Informace pro objednání 04399803 190 HDL Cholesterol plus 3rd generation 200 testů Systémové ID 07 6833 2 12172623 122 Calibrator f.a.s. Lipids (3 x 1 ml) Kód 424 12172623 160 Calibrator f.a.s. Lipids (3 x 1 ml, pro USA) Kód 424 10781827 122 Precinorm L (4 x 3 ml) Kód 304 11778552 122 Precipath HDL/LDL C (4 x 3 ml) Kód 319 05117003 190 PreciControl ClinChem Multi 1 (20 x 5 ml) Kód 391 05947626 190 PreciControl ClinChem Multi 1 (4 x 5 ml) Kód 391 05947626 160 PreciControl ClinChem Multi 1 (4 5 ml, pro USA) Kód 391 05117216 190 PreciControl ClinChem Multi 2 (20 x 5 ml) Kód 392 05947774 190 PreciControl ClinChem Multi 2 (4 x 5 ml) Kód 392 05947774 160 PreciControl ClinChem Multi 2 (4 5 ml, pro USA) Kód 392 04489357 190 Diluent NaCl 9 % (50 ml) Systémové ID 07 6869 3 Analyzátory, na kterých lze cobas c pack(y) použít Roche/Hitachi cobas c 311, cobas c 501/502 Česky Systémové informace Pro analyzátory cobas c 311/501: : ACN 435 Pro analyzátor cobas c 502: : ACN 8435 Použití In vitro test pro kvantitativní měření koncentrace HDL cholesterolu v lidském séru a plazmě na systémech Roche/Hitachi cobas c. Souhrn Vysokodenzitní lipoproteiny (HDL) jsou zodpovědné za zpětný transport cholesterolu z periferních buněk do jater. Zde je cholesterol přeměněn na žlučové kyseliny a vyloučen do střeva prostřednictvím žlučového traktu. Monitorování HDL cholesterolu v séru je významné z klinického hlediska, protože mezi koncentrací HDL cholesterolu a rizikem aterosklerotického onemocnění je vztah inverzní korelace. Zvýšená koncentrace HDL cholesterolu má ochranné účinky proti koronárním onemocněním, zatímco snížené koncentrace HDL cholesterolu, především spolu s vyššími triglyceridy, zvyšují riziko kardiovaskulárního onemocnění. 1 Objevily se strategie na zvýšení hladiny HDL cholesterolu pro léčbu kardiovaskulárních onemocnění. 2,3 Pro HDL cholesterolu jsou dostupné různé metody, včetně ultracentrifugace, elektroforézy, HPLC, metod na bázi precipitace a přímých metod. Z nich se běžně používají přímé metody. Navrženo bylo několik způsobů pro přímé měření HDL cholesterolu v séru, včetně použití magnetických částic v kombinaci s polyanionty a kovy a použití polyetylenglykolu (PEG) s protilátkami proti apoproteinu B a proti apoproteinu CIII. Tato automatizovaná metoda pro přímé měření HDL cholesterolu v séru a plazmě používá PEG modifikovaný enzym a dextran sulfát. Jestliže jsou enzymy cholesterolesteráza a cholesteroloxidáza modifikovány PEG, vykazují selektivní katalytickou aktivitu vůči lipoproteinovým frakcím, přičemž afinita narůstá v pořadí: LDL < VLDL chylomikrony < HDL. 4,5,6,7,8, 9,10,11,12,13,14,15,16 Výsledky vzorků bez lačnění jsou trochu nižší než při lačnění. Porovnatelné výsledky bez lačnění byly zkoumány beta kvantifikační metodou. 17,18 Stanovení Roche direct HDL cholesterol splňuje cíle National Institutes of Health (NIH) / National Cholesterol Education Program (NCEP) z roku 1998 pro přijatelné provedení. 19 Výsledky získané touto metodou korelují s těmi, které byly naměřené precipitační a také ultracentrifugační metodou. Princip testu 4,5 Homogenní enzymatický kolorimetrický test. V přítomnosti iontů hořčíku vytváří dextran sulfát voděrozpustné komplexy s LDL, VLDL a chylomikrony, které jsou rezistentní vůči PEG modifikovaným enzymům. Koncentrace cholesterolu v HDL cholesterolu se měří enzymaticky cholesterolesterázou a cholesteroloxidázou s PEG navázaným na aminoskupiny (přibl. 40 %) Estery cholesterolu jsou kvantitativně štěpeny cholesterol esterázou na volný cholesterol a estery. HDL ester cholesterolu + H 2 O PEG cholesterolesteráza V přítomnosti kyslíku je cholesterol oxidován cholesteroloxidázou na Δ 4 cholestenon a peroxid vodíku. PEG cholesteroloxidáza HDL cholesterol + RCOOH HDL cholesterol + Δ 4 cholestenon + O 2 H 2 O 2 V přítomnosti peroxidázy reaguje vytvořený peroxid vodíku s 4 aminoantipyrinem a HSDA za tvorby nachově modrého zbarvení. Jeho intenzita je přímo úměrná koncentraci cholesterolu a je stanovena fotometricky. 2 H 2 O 2 + 4 amino antipyrin + HSDA* + H + + H 2 O peroxidáza *HSDA = Sodium N (2 hydroxy 3 sulfopropyl) 3,5 dimethoxyanilin Reagencie - pracovní roztoky R1 R2 nachově modré barvivo + 5 H 2 O HEPES pufr: 10.07 mmol/l; CHES 96.95 mmol/l, ph 7.4; dextran sulfát: 1.5 g/l; hexahydrát dusičnanu hořečnatého: > 11.7 mmol/l; HSDA: 0.96 mmol/l; ascorbátoxidáza (Eupenicillium spec., rekombinantní): > 50 µkat/l; peroxidáza (křenová): > 16.7 µkat/l; konzervans HEPES pufr: 10.07 mmol/l, ph 7.0; PEG cholesterolesteráza (Pseudomonas spec.): > 3.33 µkat/l; PEG cholesteroloxidáza (Streptomyces spec., rekombinantní): > 127 µkat/l; peroxidáza (křenová): > 333 μkat/l; 4 amino antipyrin: 2.46 mmol/l; konzervans R1 je v pozici B a R2 je v pozici C. Bezpečnostní opatření a varování Pro diagnostické použití in vitro. Dodržujte běžná bezpečnostní opatření nutná pro nakládání se všemi reagenciemi. Likvidace všech odpadních materiálů musí probíhat v souladu s místními předpisy. Bezpečnostní listy jsou pro odborné uživatele dostupné na vyžádání. 1 / 5
Pro USA: Pouze na předpis. Zacházení s reagenciemi Připravena k použití Vlastní růžové zabarvení reagencie nemá vliv na test. Uskladnění a stabilita Doba skladování při 2 8 C: V analyzátoru při použití a v chlazeném prostoru analyzátoru: Diluent NaCl 9% Doba skladování při 2 8 C: V analyzátoru při použití a v chlazeném prostoru analyzátoru: Čtěte datum exspirace na štítku cobas c packu. 12 týdnů Čtěte datum exspirace na štítku cobas c packu. 12 týdnů Odběr vzorků a příprava Pro odběr a přípravu vzorků používejte pouze vhodné zkumavky nebo odběrové nádobky. Pouze níže uvedené vzorky byly testovány a jsou přijatelné. Sérum. Plazma: Li heparin a K 2 EDTA plazma EDTA plazma způsobuje snížení výsledků. 20 (Viz poznámka v části směrnice NCEP.) Použít lze vzorky po lačnění i bez něj. 18 Odběr krve pomocí vakuové zkumavky nebo stříkačky. Je žádoucí, aby byl vzorek analyzován v den odběru. Uvedené druhy vzorků byly testované s vybranými typy odběrových zkumavek, které byly komerčně dostupné v té době, tzn., že do testu nebyly zařazené všechny typy zkumavek všech výrobců. Systémy odběru vzorků různých výrobců mohou obsahovat různé materiály, které mohou mít v některých případech zásadní vliv na výsledky. Při zpracování vzorků v primárních zkumavkách (systémy odběru vzorků) dodržujte pokyny jejich výrobce. Vzorky obsahující precipitáty centrifugujte před provedením. Stabilita: 21 7 dní při 2 8 C Je hlášeno, že EDTA stabilizuje lipoproteiny. 22 30 dní při (-60) (-80) C Dodávaný materiál Reagencie jsou uvedeny v části "Reagencie - pracovní roztoky". Potřebný materiál (ale nedodávaný se soupravou) Viz část "Informace pro objednání" Celkové vybavení laboratoře Stanovení Optimálního využití dosáhnete, budete-li dodržovat pokyny uvedené v dokumentaci pro příslušný analyzátor. Pokyny ke specifické pro analyzátor vyhledejte v příslušném návodu k použití. Provádění aplikací, které nejsou schváleny Roche, je bez záruky a musí být definováno uživatelem. Aplikace pro sérum a plazmu Definice testu cobas c 311 10 / 6 33 Množství vzorku Ředění vzorku Zvýšené 2.5 µl Definice testu cobas c 501 10 / 10 47 Množství vzorku Ředění vzorku Zvýšené 2.5 µl Definice testu cobas c 502 10 / 10 47 Množství vzorku Ředění vzorku Zvýšené 5.0 µl Kalibrace Kalibrátory Mód kalibrace Frekvence kalibrace S1: H 2 O S2: C.f.a.s. Lipids Linear 2bodová kalibrace po změně šarže reagencií jestliže to vyžaduje proces kontroly kvality 2 / 5
Návaznost: Tato metoda byla standardizována podle CDC referenční metody (stanovená srovnávací metoda). 19 Standardizace splňuje požadavky HDL Cholesterol Method Evaluation Protocol for Manufacturers od US National Reference System for Cholesterol, CRMLN (Cholesterol Reference Method Laboratory Network), listopad 1994. 21 Kontrola kvality Ke kontrole kvality použijte kontrolní materiály uvedené v části "Informace pro objednání". Navíc lze použít i jiný vhodný kontrolní materiál. Kontrolní intervaly a meze by měly být uzpůsobeny pro každou laboratoř dle individuálních požadavků. Naměřené hodnoty by se měly pohybovat v definovaných mezích. Každá laboratoř by měla mít vypracovaná nápravná opatření pro případ, že hodnoty překročí definované meze. Materiály kontroly kvality slouží pouze k monitorování preciznosti a správnosti. Laboratory Standardization Panel (LSP) National Cholesterol Education Program v USA doporučuje 2 hladiny kontrol, jednu v normálním rozmezí (0.9 1.7 mmol/l nebo 35 65 mg/dl) a druhou v oblasti rozhodovací koncentrace (< 0.9 mmol/l nebo < 35 mg/dl). Sledujte příslušná vládní nařízení a lokální směrnice kontroly kvality. Výpočet Systémy Roche/Hitachi cobas c automaticky vypočítají koncentraci analytu každého vzorku. Převodní faktory: mmol/l x 38.66 = mg/dl mmol/l x 0.3866 = g/l mg/dl x 0.0259 = mmol/l Omezení - interference 23 Kritérium: Výtěžnost v rámci ± 10 % počáteční hodnoty při koncentraci cholesterolu 1 mmol/l (38.7 mg/dl). Ikterus: 24 Bez významných interferencí do hodnoty I indexu 30 pro konjugovaný bilirubin a 60 pro nekonjugovaný (přibližná koncentrace konjugovaného bilirubinu: 513 µmol/l nebo 30 mg/dl a přibližná koncentrace nekonjugovaného bilirubinu: 1026 µmol/l nebo 60 mg/dl). Hemolýza: 24 Bez významných interferencí do hodnoty H indexu 1200 (přibližná koncentrace hemoglobinu: 745 µmol/l nebo 1200 mg/dl). Lipémie (Intralipid): 24 Bez významných interferencí do hodnoty L indexu 1800. Bez významných interferencí nativních triglyceridů do 13.7 mmol/l nebo 1200 mg/dl. Mezi L indexem (odpovídá zákalu) a koncentrací triglyceridů je slabá korelace. Ostatní: Zvýšená koncentrace volných mastných kyselin a denaturovaných proteinů může způsobit falešně zvýšené výsledky HDL cholesterolu. Ve vzácných případech mohou zvýšené koncentrace imunoglobulinů vést k uměle zvýšeným výsledkům HDL cholesterolu. Kyselina askorbová až do 2.84 mmol/l (50 mg/dl) neinterferuje. Abnormální funkce jater ovlivňují metabolismus lipidů, proto mají výsledky HDL a LDL omezenou diagnostickou hodnotu. U některých pacientů s abnormální funkcí jater se může výsledek HDL-cholesterolu významně lišit od výásledku DCM (designated comparison method). Léčiva: Při terapeutických koncentracích nebyla při použití běžných panelů léků zjištěná žádná interference. 25,26 Intoxikace acetaminofenem se často léčí N acetylcysteinem. N acetylcystein při terapeutických koncentracích, pokud se používá jako antidotum, a metabolit acetaminofenu N acetyl p benzochinonimin (NAPQI), mohou nezávisle způsobit falešně nízké výsledky. Venepunkce by se měla provést před podáním metamizolu. Venepunkce bezprostředně po nebo během podání metamizolu může vést k falešně nízkým výsledkům. Ve vzácných případech může gamapatie, především u typu IgM (Waldenströmova makroglobulinémie), způsobit nespolehlivé výsledky. 27 Pro diagnostické účely je vždy nezbytné používat výsledky ve spojení s anamnestickými údaji pacienta, klinickým vyšetřením a jinými nálezy. POTŘEBNÝ KROK Programování speciálního mytí: Při zpracovávání určitých kombinací testů na systémech Roche/Hitachi cobas c je použití speciálních mycích cyklů povinné. Nejnovější verzi seznamu zamezení přenosu mezi vzorky (carry over) lze rovněž nalézt v metodických listech NaOHD-SMS- SmpCln1+2-SCCS. Pro další pokyny čtěte uživatelskou příručku. Analyzátor cobas c 502: Veškeré programování speciálního mytí nezbytné pro zamezení carry over je dostupné přes cobas link, ruční zadávání není potřebné. Tam, kde se to vyžaduje, musí být před vykazováním výsledků provedeno programování speciálního mytí/zamezení přenosu mezi vzorky (carry over). Limity a rozmezí Měřící rozsah 0.08 3.12 mmol/l (3 121 mg/dl) Vzorky s vyššími koncentracemi stanovte použitím funkce rerun. Vzorky nařeďte 1:2 pomocí funkce rerun. Výsledky ze vzorků naředěných funkcí rerun jsou automaticky vynásobené faktorem 2. Dolní meze měření Mez detekce 0.08 mmol/l (3 mg/dl) Mez detekce představuje nejnižší měřitelnou hladinu analytu, kterou lze odlišit od nuly. Počítá se jako hodnota ležící 3 standardní odchylky nad nejnižším standardem (standard 1 + 3 SD, opakovatelnost, n = 21). Očekávané hodnoty Bez rizika Slabé riziko Vysoké riziko Ženy 28,29,30 > 1.68 mmol/l 1.15 1.68 mmol/l < 1.15 mmol/l (> 65 mg/dl) (45 65 mg/dl) (< 45 mg/dl) Muži 28,29,30 > 1.45 mmol/l 0.90 1.45 mmol/l < 0.90 mmol/l (> 55 mg/dl) (35 55 mg/dl) (< 35 mg/dl) Směrnice National Cholesterol Education Program (NCEP): 31 < 40 mg/dl: Nízký HDL cholesterol (hlavní rizikový faktor pro CHD) 60 mg/dl: Vysoký HDL cholesterol ("negativní" rizikový faktor pro CHD) HDL cholesterol je ovlivněn značným počtem faktorů, např. kouřením, pohybem, hormony, pohlavím a věkem. Každá laboratoř by si měla prověřit převoditelnost očekávaných hodnot na svou populaci pacientů, a je-li to nutné, stanovit si vlastní referenční rozmezí. Směrnice National Cholesterol Education Program (NCEP) na základě sérových hodnot a při klasifikaci pacienta, by mělo být použito hodnoty v séru nebo jeho ekvivalentu. Proto NCEP doporučuje převodní faktor 1.03 pro převedení hodnot EDTA plazmy na sérové hodnoty. Naše vlastní výzkumy však ukázaly, že pro reagencii by měl být použit faktor 1.06. Aby bylo vyhověno požadavkům NCEP z roku 1998 na bias < 5 %, doporučujeme validovat u každé laboratoře převodní faktor a zadat jej do parametrů testu HDL C. 32 Specifické údaje o využití Údaje o využití, typické pro analyzátory, jsou uvedeny níže. Výsledky získané v různých laboratořích se mohou lišit. Preciznost Preciznost byla stanovena použitím lidských vzorků a kontrol podle interního postupu s opakovatelností (n = 21) a mezilehlou precizností (3 alikvoty na sérii, 1 série denně, 21 dní). Byly získány následující výsledky: Opakovatelnost Průměr SD Precinorm L 1.38 (53.4) 0.01 (0.4) 0.4 Precipath HDL/LDL C 0.89 (34.4) 0.01 (0.4) 1.0 Lidské sérum 1 1.20 (46.4) 0.01 (0.4) 0.6 Lidské sérum 2 2.08 (80.4) 0.01 (0.4) 0.7 Mezilehlá preciznost Průměr SD Precinorm L 1.34 (51.8) 0.01 (0.4) 0.9 Precipath HDL/LDL C 0.34.0 (88) 0.01 (0.4) 1.5 VK % VK % 3 / 5
Lidské sérum 3 1.17 (45.2) 0.01 (0.4) 0.9 Lidské sérum 4 2.03 (78.5) 0.02 (0.8) 0.9 Porovnání metod Hodnoty HDL cholesterolu pro vzorky lidského séra a plazmy, získané na analyzátoru Roche/Hitachi cobas c 501 (y), byly porovnány s hodnotami stanovenými použitím odpovídající reagencie na analyzátoru Roche/Hitachi MODULAR P (x). Počet vzorků (n) = 75 Passing/Bablok 33 y = 1.000x + 0.000 mmol/l Lineární regrese τ = 0.984 r = 0.999 y = 1.001x 0.003 mmol/l Koncentrace vzorků byly v rozmezí 0.32 až 2.95 mmol/l (12.4 až 114 mg/dl). Odkazy 1 Dominiczak M, McNamara J. The system of Cardiovascular prevention. 103.125; Nauk M, Wiebe D, Warnick G.Measurement of High-Density- Lipoprotein Cholesterol.221.244. In: Handbook of Lipoprotein Testing (eds. Rifai,Warnick and Dominiczak), 2nd edition. 2 Linsel-Nitschke P, Tall AR. HDL as a target in the treatment of atherosclerotic cardiovascular disease. Nature Reviews 2005;4:193-205. 3 Ng DS. Treating low HDL - From bench to bedside. Clinical Biochemistry 2004;37:649-659. 4 Sugiuchi H, Uji Y, Okabe H, Irie T, et al. Direct Measurement of High- Density Lipoprotein Cholesterol in Serum with Polyethylene Glycol- Modified Enzymes and Sulfated α-cyclodextrin. Clin Chem 1995 May;41(5):717-723. 5 Matsuzaki Y, Kawaguchi E, Morita Y, et al. Evaluation of Two Kinds of Reagents for Direct Determination of HDL-Cholesterol. J Anal Bio-Sc 1996;9:419-427. 6 Nauck M, März W, Jarausch J, et al. Multicenter evaluation of a homogeneous assay for HDL-cholesterol without sample pretreatment. Clin Chem 1997;43:1622-1629. 7 Zawta B, Klüber J. Brochure Wissenswertes zu Apolipoproteinen. Fragen/Antworten (Boehringer Mannheim 1991). In: Henry JB, ed. Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods. 17th ed. Philadelphia: WB Saunders 1984;251-282. 8 AVP Fettstoffwechselstörungen. Therapieempfehlungen 1, 1st ed. 1996;2-16. 9 Hatch FT, Lees RS. Practical methods for plasma lipoprotein analysis. Adv Lipid Res 1968;6:1-68. 10 Narayan KA, Kummerow FA. Disk electrophoresis of human serum lipoprotein. Nature 1965;205:246-248. 11 Okazaki M, Shiraishi K, Ohno Y, et al. Heterogeneity of human high density lipoproteins on high performance liquid chromatography. J Biochem 1982;92:517-524. 12 Burstein M, Scholnick HR, Morfix R. Rapid method for the isolation of lipoproteins from human serum by precipitation with polyanions. J Lipid Res 1970;11:583-595. 13 Musto J, Lawlor JF. HDL-cholesterol: online separation and analysis utilizing an automated chemistry analyzer [Abstract]. Clin Chem 1993;39:1125. 14 Kakuyama T, Kimura S, Hashiguchi Y. Fully automated determination of HDL-cholesterol from human serum with Hitachi 911 [Abstract]. Clin Chem 1994;40:1104. 15 Harris N, Galpchian V, Rifai N. Three routine methods for measuring high-density lipoprotein cholesterol compared with the Reference method. Clin Chem 1996;42:738-743. 16 Sugiuchi H. History of development and technical details of the homogeneous assay for HDL and LDL cholesterol. The Fats of Life 2005;IX No. 1:4-11. 17 Cohn JS, McNamara JR, Schaefer EJ. Lipoprotein Cholesterol Concentrations in the Plasma of Human Subjects as Measured in the Fed and Fasted States. Clin Chem 1988;34:2456-2459. 18 Pisani T, Gebski CP, Leary ET, et al. Accurate Direct Determination of Low-density Lipoprotein Cholesterol Using an Immunoseparation Reagent and Enzymatic Cholesterol Assay. Arch Pathol Lab Med 1995 Dec;119(12):1127-1135. 19 Kimberly M, Leary E, Cole T, et al. Selection, Validation, Standardization and Performance of a Designated Comparison Method for HDL-Cholesterol for Use in the Cholesterol Reference Method Laboratory Network. Clin Chem 1999;45:1803-1812. 20 Tietz NW. Textbook of Clinical Chemistry, 3rd Edition 1999;842-843. 21 Data on file at Roche Diagnostics. 22 Cooper GR, Myers GL, Smith SJ, et al. Standardization of Lipid, Lipoprotein, and Apolipoprotein Measurements. Clin Chem 1988;34(8B):B95-B105. 23 Kadri N, Douville P, Lachance P. Letter to editor. Clin Chem 2002;48:964. 24 Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical Comparisons of Interferences in Clinical Chemistry Instrumentation. Clin Chem 1986;32:470-475. 25 Breuer J. Report on the Symposium Drug effects in Clinical Chemistry Methods. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1996;34:385-386. 26 Sonntag O, Scholer A. Drug interference in clinical chemistry: recommendation of drugs and their concentrations to be used in drug interference studies. Ann Clin Biochem 2001;38:376-385. 27 Bakker AJ, Mücke M. Gammopathy interference in clinical chemistry assays: mechanisms, detection and prevention. Clin Chem Lab Med 2007;45(9):1240-1243. 28 Thomas L, ed. Labor und Diagnose, 4th ed. Marburg: Die Medizinische Verlagsgesellschaft 1992;208. 29 Assmann G. At what levels of total low- or high-density lipoprotein cholesterol should diet/drug therapy be initiated? European guidelines. Amer J Cardiol 1990;65:11F. 30 Assmann G, Schriewer H, Schmitz G, et al. Quantification of highdensity-lipoprotein cholesterol by precipitation with phosphotungstic acid/mgcl2. Clin Chem 1983;29(12):2026-2030. 31 Third Report of the National Cholesterol Education Program (NCEP) Expert Panel on Detection, Evaluation, and Treatment of High Blood Cholesterol in Adults (Adult Treatment Panel III). NIH Publication No 01-3670; May 2001. 32 National Cholesterol Education Program Recommendations for Measurement of High-Density Lipoprotein Cholesterol: Executive Summary. Clin Chem 1995;41:1427-1433. 33 Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11):783-790. Tečka se v tomto metodickém listu vždy používá jako desetinný oddělovač k označení hranice mezi celými a desetinnými místy desetinného čísla. Oddělení tisíců se nepoužívá. Symboly Roche Diagnostics používá následující symboly a znaky, včetně uvedených v normě ISO 15223 1. GTIN Obsah soupravy Objem po rekonstituci nebo promíchání Globální číslo obchodní položky Doplnění, odstranění nebo změny textu jsou označeny pruhem podél textu. 2016, Roche Diagnostics 4 / 5
Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D-68305 Mannheim www.roche.com Distribuce v USA: Roche Diagnostics, Indianpolis, IN Zákaznická podpora v 1-800-428-2336 5 / 5