DIAQUICK Mononukleóza kazeta z plné krve, séra nebo plazmy REF CONT Z06620CE 30 testů individuálně balených 30 jednorázových pipet 1 lahvička s pufrem (pro 30 testů) 2 kontroly (pozitivní a negativní) Papírový stojánek, příbalový leták Použití DIAQUICK Mononukleóza kazeta (plná krev/sérum/plazma) je imunochromatografické screeningové stanovení určené ke kvalitativní detekci protilátek k Infectious Mononukleosis heterophile ve vzorcích plné krve, séra nebo plazmy. Klinický význam Infekční mononukleóza (IM) je způsobována virem Epstein-Barrové, který patří do skupiny herpesvirů. Symptomy IM jsou horečka, bolest v krku a otok lymfatických žláz. Ve vzácných případech se mohou objevit problémy se srdcem a centrální nervovou soustavou. Diagnostika IM je založena na zjištění přítomnosti heterofylních protilátek z IgM třídy. Jsou přítomny u 80-90% případů akutní mononukleózy a mohou být detekovány u 60-70 % pacientů během prvního týdne klinického onemocnění. DIAQUICK Mononukleóza kazeta (plná krev/sérum/plazma) je jednoduchý test využívající extrakt z hovězích erytrocytů ke kvalitativní a selektivní detekci protilátek k Infectious Mononukleosis heterophile ve vzorcích plné krve, séra nebo plazmy během pár minut. Princip DIAQUICK Mononukleóza kazeta (plná krev/sérum/plazma) je kvalitativní membránový strip ke kvalitativní a selektivní detekci protilátek k Infectious Mononukleosis heterophile ve vzorcích plné krve, séra nebo plazmy během pár minut. Antigen extrahovaný z hovězích erytrocytů je v tomto testu imobilizován v pruhu v testovací zóně kazety. Vzorek reaguje s dalšími antigeny na polštářku v zóně pro vzorek, dojde k vytvoření komplexu s barvou značeným antigenem. Jak tekutina prochází membránou, je tento komplex zachycen 1/8
protilátkou fixovanou na membráně. Objeví se červený proužek. A tak objevení červeného proužku v testovací zóně indikuje pozitivní výsledek. Dále test obsahuje interní kontrolu provedení, což je červený proužek v kontrolní (C) zóně. Na rozdíl od výsledku testu v testovací (T) zóně je proužek v kontrolní zóně nezávislý na přítomnosti protilátek k IM. Vznik kontrolního proužku prokazuje, že byl test proveden správně a tekutina vzlíná dobře. Kontrolní proužek se musí ukázat v každém platném testu. Upozornění Pouze pro jednorázové, odborné in vitro diagnostické použití Nejezte, nepijte a nekuřte v prostorách, kde manipulujete se vzorky a testem Nepoužívejte test, pokud je obal poškozen Nepoužívejte soupravu po uplynutí doby použitelnosti Nemíchejte zkumavky s ředícím roztokem z různých šarží Neotevírejte ochranný obal, pokud nejste připraveni zahájit test Neukápněte vzorek do okénka pro výsledky Nedotýkejte se okénka pro výsledky rukou, mohlo by dojít ke kontaminaci Abyste zabránili křížové kontaminaci, používejte pro každý vzorek stolice novou nádobu a novou zkumavku s ředícím roztokem. Každý pacient může být přenašečem nemoci. Přijměte vhodná opatření proti mikrobiologickému riziku během testování a dodržujte standardní postupy při manipulaci se vzorky Lidská séra použitá pro přípravu pozitivní a negativní kontroly byla testována ELISA soupravami na přítomnost protilátek k HIV 1 a 2, HBsAg a HCV s negativním výsledkem. Přesto je nutno s kontrolami zacházet jako s materiálem potencionálně infekční. Nepoužívejte větší než předepsané množství tekutiny Před započetím testu vytemperujte vše potřebné na laboratorní teplotu (15 30 o C) Při práci používejte ochranný oděv jako jsou plášť, ochranné rukavice a ochranné brýle. Ředící pufr obsahuje azid sodný, který může reagovat s olovem nebo mědí za vzniku potencionálně explozivních kovových azidů. Jestliže vyléváte pufr do umyvadla, spláchněte ho dostatečným množstvím vody, abyste zabránili vzniku dalších azidů. Soupravu skladujte a převážejte při teplotách 2-30 o C. Teplota a vlhkost mohou nepříznivě ovlivnit výsledek stanovení Pacienti musí striktně dodržovat pokyny pro odběr vzorku Skladování Test skladujte v zataveném originálním obalu při laboratorní teplotě nebo v lednici (2-30 o C). Kazeta je stabilní po celou dobu použitelnosti uvedenou na obale. Kazetu zanechte v zataveném obale až do doby použití. Nezmrazujte. Nepoužívejte po uplynutí doby exspirace. 2/8
Dodávaný materiál individuálně balené testovací kazety jednorázová kapátka Pozitivní kontrola (ředěná lidská plazma obsahující IN heterophile protilátky, 0,09% azidu sodného) Negativní kontrola (ředěná lidská plazma, 0,09% azidu sodného) pufr příbalová informace papírový stojan Další vybavení nutné k provedení testu Zkumavky na vzorek pro odběr krve ze žíly Lancenty, balonek a heparizované kapiláry (v případě odběru krve z prstu) centrifuga (v případě testování plazmy) stopky Odběr, příprava a skladování vzorku Test je určen pro vzorky plné krve, séra nebo plazmy. Plná krev žilní odběr Použijte antikoagulant EDTA, oxalát nebo citrát sodný Plná krev odběr z prstu Pacient musí mít ruce omyté vodou a mýdlem, vysušené Místo odběru přetřete tamponem namočeným v alkoholu Masírujte ruku tak, abyste se nedotkli místa odběru Propíchněte kůži sterilní lancetou, první kapku krve osušte Vymáčkněte další krev Naberte krev do kapiláry -ponořte kapiláru do kapky krve, dokud nenaberete cca 50 µl, pozor na vzduchové bubliny -na horní konec kapiláry umístěte balonek a jeho stisknutím přeneste vzorek do příslušné jamky na kazetě Abyste zabránili hemolýze, separujte sérum nebo plazmu co nejdříve po odběru. Pro testování použijte pouze čisté nehemolyzované vzorky. Test by měl být proveden bezprostředně po odběru vzorku. Neponechávejte vzorek při laboratorní teplotě příliš dlouhou dobu. Vzorky séra nebo plazmy se mohou skladovat až 3 dny při teplotě 2-8 o C, pro déletrvající skladování je nutná teplota -20 o C. Nezmrazujte vzorky plné krve. Plnou krev z prstu se musí testovat bezprostředně po odběru. Před provedením testu přeneste vzorky do laboratorní teploty. Zmrazené vzorky musí mít kompletně rozmražené. Opětovně nezmrazujte. Pokud vzorky k testování dopravujete, zabalte je v souladu s platnými předpisy. 3/8
Provedení testu Uzavřenou testovací kazetu, vzorek a ředící pufr před testováním vytemperujte na laboratorní teplotu (15-30 o C). Před vytemperováním neotvírejte obal kazety, došlo by k vysrážení vlhkosti na testovací membráně 1. Když jste připraveni k testování, vyjměte kazetu z obalu a označte ji identifikačními údaji pacienta, 2. položte na čistý rovný povrch Vzorky séra nebo plazmy Kapátko držte svisle a přeneste 1 kapku séra nebo plazmy (cca 25 µl) do příslušné jamky kazety (S), poté přidejte 1 kapku pufru (cca 55 µl) a zapněte stopky. Plná krev ze žíly Kapátko držte svisle a přeneste 2 kapky krve (cca 50µl) do příslušné jamky kazety (S), poté přidejte 1 kapku pufru (cca 55 µl) a zapněte stopky. Plná krev odběr z prstu Kapiláru držte svisle a přeneste obsah kapiláry (cca 50µl) do příslušné jamky kazety (S), poté přidejte 1 kapku pufru (cca 55 µl) a zapněte stopky. 3. Počkejte na vytvoření barevné čárky (čárek). Odečtěte po 5 minutách. Výsledek neodečítejte po více než 10 minutách. Silně pozitivní výsledek se může objevit dříve. Interpretace výsledků Výsledek testu se intepretuje na základě vizuální kontroly vytvoření barevných proužků v okénku výsledku testu. Pozitivní výsledek V okénku pro výsledek testu se objeví dva červené proužky. Jeden v kontrolní zóně, druhý zřetelný v testovací zóně. Intenzita těchto proužků může být různá. Intenzita zbarvení proužku 4/8
v testovací zóně je závislá na koncentraci protilátek k IM heterophile ve vzorku. Proto je i stín červeného zbarvení pokládán za pozitivní výsledek. Negativní výsledek V okénku pro výsledek testu se objeví pouze jeden červený proužek a to v kontrolní zóně. V testovací zóně se neobjeví žádný proužek. Tento výsledek ukazuje na nepřítomnost protilátek ve vzorku. Neplatný výsledek Jestliže se v kontrolní zóně neobjeví žádný proužek, je test nutné prohlásit za neplatný. Nepřítomnost proužku v kontrolní zóně indikuje chybu v provedení testu nebo že použité části testu jsou špatné. Opakujte test s novou testovací kazetou a dodržujte striktně pracovní postup. Jestliže problém přetrvává, kontaktujte distributora. Kontrola kvality Kontrola kvality/interní kontrola provedení Interní kontrola je součástí testu. Správné provedení testu je indikováno vznikem červeného proužku v kontrolní zóně (C-zóna) membrány. Doporučuje zařadit do standardních procesů kvality tuto kontrolu. Provádět kontrolu s pozitivní a negativní kontrolou pro každou použitou soupravu a každým laborantem, který se na testování podílí. Postup kontroly kvality: 1. Držte lahvičku vertikálně a kápněte 1 kapku (cca 40µl) pozitiví nebo negativní kontroly do jamky pro vzorek (s) a přidejte kapku pufru (cca 55 µl). 2. Postupujte podle bodu 3. návodu. 3. Pokud kontroly neposkytnou očekávané výsledky, výsledky testů nepoužívejte. Opakujte test nebo kontaktujte distributora. Omezení Test je určen pouze pro in-vitro diagnostické použití. Test je možné použít k detekci protilátek k IM v plné krvi, séru nebo plazmě. Jde o test kvalitativní, nelze jím určit koncentraci nebo pokles koncentrace protilátek ve vzorku. Tak jako u všech ostatních diagnostických testů, nemůže být ani u tohoto konečná diagnóza stanovena pouze na základě výsledků tohoto testu, ale musí být potvrzena dalšími laboratorními testy a z celkového stavu pacienta. Pokud je výsledek testu negativní, ale symptomy přetrvávají, doporučujeme použít jinou testovací metodu. Očekávané hodnoty Po infikaci virem Epstein-Barrové dojde v 35-50 % k propuknutí infekční mononukleózy. Inkubační doba je 10-60 dní, u dětí a adolescentů nejčastěji 7-14 dní. 5/8
Analytické parametry stanovení Reprodukovatelnost Intra-assay Testováním 10 nezávislých opakování tří vzorků, jednoho negativního, jednoho lehce pozitivního a jednoho silně pozitivního byla zjištěna reprodukovatelnost >99%. Inter assay Testováním tří opakování tří vzorků, jednoho negativního, jednoho lehce pozitivního a jednoho silně pozitivního byla zjištěna reprodukovatelnost >99%. Cross-reaktivita Byla testována séra pozitivní na RF, HBeAg, HBsAg, HBeAb, HCV, TB. HIV a Syphilis. Nebyla prokázána cross-reaktivita. Literatura Bezpečnostní listy jsou k dispozici na vyžádání. 6/8
7/8
DIALAB spol. s r.o. Nám. Osvoboditelů 1, 153 80 Praha 5 Tel./Fax:257 910 255 257 910 260 257 910 263 e-mail: office@dialab.cz IČO: 14889200 8/8