Cortisol II. Kortizol. MODULAR ANALYTICS E170 cobas e 411 cobas e 602

Transkript

1 Česky Použití Imunostanovení pro in vitro kvantitativní stanovení kortizolu v lidském séru, plazmě a slinách. Stanovení kortizolu se používá k rozeznání a léčbě funkčních poruch nadledvinek. Elektrochemiluminiscenční imunostanovení ECLIA je určeno pro použití na analyzátorech imunostanovení Elecsys a cobas e. Souhrn (hydrokortison) je kvantitativně hlavním hormonem ze skupiny glukokortikoidů z kůry nadledvin. 1 Hlavním důvodem pro měření kortizolu je diagnostika lidských nemocí, které jsou způsobené nadprodukcí kortizolu u Cushingova syndromu (CS), nedostatkem adrenálního vylučování steroidů u Addisonovy choroby, a pro monitorování léčby (např. dexametazonový supresní test u Cushingova syndromu a hormonální substituční léčby u Addisonovy choroby). 1 hraje důležitou roli v regulaci mnoha základních fyziologických procesů, včetně energetického metabolismu, udržování rovnováhy elektrolytů a krevního tlaku, imunomodulace a reakce na stres, buněčné proliferace, jakož i kognitivní funkce. Hlavní frakce kortizolu cirkuluje navázána na plazmatické bílkoviny jako kortikosteroid vážící globulin a albumin. 2 Biologicky aktivní volná frakce obsahuje pouze 2 5 z celkové koncentrace hormonu. 1,2 Zvýšené sérové hladiny lze nalézt v důsledku stresu, psychiatrických onemocnění, obezity, diabetu, alkoholismu a těhotenství, což může způsobit diagnostické problémy u pacientů s Cushingovým syndromem. Nízké hladiny kortizolu ve objevují u pacientů s vzácnými adrenálními enzymovými poruchami a po dlouhotrvajícím stresu. Pro diagnostické účely se používají následující analýzy: Celkový a volný kortizol v séru a půlnočních slinách. 1 Sekrece kortizolu je řízena především hypotalamo-hypofýzo-adrenální osou (HPA). Když jsou hladiny kortizolu v krvi nízké, skupina buněk v oblasti mozku zvané hypotalamus uvolní hormon uvolňující kortikotropin (CRH), který způsobuje, že hypofýza vyloučí další hormon, adrenokortikotropní hormon (ACTH), do krevního řečiště. Nadledvinky detekují vysoké hladiny ACTH a stimulují sekreci kortizolu, což způsobí stoupání hladin kortizolu v krvi. Stoupající hladiny kortizolu začnou blokovat uvolňování CRH z hypotalamu a ACTH z hypofýzy. 2 Za normálních okolností k nejvyšší sekreci kortizolu dochází v druhé polovině noci, s vrcholní produkcí kortizolu v časných ranních hodinách. Poté hladiny kortizolu klesají po celý den, s nejnižšími hladinami během první poloviny noci. 3 K cirkadiánní variaci sekrece kortizolu a vlivu stresu je potřeba přihlédnout při podmínkách odběru v séru, plazmě a slinách. 4 Stanovení Elecsys používá kompetiční princip testu použitím monoklonální protilátky, která je specificky směřována proti kortizolu. Endogenní kortizol, který je uvolněn z vazebných proteinů danazolem, soutěží s exogenním derivátem kortizolu, který je značený rutheniovým komplexem a) o vazebná místa biotinylované protilátky. a) Tris(2,2'-bipyridyl)ruthenium(II)-komplex (Ru(bpy) ) Princip testu Princip kompetice. Celková doba stanovení: 18 minut. 1. inkubace: 10 µl vzorku je inkubováno s biotinylovanou protilátkou specifickou proti derivátu kortizolu, značeného rutheniovým komplexem. V závislosti na koncentraci analytu ve vzorku a tvorbě odpovídajících imunitních komplexů jsou vazebná místa značené protilátky obsazována z části analytem ze vzorku a z části ruthenilovaným haptenem. 2. inkubace: Po přidání mikročástic, potažených streptavidinem, se komplex váže na pevnou fázi prostřednictvím interakce mezi biotinem a streptavidinem. Reakční směs je nasáta do měřící cely, kde jsou mikročástice s navázanými komplexy zachyceny prostřednictvím magnetu. Nenavázané složky jsou odstraněny roztokem ProCell/ProCell M. Přivedené napětí na pracovní elektrodě vyvolá chemiluminiscenční emisi fotonů, která je změřena fotonásobičem. MODULAR ANALYTICS E170 cobas e 411 cobas e 601 cobas e 602 Výsledky jsou zjištěny z kalibrační křivky, která je specificky vytvořena pro přístroj dvoubodovou kalibrací, a master křivky, která se do přístroje načte z čárového kódu reagencie. Reagencie - pracovní roztoky Reagenční rackpack je označen jako CORT II. M R1 R2 Mikročástice potažené streptavidinem (průhledné víčko), 1 nádobka, 6.5 ml: Streptavidinem potažené mikročástice, 0.72 mg/ml; konzervans. Anti-kortizol-Ab~biotin (šedé víčko), 1 nádobka, 10 ml: Biotinylovaná monoklonální protilátka proti kortizolu (ovčí) 20 ng/ml; danazol 20 µg/ml; MES b) pufr 100 mmol/l, ph 6.0; konzervans. -peptid~ru(bpy) (černé víčko), 1 nádobka, 10 ml: Derivát kortizolu (syntetický), značený ruthemiovým komplexem 20 ng/ml; danazol 20 µg/ml; MES pufr 100 mmol/l, ph 6.0; konzervans. b) MES = 2-morfolinethansulfonová kyselina Bezpečnostní opatření a varování Pro diagnostické použití in vitro. Dodržujte běžná bezpečnostní opatření nutná pro nakládání se všemi reagenciemi. Likvidace všech odpadních materiálů musí probíhat v souladu s místními předpisy. Bezpečnostní listy jsou pro odborné uživatele dostupné na vyžádání. U všech reagencií a druhů vzorků (vzorky, kalibrátory a kontroly) zabraňte vytvoření pěny. Zacházení s reagenciemi Reagencie v soupravě jsou sestaveny tak, že tvoří komplet připravený k použití a nemohou být odděleny. Všechny informace, potřebné pro správnou činnost, jsou načteny z příslušného čárového kódu reagencie. Uskladnění a stabilita Skladujte při 2 8 C. Nemrazit. Reagenční soupravu Elecsys skladujte ve vzpřímené poloze, aby byla zajištěna dostupnost všech mikročástic během automatického míchání před použitím. Stabilita: neotevřené při 2 8 C po otevření při 2 8 C v analyzátorech do uvedeného data exspirace 12 týdnů 8 týdnů Odběr vzorků a příprava Testovány byly pouze níže uvedené vzorky. Sérum a plazma: Sérum odebrané standardní odběrovou soupravou nebo pomocí zkumavek se separačním gelem. Li heparinovaná, K 2 EDTA a K 3 EDTA plazma, jakož i zkumavky obsahující separační gel. Kritérium sérum/plazma: Výtěžnost Pod 50, výtěžnost ± 5. Kritérium sliny: Průměrný rozdíl vzorků mezi 5 až 15 je < 3. Upozornění: Z důvodu denního rytmu hladiny kortizolu v séru a plazmě musí být vždy uváděn čas odběru. 1 / 5

2 Stabilní 24 hodin při C, 4 dny při 2 8 C, 12 měsíců při 20 C. Zmrazit jen jednou. Sliny: Sliny odeberte pomocí zařízení Salivette. Nepoužívejte nádobky obsahující kys. citronovou. Vyjměte přiloženou houbičku a jemně ji žvýkejte asi 2 minuty, aby pořádně nasákla slinami. Vložte houbičku nazpět a uzavřete zkumavku. Centrifugujte Salivette 2 minuty při 1000 g a oddělte tak sliny do vnější zkumavky. Pro stanovení Elecsys použijte čistý supernatant. Se vzorky slin zacházejte stejným způsobem jako se vzorky sér nebo plazmy. Upozornění: Pokud nebyly dány žádné pokyny, měly by sliny být odebrány ráno před čištěním zubů. Během dne by se sliny neměly odebírat dřív, než 30 minut po jídle nebo pití. Centrifugovaný vzorek slin je stabilní po dobu 24 hodin při C, 4 dny při 2 8 C, 12 měsíců při 20 C. Zmrazit jen jednou. Uvedené druhy vzorků (sérum a plazma) byly testovány s vybranými typy odběrových zkumavek, které byly komerčně dostupné v té době, tzn., že do testu nebyly zařazeny všechny typy zkumavek všech výrobců. Systémy odběru vzorků různých výrobců mohou obsahovat různé materiály, které mohou mít v některých případech zásadní vliv na výsledky. Při zpracování vzorků v primárních zkumavkách (systémy odběru vzorků) dodržujte pokyny jejich výrobce. Vzorky obsahující precipitáty centrifugujte před provedením stanovení. Nepoužívejte teplem inaktivované vzorky. Nepoužívejte vzorky a kontroly stabilizované azidem. Před měřením zajistěte, aby vzorky, kalibrátory a kontroly měly teplotu C. Vzhledem k možnému odparu roztoků by měly být vzorky, kalibrátory a kontroly v analyzátoru analyzovány/stanoveny do 2 hodin. Dodávaný materiál Reagencie jsou uvedeny v části "Reagencie - pracovní roztoky". Potřebný materiál (ale nedodávaný se soupravou) , CalSet, pro 4 x 1 ml , Universal, pro 4 x 3 ml , Cortisol Saliva, pro 4 x 1 ml , Diluent Universal 2, 2 x 36 ml diluentu vzorků Celkové vybavení laboratoře MODULAR ANALYTICS E170 nebo analyzátor cobas e Dodatečné potřeby pro stanovení kortizolu v slinách: Salivette, zkumavka pro odběr vzorků, Sarstedt, Nümbrecht, Německo, Příslušenství pro analyzátor cobas e 411: , ProCell, 6 x 380 ml systémový pufr , CleanCell, 6 x 380 ml čistící roztok pro měřící celu , Elecsys SysWash, 1 x 500 ml promývací přísada , Adapter for SysClean , Elecsys 2010 Assay Cup, 60 x 60 reakčních nádobek , Elecsys 2010 Assay Tip, 30 x 120 pipetovacích špiček Příslušenství pro MODULAR ANALYTICS E170, analyzátory cobas e 601 a cobas e 602: , ProCell M, 2 x 2 L systémový pufr , CleanCell M, 2 x 2 L čistící roztok pro měřící celu , PC/CC Cups, 12 kalíšků pro předehřátí ProCell M a CleanCell M před užitím , ProbeWash M, 12 x 70 ml čistícího roztoku pro finalizaci a mytí během změny reagencií , AssayTip/AssayCup Combimagazine M, 48 palet x 84 reak. nádobek nebo pipet. špiček, odpadní vaky , WasteLiner, odpadní vaky , SysClean Adapter M Příslušenství pro všechny analyzátory: , ISE Cleaning Solution/Elecsys SysClean, 5 x 100 ml systémový čistící roztok Stanovení Optimálního využití stanovení dosáhnete, budete-li dodržovat pokyny uvedené v dokumentaci pro příslušný analyzátor. Pokyny ke stanovení specifické pro analyzátor vyhledejte v příslušném návodu k použití. Promíchání mikročástic před použitím proběhne automaticky. Načtěte specifické parametry pro test z čárového kódu reagencie. Ve výjimečných případech, kdy čárový kód nemůže být načten, zadejte 15místnou sekvenci čísel. Analyzátory MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 a cobas e 602: Je vyžadován roztok PreClean M. Vytemperujte chlazené reagencie na přibl. 20 C a umístěte je do reagenčního kotouče (20 C) analyzátoru. Zabraňte tvorbě pěny. Systém automaticky reguluje teplotu reagencií a otvírá a zavírá nádobky. Kalibrace Návaznost: Tato metoda byla standardizována dle panelu IRMM (Institut pro referenční materiály a měření)/ifcc 451 (ID GC/MS, plynová chromatografie s hmotnostní spektrometrií a s izotopovým zřeďováním). 5 Každá reagenční souprava Elecsys je opatřena štítkem s čárovým kódem obsahujícím specifické informace pro kalibraci dané šarže reagencií. Předdefinovaná master křivka je uzpůsobena pro analyzátor pomocí příslušného CalSet. Frekvence kalibrace: Kalibrace se musí provádět jednou pro celou šarži reagencií novými reagenciemi (tj. ne více než 24 hodin od registrace reagenční soupravy v analyzátoru). Obnovení kalibrace se doporučuje: po 8 týdnech při používání stejné šarže reagencií po 7 dnech (při používání stejné reagenční soupravy v analyzátoru) dle potřeby: např. výsledky kontroly kvality jsou mimo definované rozmezí Kontrola kvality Pro kontrolu kvality používejte Universal nebo Cortisol Saliva. Navíc lze použít i jiný vhodný kontrolní materiál. Kontroly pro rozdílné koncentrační rozmezí by měly být jednotlivě stanoveny nejméně jednou za 24 hodin při používání testu, alespoň 1x na soupravu reagencií a po každé kalibraci. Kontrolní intervaly a meze by měly být uzpůsobeny pro každou laboratoř dle individuálních požadavků. Naměřené hodnoty by se měly pohybovat v definovaných mezích. Každá laboratoř by měla mít vypracovaná nápravná opatření pro případ, že hodnoty překročí definované meze. Sledujte příslušná vládní nařízení a lokální směrnice kontroly kvality. Cortisol Saliva: Upozornění: Kontroly nejsou označeny čárovým kódem a musí být proto použity jako externí kontroly. Všechny hodnoty a rozmezí musí být zadány ručně. Čtěte, prosím, část "QC" v návodu k obsluze nebo online nápovědu softwaru přístroje. Kontroly neoznačené čárovým kódem: Do analyzátoru může být pro každou kontrolní hladinu zadána pouze jedna cílová hodnota a rozmezí. Cílové hodnoty, specifické pro šarži reagencie, musí být zadány znovu pokaždé, když je použita specifická šarže reagencie s jinými cílovými hodnotami a rozmezím kontrol. Dvě šarže reagencií s různými cílovými hodnotami a rozmezím nelze použít paralelně ve stejné sérii. Přesné cílové hodnoty a rozmezí specifické pro šarži jsou vytištěny na přiloženém (nebo elektronicky dostupném) letáku hodnot v reagenční soupravě nebo soupravě. Ujistěte se, prosím, že jsou použity správné hodnoty. Výpočet Analyzátor automaticky vypočítá koncentraci analytu pro každý vzorek (buď v, µg/dl nebo µg/l). 2 / 5

3 Převodní faktory: x = µg/dl x = µg/l µg/dl x = µg/l x = Omezení - interference Stanovení v séru a plazmě není ovlivněno ikterem (bilirubin 428 μmol/l nebo 25 mg/dl), hemolýzou (Hb mmol/l nebo 0.5 g/dl), lipémií (Intralipid 1500 mg/dl), biotinem ( 123 nebo 30 ng/ml), IgG 50 g/l, IgA 10 g/l a IgM 10 g/l. Kritérium: Výtěžnost v rámci ± 10 počáteční hodnoty pro vzorky > 50 a ± 5 pro vzorky 50. Vzorky by neměly být odebrány pacientům podstupujícím léčbu s vysokými dávkami biotinu (tj. > 5 mg/den) po dobu nejméně 8 hodin od podání poslední dávky biotinu. U revmatoidních faktorů nebyla interference pozorována do koncentrace 600 IU/mL. In vitro testy byly prováděny na 16 běžně užívaných lécích. Nebyla zjištěna žádná interference. Ve vzácných případech je možné pozorovat interferenci způsobenou velmi vysokým titrem protilátek proti test specifickým protilátkám, streptavidinu nebo rutheniu. Tyto účinky jsou minimalizovány vhodným navržením testu. Těhotenství, kontraceptiva a léčba estrogeny způsobují zvýšení koncentrace kortizolu. Ve vzorcích pacientů léčených prednisolonem, 6 α metylprednisolonem nebo prednisonem mohou být zjištěny falešně zvýšené koncentrace kortizolu. Během testu s metyraponem je zvýšená hladina 11 deoxykortizolu. Kvůli křížové reaktivitě mohou být naměřeny falešně zvýšené hodnoty kortizolu (viz část analytická specifičnost). Pacienti trpící deficitem 21 hydroxylázy vykazují zvýšené hladiny 21 deoxykortizolu, což může také vést k falešně zvýšeným výsledkům kortizolu. Při hodnocení nálezu musí být také přihlédnuto k času odběru, jelikož vylučování kortizolu podléhá dennímu rytmu. Těžký stres může vést ke zvýšení hladiny kortizolu. Vzorky slin kontaminované krví musí být vyřazeny. Pro diagnostické účely je vždy nezbytné používat výsledky ve spojení s anamnestickými údaji pacienta, klinickým vyšetřením a jinými nálezy. Limity a rozmezí Měřící rozsah nebo μg/dl (definováno mezí detekce a maximem master křivky). Hodnoty pod mezí detekce jsou vykazovány jako < 1.5 (< μg/dl). Hodnoty nad měřícím rozsahem jsou vykazovány jako > 1750 (> 63.4 µg/dl) (nebo až nebo 634 µg/dl při 10násobném ředění vzorku). Dolní meze měření Mez blanku (LoB), mez detekce (LoD) a mez stanovitelnosti (LoQ) Mez blanku = 1.0 (0.036 µg/dl) Mez detekce = 1.5 (0.054 µg/dl) Mez stanovitelnosti = 3.0 (0.109 µg/dl) s celkovou přípustnou chybou 30 Mez blanku, mez detekce a mez stanovitelnosti byly měřeny v souladu s požadavky CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) EP17 A. Mez blanku je hodnotou 95. percentilu z n 60 měření vzorku bez obsahu analytu v průběhu několika nezávislých sérií. Mez blanku odpovídá koncentraci, pod kterou jsou vzorky bez analytu zjištěny s pravděpodobností 95. Mez detekce se měří na základě meze blanku a standardní odchylky vzorků s nízkou koncentrací. Mez detekce odpovídá nejnižší koncentraci analytu, kterou lze detekovat (hodnota nad mezí blanku s pravděpodobností 95 ). Mez stanovitelnosti je definovaná jako nejnižší množství analytu ve vzorku, které lze přesně kvantifikovat s celkovou přípustnou chybou 30. Ředění Vzorky séra a plazmy s koncentrací kortizolu nad měřícím rozsahem lze naředit použitím Diluent Universal 2. Doporučený poměr ředění je 1:10 (buď automaticky MODULAR ANALYTICS E170 nebo analyzátory cobas e nebo ručně). Koncentrace ředěného vzorku musí být > 150 nebo > 5 µg/dl. Po ručním naředění výsledek vynásobte faktorem ředění. Po naředění analyzátorem software MODULAR ANALYTICS E170 a cobas e automaticky počítá s ředěním při výpočtu koncentrace vzorku. Očekávané hodnoty Ve studiích se stanovením Elecsys byly zjištěné následující hodnoty použitím vzorků od 300 zdravých jedinců ve věku 21 let a starších. Vylučovacími kritérii byly: těhotenství, kojení, užívání antikoncepčních pilulek a léků s kortizonem/kortizolem. Nebyl pozorovaný žádný statisticky významný rozdíl mezi muži a ženami. v séru a plazmě percentil: Ranní hodiny 6 10: ( µg/dl), n = 296 Odpolední hodiny 16 20: ( µg/dl), n = percentil: Ranní hodiny 6 10: ( µg/dl), n = 296 Odpolední hodiny 16 20: ( µg/dl), n = 300 ve slinách Ve studiích se stanovením Elecsys byly zjištěny následující hodnoty použitím vzorků slin od stejných 300 zdravých jedinců (95./97.5 percentil) popsaných výše. Ranní hodiny 6 10: < 20.3 /< 24.1 (< µg/dl/< µg/dl), n = 297 < 1.50, n = 5 Odpolední hodiny 16 20: < 6.94 /< 9.65 (< µg/dl/< µg/dl), n = < 1.50, n = 75 Půlnoc ± 30 minut: < 7.56 /< 11.3 (< µg/dl/< µg/dl), n = < 1.50, n = 184 Každá laboratoř by si měla prověřit převoditelnost očekávaných hodnot na svou populaci pacientů, a je-li to nutné, stanovit si vlastní referenční rozmezí. Specifické údaje o využití Údaje o využití, typické pro analyzátory, jsou uvedeny níže. Výsledky získané v různých laboratořích se mohou lišit. Preciznost Preciznost byla zjištěna použitím reagencií Elecsys, lidského séra a kontrol v protokolu (EP5 A2) CLSI (Institut pro klinické a laboratorní standardy): 2 série denně v duplikátech každý pro 21 dní (n = 84). Byly získány následující výsledky: Lidské sérum (0.112) Lidské sérum (1.30) Lidské sérum (10.3) Lidské sérum (19.9) Lidské sérum (57.7) Universal (11.2) (0.008) (0.026) 7.29 (0.264) 10.4 (0.377) 29.3 (1.06) 4.33 (0.157) (0.014) 1.36 (0.049) 9.39 (0.340) 17.4 (0.631) 42.7 (1.55) 8.35 (0.303) / 5

4 Universal (26.1) 10.4 (0.377) (0.653) Analyzátory MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 a cobas e 602 Lidské sérum (0.131) Lidské sérum (1.36) Lidské sérum (11.6) Lidské sérum (20.0) Lidské sérum (60.2) Universal 1 Universal (11.2) 734 (26.6) (0.007) (0.174) 9.37 (0.340) 26.8 (0.972) 4.91 (0.178) 12.2 (0.442) (0.038) 7.00 (0.254) 12.8 (0.464) 32.4 (1.17) 5.96 (0.216) 15.5 (0.562) Preciznost byla zjištěna použitím reagencií Elecsys, vzorků slin a kontrol v protokolu (EP5 A2) CLSI (Institut pro klinické a laboratorní standardy): 2 série denně v duplikátech každý pro 21 dní (n = 84). Byly získány následující výsledky: Lidské sliny (0.137) Lidské sliny (0.337) Lidské sliny (1.11) Lidské sliny (3.05) Cortisol Saliva 1 Cortisol Saliva (0.329) 28.8 (1.04) (0.008) (0.037) 2.08 (0.075) (0.016) (0.016) (0.024) 1.35 (0.049) 2.99 (0.108) (0.020) 1.46 (0.053) Analyzátory MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 a cobas e 602 Lidské sliny 1 7 (0.093) Lidské sliny (0.330) Lidské sliny (10.1) Lidské sliny (2.82) Cortisol Saliva 1 Cortisol Saliva (0.355) 28.5 (1.03) (0.009) (0.010) (0.025) 1.29 (0.047) (0.014) (0.023) (0.015) (0.072) (0.017) (0.035) Porovnání metod Sérum: A) Porovnání stanovení Elecsys (y) s ID GC/MS (x), použitím panelu IRMM/IFCC 451 poskytlo následující korelace (): Počet naměřených vzorků: 34 Passing/Bablok 6 Lineární regrese y = 1.00x y = 1.02x τ = r = Koncentrace vzorků byly v rozmezí 83.0 až 764 nebo 3.01 až 27.7 µg/dl (ID GC/MS). B) Porovnání stanovení Elecsys (y) se stanovením Elecsys Cortisol (x) poskytlo následující korelace (): Počet naměřených vzorků: 536 Passing/Bablok 6 Lineární regrese y = 0.758x y = 0.786x τ = r = Koncentrace vzorků byly v rozmezí 9.21 až 1680 nebo 0.33 až 60.9 µg/dl Analytická specifičnost Pro stanovení Elecsys byla zjištěna následující křížová reaktivita (v ): a) Látka přidána v koncentraci 10 µg/ml: 11-Deoxykortikosteron Deoxykortisol α-hydroxyprogesteron Kortikosteron 2.48 Kortison 6.58 Dexamethason n. d. c) Fludrokortizon Prednison 2.23 Progesteron b) Látka přidána v koncentraci 1 µg/ml: 21-Deoxykortisol / 5

5 c) Látka přidána v koncentraci 0.1 µg/ml Prednisolon α-metylprednisolon 12.0 c) n. d. = nedetekovatelné Odkazy 1 Turpeinen U, Hämäläinen E. Determination of cortisol in serum, saliva and urine. Best Practice & Research Clinical Endocrinology & Metabolism 2013;27(6): Gatti R, Antonelli G, Prearo M, et al. Cortisol assays and diagnostic laboratory procedures in human biological fluids. Clin Biochem 2009;42(12): Tsigos C, Chrousos GP. Hypothalamic pituitary adrenal axis, neuroendocrine factors and stress. Journal of Psychosomatic Research 2002;53: Nieman LK, Biller BMK, Findling JW, et al. The Diagnosis of Cushing's Syndrome: An Endocrine Society Clinical Practice Guideline. J Clin Endocrinol Metab 2008;93(5): Thienpont LM. The characterisation of cortisol concentrations in a reference serum panel: IRMM/IFCC-451. [Geel, Belgium]: Directorate General Joint Research Centre; Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11): Pro více informací čtěte prosím příslušný návod k použití daného analyzátoru, jednotlivé aplikační listy, informace o produktu a metodické listy všech potřebných komponent (jsou-li dostupné ve Vaší zemi). Tečka se v tomto metodickém listu vždy používá jako desetinný oddělovač k označení hranice mezi celými a desetinnými místy desetinného čísla. Oddělení tisíců se nepoužívá. Symboly Roche Diagnostics používá následující symboly a znaky, včetně uvedených v normě ISO GTIN Obsah soupravy Analyzátory/přístroje, na kterých lze reagencie použít Reagencie Kalibrátor Objem po rekonstituci nebo promíchání Globální číslo obchodní položky Doplnění, odstranění nebo změny textu jsou označeny pruhem podél textu. 2015, Roche Diagnostics Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D Mannheim 5 / 5