, V 7 Česky 1 / 6 Analyzátory Elecsys a cobas e

Transkript

1 V7 Troponin T hs STAT testů Vyznačuje analyzátory, na kterých může být souprava použita Elecsys 2010 cobas e 411 cobas e 601 cobas e 602 Česky Použití Imunostanovení pro in vitro kvantitativní stanovení srdečního troponinu T v lidském séru a plazmě. Toto stanovení může být použitp při diferenciální diagnostice akutního koronárního syndromu pro zjištění nekrózy, např. akutní infarkt myokardu. Test je dále určen pro stratifikaci rizika pacientů s akutním koronárním syndromem a pro odhad srdečního rizika u pacientů s chronickým selháním ledvin. Test může prospět při výběru intenzivnější léčby a zásahu u pacientů se zvýšenými hodnotami srdečního troponinu T. Elektrochemiluminiscenční imunostanovení ECLIA je určeno pro použití na imunochemických analyzátorech Elecsys a cobas e. Souhrn Troponin T (TnT) je složka kontraktilního aparátu příčně pruhovaného svalstva. Ačkoliv funkce TnT je stejná ve všech příčně pruhovaných svalech, stanovovaný TnT pochází výlučně z myokardu (kardiální TnT, molekulární hmotnost 39.7 kd) a je zřetelně odlišný od TnT z kosterního svalstva. Vzhledem k vysoké tkáňové specifičnosti je srdeční troponin T (ctnt) kardiospecifický a je vysoce citlivým markerem pro poškození srdce. 1 Koncentrace srdečního troponinu T se zvyšuje cca 3-4 hodiny po infarktu myokardu (AIM) a může přetrvávat až 2 týdny po něm. 2,3 a rozdíl od infarktu myokardu s elevací úseku ST na křivce EKG (STEMI) závisí diagnóza infarktu myokardu bez elevace )seku ST (STEMI) zejména od výsledku srdečního troponinu. Podle nové Univerzální definice akutního infarktu myokardu je AIM diagnostikován, jestliže jsou hladiny srdečního troponinu v krvi nad 99. percentilem referenčního limitu (zdravé populace) za přítomnosti příznaků akutní ischemie (symptomy, změny EKG nebo výsledky zobrazovacích metod). Definice vyžaduje stanovení troponinu s nepřesností (variační koeficient) u 99. percentilu menší nebo rovnou Srdeční troponin T (ctnt) je nezávislým prognostickým markerem, který může předpovídat krátko-, středně- a dokonce i dlouhodobou perspektivu pacientů s akutním koronárním syndromem (ACS). 5,6,7,8,9 Čtyři multicentrické studie zahrnující více než 7000 pacientů ukázaly, že troponin T je rovněž přínosný při výběru pacientů, u kterých bude úspěšná antitrombotická terapie (GPIIb/IIIa inhibitory, nízkomolekulární heparin). 10,11,12,13,14 Srdeční troponin je rovněž upřednostňovaným markerem poškození srdce v nových směrnicích pro diagnózu a léčbu akutního koronárního syndromu bez elevace úseku ST na křivce EKG. 15,16 ízké koncentrace troponinu T mohou být detekovány u klinicky stabilních pacientů, jako jsou pacienti s ischemickým nebo neischemickým srdečním selháním, 17,18,19,20 pacienti s různými formami kardiomyopatie, 21 se selháním ledvin, 22,23,24,25,26,27,28 sepsí 29 a diabetem. 30 Zvýšené hladiny troponinu T korelují se závažností onemocnění koronárních tepen a špatným klinickým výsledkem nezávisle na koncentracích natriuretických peptidů (BP nebo T-proBP). 17,18,31,32 ízké koncentrace troponinu T jsou nezávislým prediktorem kardiovaskulárních potíží včetně výskytu a opětovného výskytu fibrilace síní. 33 Poškození buňky srdečního svalu, které vede ke zvýšeným koncentracím ctnt v krvi se může vyskytnout i v jiných klinických případech, jako jsou myokarditida, 34 kontuze srdce, 35 plicní embolie 36 a kardiotoxicita vyvolaná léky. 37 Jiné diagnostické testy, jako jsou myoglobin, CK-MB, T-proBP, PlGF a CRP, mohou doplnit diagnostickou a prognostickou informaci troponinu T v jiných indikacích. 31,38,39 Stanovení Elecsys Troponin T hs STAT používá 2 monoklonální protilátky specificky směrované proti lidskému srdečnímu troponinu T. 40,41 Protilátky rozpoznávají 2 epitopy (aminokyseliny na pozicích a ), umístěné v centrální části proteinu srdečního troponinu T, který se skládá z 288 aminokyselin. Kalibrátory Elecsys Troponin T hs STAT (Troponin T hs STAT CalSet) obsahují rekombinantní lidský srdeční troponin T (rek. hctnt). Rek. hctnt je izolován z buněčné kultury E. coli BL21, obsahující pet vektor s genem lidského srdečního troponinu T izoformy 3. Po fermentaci jsou buňky rozbity ultrazvukem a rekomb. hctnt je vyčištěn chromatografií na iontoměničích. Vyčištěný rekomb. hctnt je charakterizován SDS PAGE, Western blottingem, imunologickou aktivitou a proteinovým obsahem. 42 Princip testu Sendvičový princip. Celková doba stanovení: 9 minut. Analyzátory Elecsys 2010 a cobas e 411: 1. inkubace: 50 µl vzorku, biotinylovaná monoklonální protilátka proti srdečnímu troponinu T a monoklonální protilátka proti troponinu T, značená rutheniovým komplexem a, reagují za tvorby sendvičového komplexu. 2. inkubace: Po přidání mikročástic, potažených streptavidinem, se komplex váže na pevnou fázi prostřednictvím interakce mezi biotinem a streptavidinem. Analyzátory cobas e 601 a cobas e 602: Během 9minutové inkubace reagují antigen ve vzorku (50 µl), biotinylovaná monoklonální anti-kardiální protilátka proti troponinu T, monoklonální anti-kardiální protilátka proti troponinu T značená rutheniovým komplexem a mikročástice potažené streptavidinem a vytvářejí sendvičový komplex, který je navázán na pevnou fázi. Všechny analyzátory: Reakční směs je nasáta do měřící cely, kde jsou mikročástice zachyceny magnetickým polem na povrchu elektrody. enavázané složky jsou odstraněny roztokem ProCell. Přivedené napětí na elektrodě vyvolá chemiluminiscenční emisi fotonů, která je změřena fotonásobičem. Výsledky jsou vyhodnoceny z kalibrační křivky, která je specifická pro přístroj a je vytvářena na základě 2bodové kalibrace a master křivky (5bodová kalibrace), dodávané v čárovém kódu reagencie. a) Tris(2,2 -bipyridyl)ruthenium(ii)-komplex (Ru(bpy) 2+ 3 ) Reagencie - pracovní roztoky M Mikročástice potažené streptavidinem (průhledné víčko), 1 nádobka, 6.5 ml: Streptavidinem potažené mikročástice, 0.72 mg/ml; konzervans. R1 Anti-troponin T-Ab~biotin (šedé víčko), 1 nádobka, 8 ml: Biotinylovaná monoklonální anti-kardiální protilátka proti troponinu T (myší) 2.5 mg/l; fosfátový pufr 100 mmol/l, ph 6.0; konzervans, inhibitory. R2 Anti-troponin T-Ab~Ru(bpy) 2+ 3 (černé víčko), 1 nádobka, 8 ml: Monoklonální anti-kardiální protilátka proti troponinu T (myší) značená rutheniovým komplexem 2.5 mg/l; fosfátový pufr 100 mmol/l, ph 6.0; konzervans. Bezpečnostní opatření a varování Pro diagnostické použití in vitro. Dodržujte běžná bezpečnostní opatření, nutná pro nakládání se všemi reagenciemi. Likvidace všech odpadních materiálů musí probíhat v souladu s místními předpisy. Bezpečnostní listy jsou pro odborné uživatele dostupné na vyžádání. U všech reagencií a druhů vzorků (vzorky, kalibrátory a kontroly) zabraňte vytvoření pěny. Zacházení s reagenciemi Reagencie v soupravě jsou sestaveny tak, že tvoří komplet připravený k použití a nemohou být odděleny. Všechny informace, potřebné pro správnou činnost, jsou načteny z příslušného čárového kódu reagencie. Uskladnění a stabilita Skladujte při 2 8 C. Reagenční soupravu Elecsys Troponin T hs STAT skladujte ve vzpřímené poloze, aby byla zabezpečena dostupnost všech mikročástic při automatickém míchání před použitím. Stabilita: neotevřené při 2 8 C po otevření při 2 8 C v analyzátorech do uvedeného data exspirace 12 týdnů 4 týdny , V 7 Česky 1 / 6 Analyzátory Elecsys a cobas e

2 Troponin T hs STAT Odběr vzorků a příprava Pouze níže uvedené vzorky byly testovány a jsou přijatelné: Sérum odebrané standardní odběrovou soupravou nebo se separačním gelem. K 2 -EDTA, K 3 -EDTA, Li-heparin a a-heparin plazma. Plazma (EDTA, heparin) a vzorky séra by neměly být používány navzájem. Kritérium: Sklon korelační koeficient Stabilní 24 hodin při 2-8 C, 12 měsíců při -20 C. Zamrazit jen jednou. Uvedené druhy vzorků byly testovány s vybranými typy odběrových zkumavek, které byly komerčně dostupné v té době, tzn. že do testu nebyly zařazeny všechny typy zkumavek všech výrobců. Systémy odběru vzorků různých výrobců mohou obsahovat různé materiály, které mohou mít v některých případech vliv na výsledky. Při zpracování vzorků v primárních zkumavkách (systémy odběru vzorků) dodržujte pokyny jejich výrobce. Vzorky, obsahující precipitáty, centrifugujte před provedením testu. epoužívejte vzorky a kontroly stabilizované azidem. Před měřením zajistěte, aby vzorky, kalibrátory a kontroly měly pokojovou teplotu (20-25 C). Vzhledem k možnému odparu roztoků, kalibrátorů a kontrol v analyzátoru, zajistěte jejich analýzu/stanovení do 2 hodin. Dodávaný materiál Reagencie jsou uvedeny v části "Reagencie - pracovní roztoky". Potřebný materiál (ale nedodávaný se soupravou) , Troponin T hs STAT CalSet, pro 4 x 1 ml , PreciControl Troponin, pro 2 x 2 ml každého z PreciControl Troponin 1 a , Diluent MultiAssay, 2 x 16 ml diluentu vzorků Celkové vybavení laboratoře Analyzátory Elecsys 2010 nebo cobas e Příslušenství pro analyzátory Elecsys 2010 a cobas e 411: , ProCell, 6 x 380 ml systémový pufr , CleanCell, 6 x 380 ml čistící roztok pro měřící celu , Elecsys SysWash, 1 x 500 ml promývací přísada , Adapter for SysClean , Elecsys 2010 Assay Cup, 60 x 60 reakčních nádobek , Elecsys 2010 Assay Tip, 30 x 120 pipetovacích špiček , Elecsys SysClean, 5 x 100 ml systémový čistící roztok Příslušenství pro analyzátory cobas e 601 a cobas e 602: , ProCell M, 2 x 2 L systémový pufr , CleanCell M, 2 x 2 L čistící roztok pro měřící celu , PC/CC-Cups, 12 kalíšků pro předehřátí ProCell M a CleanCell M před užitím , ProbeWash M, 12 x 70 ml čistícího roztoku pro finalizaci a mytí během změny reagencií , PreClean M, 5 x 600 ml systémový čistící roztok , AssayCups/AssayTips Combimagazine M, 48 palet x 84 reak. nádobek nebo pipet. špiček, odpadní vaky , WasteLiner, odpadní vaky , SysClean Adapter M Příslušenství pro všechny analyzátory: , Elecsys SysClean, 5 x 100 ml systémový čistící roztok Stanovení Optimálního využití stanovení dosáhnete, budete-li dodržovat pokyny, uvedené v dokumentaci pro analyzátory. Instrukce, specifické pro jednotlivé analyzátory, vyhledejte v uživatelské příručce. Promíchání mikročástic před použitím a načtení parametry specifické pro test z čárového kódu reagencie proběhne automaticky. Žádné ruční zadání není nutné. Ve výjimečných případech, kdy čárový kód nemůže být načten, zadejte 15místnou sekvenci čísel. Analyzátory cobas e 601 a cobas e 602: Je vyžadován roztok PreClean M. Vytemperujte chlazené reagencie na přibližně 20 C a umístěte je do reagenčního kotouče (20 C) analyzátoru. Zabraňte tvorbě pěny. Systém automaticky reguluje teplotu reagencií a otvírá/zavírá nádobky. Kalibrace ávaznost: Stanovení Troponin T hs STAT ( ) bylo standardizováno dle stanovení Troponin T STAT ( , 4. gen.). To bylo zas původně standardizováno podle metody Enzymun-Test Troponin T (CARDIAC T). Každá reagenční souprava Elecsys Troponin T hs STAT je opatřena štítkem s čárovým kódem, obsahujícím specifické informace potřebné pro kalibraci dané reagenční šarže. Předdefinovaná master křivka je uzpůsobena pro analyzátor pomocí Troponin T hs STAT CalSet. Frekvence kalibrace: Kalibrace musí být provedena jednou pro celou šarži reagencií novými reagenciemi (tj. ne více než 24 hodin od registrace reagenční soupravy v analyzátoru). Obnovení kalibrace je doporučeno: po 1 měsíci (28 dní) při používání stejné šarže reagencií po 7 dnech (při používání stejné reagenční soupravy v analyzátoru) dle potřeby: např. výsledky kontroly kvality jsou mimo definované rozmezí Kontrola kvality Pro kontrolu kvality používejte PreciControl Troponin. avíc lze použít i jiný vhodný kontrolní materiál. Kontroly pro rozdílné koncentrační rozmezí by měly být jednotlivě stanoveny nejméně jednou za 24 hodin při používání testu, alespoň 1x na soupravu reagencií a po každé kalibraci. Kontrolní intervaly a meze by měly být uzpůsobeny pro každou laboratoř dle individuálních požadavků. aměřené hodnoty by se měly pohybovat v definovaných mezích. Každá laboratoř by měla mít vypracovaný postup pro případ, že hodnoty kontrol překročí definované meze. Sledujte příslušná vládní nařízení a lokální směrnice kontroly kvality. Výpočet Analyzátor automaticky vypočítá koncentraci analytu pro každý vzorek. buď v pg/ml, ng/l, ng/ml, μg/l (MODULAR AALYTICS E170, cobas e 601 a cobas e 602) nebo v pg/ml, ng/ml, μg/l (Elecsys 2010 a cobas e 411). Omezení - interference Stanovení není ovlivněno ikterem (bilirubin <428 µmol/l nebo <25 mg/dl), hemolýzou (Hb <0.062 mmol/l nebo <0.1 g/dl, vzorky vykazující viditelné znaky hemolýzy mohou způsobit interferenci), lipémií (Intralipid <1500 mg/dl) a biotinem (<82 nmol/l nebo <20 ng/ml). Kritérium: Výtěžnost v rozmezí ±20 počátečních hodnot při koncentraci troponinu T <100 ng/l nebo pg/ml (±10 při koncentraci troponinu T 100 ng/l nebo pg/ml). Při použití vzorků s koncentrací hemoglobinu >0.1 g/dl jsou získané výsledky falešně nižší. Vzorky by neměly být odebrány pacientům podstupujícím léčbu s vysokými dávkami biotinu (tj. >5 mg/den) po dobu nejméně 8 hodin od podání poslední dávky biotinu. Interference nebyla zaznamenána s revmatoidními faktory do koncentrace 1500 IU/mL. Efekt nadbytku antigenu (hook efekt) nebyl zaznamenán pro troponin T do ng/l (pg/ml). In vitro testy byly prováděny na 52 běžně užívaných lécích. ebyla zjištěna žádná interference. Ve vzácných případech je možné pozorovat interferenci způsobenou velmi vysokým titrem protilátek proti analyt-specifickým protilátkám, streptavidinu nebo rutheniu. Tyto účinky jsou minimalizovány vhodným navržením testu. Pro diagnostické účely je vždy nezbytné používat výsledky ve spojení s anamnestickými údaji pacienta, klinickým vyšetřením a jinými nálezy. Limity a rozmezí Rozsah měření ng/l nebo pg/ml (definováno limitem blanku a maximem master křivky). Hodnoty pod limitem blanku jsou vykazovány jako <3 ng/l (pg/ml). Hodnoty nad rozsahem měření jsou vykazovány jako >10000 ng/l nebo pg/ml (nebo do ng/l nebo pg/ml při 10násobném ředění vzorku). Analyzátory Elecsys a cobas e 2 / , V 7 Česky

3 V7 Troponin T hs STAT Spodní limity měření Limit blanku (LoB), Detekční limit (LoD) a Limit kvantifikace (LoQ) Limit blanku = 3 ng/l (pg/ml) Detekční limit = 5 ng/l (pg/ml) Limit kvantifikace = 13 ng/l (pg/ml) Limit blanku i detekční limit byly stanoveny v souladu s požadavky CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) EP17-A. Limit kvantifikace byl stanoven použitím výsledku testování funkční senzitivity. Limit blanku je hodnotou 95. percentilu z n 60 měření vzorku bez analytu v průběhu několika nezávislých sérií. Limit blanku odpovídá koncentraci, pod kterou jsou vzorky bez analytu zjištěny s pravděpodobností 95. Detekční limit je stanoven na základě limitu blanku a standardní odchylky vzorků s nízkou koncentrací. Detekční limit odpovídá nejnižší koncentraci analytu, která může být detekována (hodnota nad limit blanku) s pravděpodobností 95. Limit kvantifikace (funkční senzitivita) je nejnižší koncentrace analytu, která může být opakovatelně měřena s mezilehlou precizností VK 10. (10 nezávislých sérií, 1 série/den). Stanovení bylo provedeno se vzorky troponinu T s nízkými koncentracemi. Ředění Vzorky s koncentrací srdečního troponinu T nad rozsahem měření mohou být naředěny s Diluent MultiAssay. Doporučený poměr ředění je 1:10 (buď automaticky analyzátorem Elecsys 2010 a cobas e nebo ručně). Koncentrace ředěného vzorku musí být >1000 ng/l (pg/ml). Po ručním naředění výsledek vynásobte faktorem ředění. Po naředění analyzátorem software Elecsys 2010 a cobas e automaticky počítá s ředěním při výpočtu koncentrace vzorku. Očekávané hodnoty Ve studiích prováděných stanovením Elecsys Troponin T hs zahrnujících 533 zdravých dobrovolníků byl horní referenční limit (99. percentil) pro troponin T 14 ng/l (pg/ml), spolehlivosti ng/l (pg/ml). ejnižší koncentrace s VK menším nebo rovnajícím se 10 (LoQ) se stanovením Elecsys Troponin T hs STAT byla 13 ng/l (pg/ml). a základě kritéria WHO pro definici AIM 43 ze 70. let je hodnota cut-off (klinický diskriminátor) pro troponin T 0.1 µg/l (ng/ml) nebo 100 ng/l (pg/ml) podle zjištění ROC analýzy výsledků získaných s předcházející generací testu stanovení Elecsys Troponin T. 44,45. Definice WHO pro AMI byla nedávno poupravena a bere v potaz definici ESC/ACC/AHA/WHF, která doporučuje detekci nárůstu a/nebo poklesu srdečního troponinu v klinických podmínkách myokardiální ischemie použitím 99. percentilu hodnoty cut-off troponinu. 46 Vzhledem ke kinetice uvolňování srdečního troponinu T nevylučuje původní výsledek testu < 99. perc. v rámci prvních hodin po nástupu symptomů spolehlivě infarkt myokardu. Trvá-li podezření na infarkt myokardu, zopakujte test v odpovídajících intervalech (6-12 hodin po původním testování). 16,47 Je důležité získat důkladnou anamnézu a precizní popis symptomů. Je potřebná lékařská prohlídka se zřetelem na možnou přítomnost srdeční kontuze, akutního a chronického srdečního selhání, aortální disekce, onemocnění aortální chlopně, hypertrofické kardiomyopatie, tachy- nebo bradyarytmie, apikální balonové dysfunkce, rhabdomyolýzy s poškozením srdce, plicní embolie, těžké plicní hypertenze, akutního neurologického onemocnění, infiltrativních onemocnění, drogové toxicity, respiračního selhání, sepse, popálenin. 16 Elektrokardiogram je zaznamenán, aby umožnil odlišit pacienty s podezřením na ACS (elevacce úseku ST nebo změny úseku ST, ale bez trvalé elevace úseku ST nebo normální EKG). Laboratorní měření by mělo zahrnovat markery poškození myokardu, nejlépe srdečního troponinu. Rostou-li koncentrace troponinu nebo srdečních enzymů, dojde k nezvratnému poškození buněk a na tyto pacienty je potřeba nahlížet jako po infarktu myokardu v souladu s konsenzuální definicí z Univerzální definice AIM. A nakonec by mělo být provedeno druhé měření srdečního troponinu po 6 až 12 hodinách. 16,47 Faktory spojené se zvýšenými hodnotami 48,49,50,51,52,53,54 Publikované klinické studie ukázaly zvýšený srdeční troponin T u pacientů s poškozením srdce, jakým je nestabilní angina pectoris, srdeční kontuze a transplantace srdce. Zvýšení bylo zaznamenáno i u pacientů s rhabdomyolýzou a polymyositidou. Každá laboratoř by si měla prověřit převoditelnost očekávaných hodnot na svou populaci pacientů a je-li to nutné, stanovit si vlastní referenční rozmezí. Specifické údaje o využití Údaje o využití, typické pro analyzátory, jsou uvedeny níže. Výsledky, získané v různých laboratořích, se mohou lišit. Preciznost Preciznost byla stanovena použitím reagencií Elecsys, vzorků a kontrol podle protokolu (EP5-A2) CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute): 2 série denně v duplikátech, každý za 21 dní (n = 84). Byly získány následující výsledky: Analyzátory Elecsys 2010 a cobas e 411 Opakovatelnost b Mezilehlá preciznost Vzorek Průměr SD VK SD VK ng/l ng/l ng/l (pg/ml) (pg/ml) (pg/ml) Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum PreciControl T PreciControl T b) Opakovatelnost = preciznost v sérii Analyzátory cobas e 601 a cobas e 602 Opakovatelnost Mezilehlá preciznost Vzorek Průměr SD VK SD VK ng/l ng/l ng/l (pg/ml) (pg/ml) (pg/ml) Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum PreciControl T PreciControl T Porovnání metod Srovnání stanovení Elecsys Troponin T hs STAT (analyzátor Elecsys 2010; y) se stanovením Troponin T STAT, (analyzátor Elecsys 2010; x), použitím klinických vzorků, poskytlo následující korelace (ng/l nebo pg/ml): Počet naměřených vzorků: 155 Passing/Bablok 55 Lineární regrese y = 1.05x + 28 y = 1.0x + 38 τ = r = Koncentrace vzorků byly v rozmezí přibl. 13 až 7000 ng/l (pg/ml). Analytická specifičnost Stanovení Elecsys Troponin T hs STAT nevykazuje významnou zkříženou reakci s následujícími sloučeninami (testováno s koncentracemi TnT přibl. 18 ng/l (pg/ml) a 38 ng/l (pg/ml); koncentrace zkříženě reagujících sloučenin 500 ng/ml): lidský troponin T kosterních svalů 0.003, lidský srdeční troponin I 0.2, lidský troponin kosterních svalů I 0.003, lidský troponin C < Diagnostická senzitivita a specifičnost a studiích s pacienty s bolestí na hrudi přijatých na pohotovost se podílelo 1 klinické centrum v ěmecku, 1 v Indii, 1 ve Švýcarsku a 2 centra v USA. 507 pacientů bylo zahrnuto pro výpočet senzitivity a specifičnosti podle následujících kritérií: Bolest na hrudi po >20 minut, měřeno 12svodovým EKG, věk >20 let, netěhotní, bez předchozího IM v rámci 3 týdnů před přijetím a s minimálně 2 odběry krve. Pacienti byli diagnostikováni na akutní IM aplikací: 1. kritéria WHO 44 včetně změn EKG, symptomů charakteristických pro ACS a zvýšeného srdečního troponinu a , V 7 Česky 3 / 6 Analyzátory Elecsys a cobas e

4 Troponin T hs STAT 2. kritérií definovaných Smíšenou komisí Joint ESC/ACCF/AHA/WHF. 16 a specifičnost vypočítaná u AIM definovaného podle kritéria WHO Optimální cut-off pro zjištění akutního infarktu myokardu troponinem T bylo dříve počítáno analýzou ROC při 0.1 µg/l (ng/ml) nebo 100 ng/l (pg/ml) ve studii s předchozí generací testu stanovení Elecsys Troponin T. 45,47 a specifičnost byly v nejvyšších hodnotách troponinu T vypočítány stanovením Elecsys Troponin T hs při tomto ROC optimalizovaném cut-off při 0.1 µg/l (ng/ml) nebo 100 ng/l (pg/ml). Specifičnost 99 78/ / a specifičnost při 0.1 ng/ml (100 pg/ml) byly dále vypočítány pro stanovení Elecsys Troponin T hs v různých časových intervalech od přijetí v nemocnici: Čas od přijetí (hodiny) Specifičnost / / / / / / / / / / > / / a specifičnost vypočítaná u AIM definovaného dle směrnic ESC/ACCF/AHA/WHF Pacienti s AIM byly definováni obvyklými hodnotami srdečního troponinu nad kritérium 99. perc./10 VK a přítomností bolesti na hrudi nebo změnami EKG: a specifičnost nejvyššího troponinu T, vysoké hodnoty senzitivity byly vypočítány při 99. perc. 14 ng/l (pg/ml). Specifičnost / / a specifičnost stanovení Elecsys Troponin T hs byla vypočítána v různých hladinách troponinu T. Troponin T hs LCI c UCI d Specifičnost LCI UCI pg/ml c) LCI = spodní interval spolehlivosti d) UCI = horní interval spolehlivosti a specifičnost při kritériu 99. perc. (stanovení Elecsys Troponin T hs)/10 VK (stanovení Elecsys Troponin T, 4. gen.; 0.03 ng/ml) byly dále vypočteny v různých časových intervalech od přijetí v nemocnici: Čas od přijetí (hodiny) >12 Generace testu Troponin T Specifičnost 4. gen / / Troponin T hs 93 52/ / gen / / Troponin T hs 98 91/ / gen / / Troponin T hs / / gen / / Troponin T hs 98 48/ / gen / / Troponin T hs 94 17/ / gen / / Troponin T hs / / Odkazy 1. European patent and US patent by Roche Diagnostics GmbH. Specific antibodies to Troponin T, their production and use in a reagent for the determination of myocardial necrosis. 2. Katus HA, Remppis A, Looser S, et al. Enzyme linked immunoassay of cardiac troponin T for the detection of acute myocardial infarction in patients. Mol Cell Cardiol 1989;21(7): Katus HA, Scheffold T, Remppis A, et al. Proteins of the troponin complex. Laboratory Medicine 1992;23(5): Alpert JS, Thygesen K, Jaffe A, et al. The universal definition of myocardial infarction: a consensus document: Ischaemic heart disease. Heart 2008;94; Hamm CW, Ravkilde J, Gerhardt W, et al. The prognostic value of serum troponin T in unstable angina. Engl J Med 1992;327 (3): Ohmann EM, et al. Risk stratification with admission cardiac troponin T levels in acute myocardial ischemia. Engl J Med 1996;335: Christenson RH, Duh SH, ewby LK, et al. Cardiac troponin T and cardiac troponin I: relative values in short-term risk stratification of patients with acute coronary syndromes. Clin Chem 1998;44(3): Lindahl B, Diderholm E, Lagerqvist B, et al. Mechanisms behind the prognostic value of Troponin T in unstable coronary artery disease: a FRISC II substudy. J Am Coll Card 2001;38: Aviles RJ, Askari AT, Lindahl B, et al. Troponin T levels in patients with acute coronary syndromes, with or without renal dysfunction. Engl J Med 2002;346: Lindahl B, Venge P, Wallentin L. Troponin T Identifies Patients With Unstable Coronary Artery Disease Who Benefit From Long-Term Antithrombotic Protection. J Am Coll Cardiol 1997;29(1): Hamm CW, Heeschen C, Goldmann B, et al. Benefit of abciximab in patients with refractory unstable angina in relation to serum troponin T levels. Engl J Med 1999;340 (21): Heeschen C, Hamm CW, Goldmann BU, et al. for PRISM study investigators. Troponin concentrations for stratification of patients with acute coronary syndromes in relation to therapeutic efficacy of tirofiban. Lancet 1999;354: Lindahl B, Diderholm E, Lagerquist B, et al. Effects on mortality of long-term treatment with l.m.w. heparin in relation to troponin T level and ECG findings - a FRISC 2 substudy. Eur Heart J 2000;21(Suppl.): ewby LK, Ohman EM, Christenson RH, et al. Benefit of Glycoprotein IIb/IIa Inhibition in Patients With Acute Coronary Syndromes and Troponin T-Positive Status: The PARAGO-B Troponin T Substudy. Circulation 2001;103: The Task Force for the diagnosis and Treatment of on-st-segment Elevation Acute Coronary Syndromes of the European Society of Cardiology. Guidelines for the diagnosis and treatment of non-st elevation acute coronary syndromes. European Heart Journal 2007;28: Thygesen K. Alpert JS. White HD on behalf of the Joint ESC/ACCF/AHA/WHF Task Force for Redefinition of Myocardial Infarction. JACC 2007;50: Analyzátory Elecsys a cobas e 4 / , V 7 Česky

5 V7 Troponin T hs STAT 17. Latini R, Masson S, Anand IS, et al. Prognostic Value of Very Low Plasma Concentrations of Troponin T in Patients with Stable Chronic Heart Failure. Circulation 2007;116: Omland T, De Lemos JA, Christophi C, et al. on behalf: PEACE investigators. Distribution and determinants of very low levels of cardiac troponin T in patients with stable coronary artery disease: The PEACE trial. Eur Heart J 2008;9(202); Omland T, De Lemos JA, Christophi C, et al. on behalf: PEACE investigators. Very low cardiac troponin T concentrations and cardiovascular events in patients with stable coronary artery disease: The PEACE trial. Eur Heart J 2008;29(202); Allen J, Kleiman S, assif D, et al. Prevalence and prognostic Significance of preprocedural cardiac troponin elevation among patients with stable coronary artery disease undergoing percutaneous coronary intervention. Circulation 2008;118: Sato Y, Kataoka K, Matsumori A, et al. Ito H, Takatsu Y. Measuring serum aminoterminal type III procollagen peptide, 7S domain of type IV collagen, and cardiac troponin T in patients with idiopathic dilated cardiomyopathy and secondary cardiomyopathy. Heart 1997;78: Dierkes J, Domrose U, Westphal S, et al. Cardiac troponin T predicts mortality in patients with renal disease. Circulation 2000;102: Ooi DS, Zimmerman D, Graham J, et al. Cardiac troponin T predicts long-term outcomes in hemodialysis patients. Clin Chem 2001;47: Apple FS, Wu AHB. Myocardial infarction redefined: Role of cardiac troponin Testing. Clin Chem 2001;47: defilippi C, Wasserman S, Rosanio S, et al. Cardiac Troponin T and C-reactive protein for predicting prognosis, coronary atherosclerosis, and cardiomyopathy in patients undergoing long term hemodialysis. JAMA 2003;290: Iliou MC, Fumeron C, Benoit MO, et al. Prognostic value of cardiac Markers in ESRD: Chronic Hemodialysis and ew Cardiac markers Evaluation (CHACE) study. Am J Kidney Dis 2003;42: Scott B, Deman A, Peeters P, et al. Cardiac troponin T and malondialdehyde modified plasma lipids in haemodialysis patients. eprhol Dial Transplant 2003;18: Madsen LH, Ladefoged S, Hildebrandt P, et al. Comparison of four different cardiac troponin assays in patients with end-stage renal disease on chronic haemodialysis. Acute Card Care 2008;10(3) ver Elst KM, Spapen HD, guyen D, et al. Cardiac troponin I and T are biological markers of left ventricular dysfunction in septic shock. Clin Chem 2000;46: Rossing P, Jorsal A, Tarnow L, et al. Plasma hs-troponin T predicts cardiovascular and all cause mortality as well as deterioration in kidney function in type 1 diabetic patients with nephropathy. Abstract EASD European patent application by F. Hoffmann-La Roche AG and Roche Diagnostics GmbH. Cardiac Troponin as an indicator of advanced coronary artery disease. 32. European patent application by F. Hoffmann-La Roche AG and Roche Diagnostics GmbH. Means and methods for the differentiation of acute and chronic myocardial necrosis in symptomatic patients. 33. Masson S, Pirelli S, Pulitano G, et al. Circulating Markers of myocyte injury predict first recurrence of atrial fibrillation. AHA 2008 ovember ew Orleans. 34. Lauer B, iederau C, Kühl U,, et al. Cardiac troponin T in patients with clinically suspected myocarditis. JACC 1997;30: Swaanenburg JCJM, Klaase JM, DeJongste MJL, et al. Troponin I, troponin T, CK-MB-activity and CK-MB mass as markers for the detection of myocardial contusion in patients who experienced blunt trauma. Clin Chim Acta 1998;272: Giannitsis E, Müller-Bardorff M, Kurowski V, et al. Independent prognostic value of cardiac troponin T in patients with confirmed pulmonary embolism. Circulation 2000;102: Herman EH, Lipshultz SE, Rifai, et al. Use of cardiac troponin T levels as an indicator of doxorubicin-induced cardiotoxicity. Cancer Res 1998;58: European patent by F Hoffmann-La Roche AG and Roche Diagnostics GmbH. Diagnosis of myocardial infarction and acute coronary syndrome by combination of markers. 39. European patent application by F. Hoffmann-La Roche AG and Roche Diagnostics GmbH. Means and methods for optimization of diagnostic and therapeutic approaches in chronic artery disease based on the detection of Troponin T and T-pro BP. 40. Davis GK, Labugger R, Van Eyk JE, et al. Cardiac troponin T is not detected in western blots of diseased renal tissue. Clin Chem 2001;47: Ricchiuti V, Voss EM, ey A, et al. Cardiac Troponin T isoforms expressed in renal diseased skeletal muscle will not cause false positive results by the second generation ctnt assay by Boehringer Mannheim; Clin Chem 1998;44(9): Hallermayer K, Klenner D and Vogel R. Use of recombinant human cardiac troponin T for standardization of third generation troponin T methods. Scand J Clin Invest 1999;59(Suppl 230): World Health Organization. Report of the Joint International Society and Federation of Cardiology/World Health Organization Task Force on Standardization of Clinical omenclature. omenclature and criteria for diagnosis of ischemic heart disease. Circulation 1979;59: Müller-Bardorff M, Hallermayer K, Schröder A, et al. Improved troponin T ELISA specific for cardiac troponin T isoform: assay development and analytical and clinical validation. Clin Chem 1997;43(3): Kampmann M, Rauscher T, Müller-Bardorff M, Münch M, Klein G, Katus H. Clinical Evaluation of Troponin T and CK-MB Mass on the Elecsys 2010 Analyzer. Poster presented at Medlab 97, 12th IFCC European Congress of Clinical Chemistry, August 17-22, 1997, Basel, Switzerland. 46. Mendis S, Thygesen K, Kuulasmaa K, et al. World Health Organization definition of myocardial infarction: revision. Int J Epidemiol 2011;40(1): Antmann E, Bassand J-P, Klein W, et al. Myocardial infarction redefined - a consensus document of the Joint European Society of Cardiology/American College of Cardiology committee for the redefinition of myocardial infarction: The Joint European Society of Cardiology/American College of Cardiology Committee. Am Coll Cardiol 2000;36: Kobayashii S, Tanaka M, Tamura, et al.serum cardiac troponin T in polymyositis/dermatomyositis. Lancet 1992;340(8821): Mair J, Dienstl F, Puschendorf B. Cardiac Troponin T in the Diagnosis of Myocardial Injury. Critical Reviews in Clin Lab Sci 1992;29(1): Carrier M, Solymoss BC, Raymond C, et al. Cardiac Troponin T and Creatine Kinase MB Isoenzyme as Biochemical Markers of Ischemia after Heart Preservation and Transplantation. J Heart Lung Transplant 1994;13(4): Löfberg M, Tähtelä R, Härkönen M, et al. Myosin Heavy-Chain Fragments and Cardiac Troponins in the Serum in Rhabdomyolysis. Diagnostic Specificity of ew Biochemical Markers. Arch eurol 1995;52: Anderson JR, Hossein-ia M, Brown P, et al. Donor Cardiac Troponin T Predicts Subsequent Inotrope Requirements Following Cardiac Transplantation. Brief Communications in Transplant 1994;58(9): Franz WM, Remppis A, Kandolf R, et al. Serum Troponin T: Diagnostic Marker for Acute Myocarditis. Letter to the Editor in Clin Chem 1996;42(2): Mair P, Mair J, Koller J, et al. Cardiac troponin T in the diagnosis of heart contusion. Lancet 1991;338: Passing H, Bablok W, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. J Clin Chem Clin Biochem 1988 ov;26(11): Další informace naleznete v odpovídajícím návodu k použití analyzátoru nebo v aplikačním dokumentu, informacích o produktu a v metodickém listu všech potřebných komponent. Tečka se v tomto metodickém listu vždy používá jako desetinný oddělovač k označení hranice mezi celými a desetinnými místy desetinného čísla. Oddělení tisíců se nepoužívá , V 7 Česky 5 / 6 Analyzátory Elecsys a cobas e

6 Troponin T hs STAT Významné doplňky nebo změny jsou označeny pruhem podél textu. Změny testových parametrů čárového kódu reagencií, které už byly načteny, by měly být editovány ručně. 2012, Roche Diagnostics Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D Mannheim Analyzátory Elecsys a cobas e 6 / , V 7 Česky