > Krevní buňky budeme měřit spektrálně Krevní buňky budeme měřit spektrálně Hyperspektrální cytometr, který na pohled
VíceSeznam laboratorních vyšetření Hematologicko-transfúzního oddělení
Slezská nemocnice v Opavě, p.o. Olomoucká 86, 746 01 Opava Tel: 553 766 111 IČO : 47813750 leukocyty M,Ž 0 1D erytrocyty M,Ž 1D-3D Seznam laboratorních vyšetření Hematologicko-transfúzního oddělení (příloha
VíceSpecifická imunita. Ond!ej Beran. Laborato! AIDS a bun"#né imunologie III. klinika infek#ních a tropick$ch nemocí 1. FK UK a FN Na Bulovce
Specifická imunita Ond!ej Beran Laborato! AIDS a bun"#né imunologie III. klinika infek#ních a tropick$ch nemocí 1. FK UK a FN Na Bulovce 3. Motolsk$ minikurz cytometrie, 29.- 30.10.2007 Metody vy!et!ování
VíceChyby spektrometrických metod
Chyby spektrometrických metod Náhodné Soustavné Hrubé Správnost výsledku Přesnost výsledku Reprodukovatelnost Opakovatelnost Charakteristiky stanovení 1. Citlivost metody - směrnice kalibrační křivky 2.
VícePrůtoková cytometrie Flow Cytometry
Průtoková cytometrie Flow Cytometry PRŮTOKOVÁ CYTOMETRIE (fluorescenční metoda) Měření fyzikálně-chemických vlastností buněk během jejich průchodu laserovým paprskem Nejčastěji imunofenotypizace krevních
VíceČasná diagnostika zhoubných nádorů prostaty u rizikových skupin mužů. R. Zachoval, M. Babjuk ČUS ČLS JEP
Časná diagnostika zhoubných nádorů prostaty u rizikových skupin mužů R. Zachoval, M. Babjuk ČUS ČLS JEP Základní předpoklady úspěšného screeningu Cíl screeningu: Snížení mortality Zachování QoL vyjádřené
VíceValidace a verifikace v průtokové cytometrii
Validace a verifikace v průtokové cytometrii RNDr. Veronika Kanderová, Ph.D. CLIP, Klinika dětské hematologie a onkologie 2. LF UK a FN Motol veronika.kanderova@lfmotol.cuni.cz Disclaimer Přednáška zazněla
Více