ALBT2. Specifické proteiny. Zacházení s reagenciemi Připravena k použití Uskladnění a stabilita

Transkript

1 COINV9.0 Tina-quant Albumin 2. generace - aplikace pro moč Informace pro objednání Analyzátory, na kterých lze cobas c pack použít Tina-quant Albumin Gen.2 (100 testů) Systémové ID COBAS INTEGRA 400 plus C.f.a.s. PUC (5 1 ml) Systémové ID Precinorm PUC (4 3 ml) Systémové ID Precipath PUC (4 3 ml) Systémové ID NaCl Diluent 9 (6 22 ml) Systémové ID Česky Systémové informace Test ALBU2, test ID Použití In vitro test pro kvantitativní imunologické měření lidského albuminu v séru, plazmě, moči a mozkomíšním moku. Aplikace pro sérum/plazmu a mozkomíšní mok jsou popsané v metodických listech k Tina quant Albumin Gen.2 Aplikace pro sérum/plazmu a v Tina quant Albumin Gen.2 Aplikace pro CSF. Souhrn 1,2,3,4,5 Albumin, protein bez sacharidů, tvoří celkových plazmatických proteinů. Jeho úkolem je udržování onkotického tlaku, účastní se také na transportu a skladování širokého spektra ligandů, nepolárních sloučenin, léčiv a současně je zdrojem endogenních aminokyselin. Ledviny za normálních podmínek brání pronikání albuminu do moči. Nicméně v malých množstvích se albumin v moči objevuje. Velikost molekuly (69 kda), její záporný náboj a tubulární resorpce mají vliv na chování albuminu při průchodu ledvinami, jeho vylučování močí narůstá při změně kapacity glomerulů a změně selektivity např.při poškození tubulů. Při onemocnění zasahující glomeruly je exkrece albuminu zpravidla větší než při poškození tubulů. Albumin v moči se tak stává důležitým markerem glomerulární dysfunkce. Slabě zvýšené vylučování se nazývá mikroalbuminurie a je důležité při diagnostice diabetické nefropatie, která se vyvíjí u 40 diabetiků závislých na inzulínu. Termín mikroalbuminurie může vést k mylnému výkladu, že indikuje exkreci částic menších albuminu, kdežto ve skutečnosti se jedná o aktuální nízké koncentrace albuminu v moči. Mikroalbuminurie je přesněji definována jako vylučování albuminu vyšší než je normální, ale pod detekčním limitem běžných dipstick testů, tj.mezi 20 až 200 µg/min. Názvy slabá albuminurie a paucialbuminurie jsou synonyma. Princip testu 6,7 Imunoturbidimetrické stanovení Lidský albumin vytváří precipitát se specifickým antisérem, které se měří turbidimetricky při 340 nm. Reagencie - pracovní roztoky R1 SR TRIS a) pufr: 50 mmol/l, ph 8.0; PEG: 4.2 ; EDTA: 2 mmol/l; stabilizátor Polyklonální protilátka proti lidskému albuminu (ovčí), v závislosti na titru; TRIS a) pufr: 100 mmol/l, ph 7.2; konzervans Reagencie pro kontrolu nadbytku antigenu Albumin v ředěném séru (lidské); fosfátový pufr: 50 mmol/l, ph 7.0; konzervans a) TRIS = Tris(hydroxymetyl)-aminometan R1 je v pozici A, je v pozici B a SR je v pozici C. Bezpečnostní opatření a varování Věnujte pozornost všem varováním a bezpečnostním opatřením uvedeným v části 1 / Úvod této Příručky metod. Všechny biologické materiály je nutné považovat za potenciálně infekční. Všechny produkty jsou připravené výhradně z krve dárců, která byla individuálně testovaná a nebyla prokázána přítomnost HBsAg ani protilátek proti HCV a HIV. Testovací metody používají stanovení schválená FDA nebo povolená v souladu s evropskou směrnicí 98/79/ES, Příloha II, Seznam A. Žádné metody stanovení nemohou nicméně zcela vyloučit případné riziko infekce, a proto je nutné s materiálem zacházet opatrně, stejným způsobem, jako se vzorky pacientů. V případě expozice, dodržujte nařízení příslušných zdravotnických úřadů. 8,9 Zacházení s reagenciemi Připravena k použití Uskladnění a stabilita Doba skladování při 2 8 C Na palubě při použití při C Čtěte datum exspirace na štítku balení cobas c pack 12 týdnů Odběr vzorků a příprava Pro odběr a přípravu vzorků používejte pouze vhodné zkumavky nebo odběrové nádobky. Pouze níže uvedené vzorky byly testované a jsou přijatelné. Moč Pro kvalitativní měření albuminu v moči použijte náhodný vzorek moči. Pro kvantitativní analýzu použijte časovaný sběr moči (24hodinový sběr). 10 Používejte jen čerstvou moč bez stabilizátorů. Vzorky obsahující precipitáty centrifugujte před provedením stanovení. Pro podrobnosti o možné interferenci čtěte část Omezení a interference. Stabilita v spontánní, 24hodinové nebo 7 dní při C 2. ranní moči 11 1 měsíc při 2 8 C 6 měsíců při ( 15) ( 25) C Dodávaný materiál Reagencie jsou uvedeny v části "Reagencie - pracovní roztoky". Potřebný materiál (ale nedodávaný se soupravou) NaCl Diluent 9, kat. č , systémové ID pro automatické ředění vzorků a standardní ředění v sérii. NaCl Diluent 9 je umístěn do předdefinované pozice stojánku a je stabilní po dobu 4 týdnů na palubě v analyzátoru COBAS INTEGRA 400 plus. Stanovení Optimálního využití stanovení dosáhnete, budete-li dodržovat pokyny uvedené v dokumentaci pro příslušný analyzátor. Pokyny ke stanovení specifické pro analyzátor vyhledejte v příslušném návodu k použití. Aplikace pro moč Definování testu Způsob měření Způsob výpočtu abs. Způsob reakce Směr reakce Reakci startuje Vlnové délky A/B Absorbance Koncový bod R1-S--SR Nárůst Výpočet první/posl. 33/49 Typický efekt prozóny Kontrola nadbytku antigenu Faktor předředění Faktor následné koncentrace Jednotka 340/659 nm > 600 (> 60 mg/dl nebo > 9.12 µmol/l) Ano (v SR) Ne Ne , V 9.0 Česky 1 / 3 ALBU2

2 COINV9.0 Tina-quant Albumin 2. generace - aplikace pro moč Pipetovací parametry Diluent (H 2 O) R1 100 µl - Vzorek 6 µl 15 µl 20 µl - SR 6 µl 10 µl Celkový objem 157 µl Kalibrace Kalibrátor Poměr ředění kalibrace C.f.a.s. PUC Mód kalibrace Logit/log 4 Opakování kalibrace Kalibrační interval 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32, 1:64 prováděno automaticky přístrojem Doporučuje se duplikát Každou šarži a jestliže to vyžaduje proces kontroly kvality Kalibrační interval lze po přijatelné verifikaci kalibrace laboratoří prodloužit. Zadejte vztažnou hodnotu albuminu neředěného kalibrátoru (), specifickou pro šarži, jež je uvedena v příbalovém letáku C.f.a.s. PUC. Návaznost: Tato metoda byla standardizovaná podle interního postupu s návazností na certifikovaný referenční materiál v lidském séru IRMM (Institut pro referenční materiály a měření) ERM-DA470k/IFCC. Kontrola kvality Kontrola kvality moči Kontrolní interval Pořadí kontrol Kontrola po kalibraci Precinorm PUC Precipath PUC Doporučeno 24 hodin Určeno uživatelem Doporučena Ke kontrole kvality použijte kontrolní materiály uvedené v části "Informace pro objednání". Navíc lze použít i jiný vhodný kontrolní materiál. Kontrolní intervaly a meze by měly být uzpůsobeny pro každou laboratoř dle individuálních požadavků. Naměřené hodnoty by se měly pohybovat v definovaných mezích. Každá laboratoř by měla mít vypracovaná nápravná opatření pro případ, že hodnoty překročí definované meze. Sledujte příslušná vládní nařízení a lokální směrnice kontroly kvality. Výpočet Analyzátor COBAS INTEGRA 400 plus automaticky počítá koncentraci analytu pro každý vzorek. Pro více informací čtěte, prosím, Analýza údajů v Online nápovědě. Převodní faktory: 0.1 = mg/dl = µmol/l Omezení - interference Kritérium: Výtěžnost v rámci ± 10 počáteční hodnoty. Ikterus: Bez významných interferencí do koncentrace konjugovaného bilirubinu 855 µmol/l nebo 50 mg/dl. Hemolýza: Bez významných interferencí do koncentrace hemoglobinu 248 µmol/l nebo 400 mg/dl. Léčiva: Při terapeutických koncentracích nebyla při použití běžných panelů léků zjištěná žádná interference. 12 Bez interferencí je aceton 60 mmol/l, chlorid amonný 0.11 mol/l, vápník 40 mmol/l, kreatinin 0.18 mol/l, γ globulin 500, glukóza 0.19 mol/l, močovina 0.8 mol/l, kyselina močová 5.95 mmol/l a urobilinogen 378 µmol/l. V důsledku reagencie nadbytku antigenu (SR) se do koncentrace albuminu (608 µmol/l) nevyskytne žádný neoznačený hook efekt. Pro diagnostické účely je vždy nezbytné používat výsledky ve spojení s anamnestickými údaji pacienta, klinickým vyšetřením a jinými nálezy. POTŘEBNÝ KROK Programování speciálního mytí: Při zpracovávání určitých kombinací testů na analyzátorech COBAS INTEGRA je použití speciálních mycích cyklů povinné. Pro další pokyny a pro nejnovější verzi seznamu Extra mycích cyklů čtěte, prosím, metodický list CLEAN. Tam, kde se to vyžaduje, musí být před vykazováním výsledků provedeno programování speciálního mytí/zamezení přenosu mezi vzorky (carry-over). Limity a rozmezí Měřící rozsah ( µmol/l nebo mg/dl) Vzorky s vyššími koncentracemi stanovte použitím funkce rerun. Vzorky ředíme 1:10 pomocí funkce rerun. Výsledky ze vzorků naředěných funkcí rerun jsou automaticky vynásobené faktorem 10. Dolní meze měření Mez blanku, mez detekce a mez stanovitelnosti: Mez blanku Mez detekce Mez stanovitelnosti = 2 (0.030 µmol/l nebo mg/dl) = 3 (0.046 µmol/l nebo mg/dl) = 12 (0.182 µmol/l nebo 1.20 mg/dl) Mez blanku, mez detekce a mez stanovitelnosti byly měřeny v souladu s požadavky CLSI (Institut pro klinické a laboratorní standardy) EP17 A. Mez blanku je hodnotou 95. percentilu z n 60 měření vzorku bez obsahu analytu v průběhu několika nezávislých sérií. Mez blanku odpovídá koncentraci, pod kterou jsou vzorky bez analytu zjištěny s pravděpodobností 95. Mez detekce se měří na základě meze blanku a standardní odchylky vzorků s nízkou koncentrací. Mez detekce odpovídá nejnižší koncentraci analytu, kterou lze detekovat (hodnota nad mezí blanku s pravděpodobností 95 ). Mez stanovitelnosti je nejnižší koncentrace analytu, kterou lze reprodukovatelně měřit s celkovou chybou 30. Stanovena byla použitím vzorků albuminu s nízkými koncentracemi. Hodnoty pod mezí stanovitelnosti (< 12 ) nebudou přístrojem označeny. Očekávané hodnoty 2. ranní moč: 13 Dospělí: Děti (3 5 let): 14 < 20 mg albuminu/g kreatininu nebo < 2.26 g (34.35 µmol) albuminu/mol kreatininu < 20 (0.304 μmol/l) albuminu nebo 37 mg albuminu/g kreatininu 24h. moč: 15 < 20 (0.304 µmol/l) < 30 mg/24 h (0.456 µmol/24 h) Každá laboratoř by si měla prověřit převoditelnost očekávaných hodnot na svou populaci pacientů, a je-li to nutné, stanovit si vlastní referenční rozmezí. Specifické údaje o využití Reprezentativní údaje o využití pro analyzátory COBAS INTEGRA jsou uvedeny níže. Výsledky získané v různých laboratořích se mohou lišit. Preciznost Preciznost byla měřena použitím lidských vzorků a kontrol podle interního protokolu s opakovatelností (n = 21) a mezilehlou precizností (1 alikvot na sérii, 1 série denně, 21 dní). Byly získány následující výsledky: Opakovatelnost (µmol/l) (µmol/l) Moč nízká 22.0 (0.334) 0.3 (0.004) 1.2 Moč vysoká 115 ( 1.75) 2 (0.03) 1.9 Kontrola (normalní) 23.4 (0.356) 0.2 (0.003) 0.9 Kontrola (patologická) 88.8 (1.35) 1.0 (0.02) 1.1 ALBU2 2 / , V 9.0 Česky

3 COINV9.0 Tina-quant Albumin 2. generace - aplikace pro moč Mezilehlá preciznost (µmol/l) (µmol/l) Moč nízká 22.5 (0.342) 0.4 (0.006) 1.9 Moč vysoká 118 (1.79) 3 ( 0.04) 2.2 Kontrola (normalní) 23.6 (0.359) 0.3 (0.011) 1.1 Kontrola (patologická) 90.3 (1.37) 1.1 (0.02) 1.2 Porovnání metod Hodnoty albuminu pro vzorky lidské moči, získané v analyzátoru COBAS INTEGRA 800 použitím reagencie COBAS INTEGRA Tina quant Albumin Gen.2 (y), byly porovnány s výsledky naměřenými použitím stejné reagencie na analyzátoru cobas c 501 (x). Analyzátor cobas c 501 Počet vzorků (n) = 75 Passing/Bablok 16 y = 1.057x Lineární regrese τ = r = y = 1.047x Koncentrace vzorků byly v rozmezí 6.50 až 181 (0.650 až 18.1 mg/dl nebo až 2.75 µmol/l). Odkazy 1 Grant GH, Silverman LM, Christenson RH. Amino acids and proteins. In: Tietz NW, ed. Fundamentals of Clinical Chemistry, 3rd edition Philadelphia, PA: WB Saunders 1987: Marshall WJ, ed. Illustrated Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed. London: Gower Medical Publishing 1989; Dati F, Lammers M. Immunochemical methods for determination of urinary proteins (albumin and α1-microglobulin) in kidney disease. J Int Fed Clin Chem 1989;1: Watts NB. Albuminuria and diabetic nephropathy: an evolving story. Clin Chem 1991;37: Silverman LM, Christenson RH. Amino acids and proteins. In Tietz NW, ed. Fundamentals of Clinical Chemistry. 4th ed. Philadelphia: WB Saunders 1996; Gerbaut L.Immunoturbidimetry of albumin in serum, cerebrospinal fluid, and urine with a unique calibration curve. Clin Chem 1987;33: Croci D, Nespolo A, Bosoni MA, et al. A simple immunoturbidimetric method for IgG and albumin quantitation in cerebrospinal fluid and serum. J Clin Chem Clin Biochem 1989;27: Occupational Safety and Health Standards: Bloodborne pathogens. (29 CFR Part ). Fed. Register. 9 Directive 2000/54/EC of the European Parliament and Council of 18 September 2000 on the protection of workers from risks related to exposure to biological agents at work. 10 Hutchison AS, Paterson KR. Collecting urine for microalbumin assay. Diabetic Med 1988;5: Use of Anticoagulants in Diagnostic Laboratory Investigations. WHO Publication WHO/DIL/LAB/99.1 Rev. 2: Jan Sonntag O, Scholer A. Drug interference in clinical chemistry: recommendation of drugs and their concentrations to be used in drug interference studies. Ann Clin Biochem 2001;38: Hofmann W, Guder WG. A diagnostic program for quantitative analysis of proteinurea. J Clin Chem Clin Biochem 1989;27: Hubbuch A. Results of a multicenter study of preliminary reference ranges for albumin in urine of children and adults. Wien Klin Wochenschrift Suppl 1991;189: Hasslacher C. Diagnostische Überwachung und Therapie in den Stadien der diabetischen Nierenerkrankung. Akt Endokr Stoffw 1989;10: Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11): Tečka se v tomto metodickém listu vždy používá jako desetinný oddělovač k označení hranice mezi celými a desetinnými místy desetinného čísla. Oddělení tisíců se nepoužívá. Symboly Roche Diagnostics používá kromě symbolů a znaků uvedených v normě ISO následující znaky (pro USA: pro definici použitých symbolů navštivte stránku GTIN Obsah soupravy Objem po rekonstituci nebo promíchání Globální číslo obchodní položky Doplnění, odstranění nebo změny textu jsou označeny pruhem podél textu. 2018, Roche Diagnostics Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D Mannheim , V 9.0 Česky 3 / 3 ALBU2

4 Tina-quant Albumin 2. generace - aplikace pro sérum/plazmu Informace pro objednání Analyzátory, na kterých lze cobas c pack(y) použít Tina-quant Albumin Gen.2 (100 testů) Systémové ID COBAS INTEGRA 400 plus C.f.a.s. PUC (5 1 ml) Systémové ID Precinorm Protein (3 x 1 ml) Systémové ID Precipath Protein (3 1 ml) Systémové ID PreciControl ClinChem Multi 1 (20 5 ml) Systémové ID PreciControl ClinChem Multi 1 (4 5 ml) Systémové ID PreciControl ClinChem Multi 2 (20 5 ml) Systémové ID PreciControl ClinChem Multi 2 (4 5 ml) Systémové ID NaCl Diluent 9 (6 22 ml) Systémové ID Česky Systémové informace Test ALBS2, test ID Použití In vitro test pro kvantitativní imunologické měření lidského albuminu v séru, plazmě, moči a mozkomíšním moku. Aplikace pro moč a mozkomíšní mok jsou popsané v metodických listech k Tina quant Albumin Gen.2 Aplikace pro moč a v Tina quant Albumin Gen.2 Aplikace pro CSF. Souhrn 1,2 Albumin, protein bez sacharidů, tvoří celkových plazmatických proteinů. Jeho úkolem je udržování onkotického tlaku, účastní se také na transportu a skladování širokého spektra ligandů a je zdrojem endogenních aminokyselin. Albumin váže a tvoří rozpustnými různé složky, např. bilirubin, vápník a mastné kyseliny s dlouhým řetězcem. Albumin je také schopen vázat toxické těžké kovy a léčiva, kvůli čemuž mají nízké koncentrace albuminu v krvi významný vliv na jejich farmakokinetiku. Hyperalbuminémie má malý diagnostický význam s výjimkou dehydratace. Hypoalbuminémie je společná pro mnoho nemocí a způsobují ji různé faktory: zhoršená syntéza, buď primární následkem onemocnění jater nebo sekundární kvůli sníženému přísunu proteinů; zvýšený katabolismus při poškození tkání (těžké popáleniny) nebo záněty; malabsorpce aminokyselin (Crohnova nemoc); proteinurie v souvislosti s nefrotickým syndromem; ztráta proteinů stolicí (neoplastické choroby). V těžkých případech hypoalbuminémie klesají hladiny albuminu v plazmě pod 25. Nízký osmotický tlak plazmy umožňuje přesun vody z krevních kapilár do tkání (edém). Méření albuminu slouží ke sledování reakce pacienta na nutriční podporu a rovněž jako výborný test funkce jater. Princip testu 3,4 Imunoturbidimetrické stanovení Lidský albumin vytváří precipitát se specifickým antisérem, které se měří turbidimetricky při 340 nm. Reagencie - pracovní roztoky R1 SR TRIS a) pufr: 50 mmol/l, ph 8.0; PEG: 4.2 ; EDTA: 2 mmol/l; stabilizátor Polyklonální protilátka proti lidskému albuminu (ovčí), v závislosti na titru; TRIS a) pufr: 100 mmol/l, ph 7.2; konzervans Reagencie pro kontrolu nadbytku antigenu Albumin v ředěném séru (lidské); fosfátový pufr: 50 mmol/l, ph 7.0; konzervans a) TRIS = Tris(hydroxymetyl)-aminometan R1 je v pozici A, je v pozici B a SR je v pozici C. Bezpečnostní opatření a varování Věnujte pozornost všem varováním a bezpečnostním opatřením uvedeným v části 1 / Úvod této Příručky metod. Všechny biologické materiály je nutné považovat za potenciálně infekční. Všechny produkty jsou připravené výhradně z krve dárců, která byla individuálně testovaná a nebyla prokázána přítomnost HBsAg ani protilátek proti HCV a HIV. Testovací metody používají stanovení schválená FDA nebo povolená v souladu s evropskou směrnicí 98/79/ES, Příloha II, Seznam A. Žádné metody stanovení nemohou nicméně zcela vyloučit případné riziko infekce, a proto je nutné s materiálem zacházet opatrně, stejným způsobem, jako se vzorky pacientů. V případě expozice, dodržujte nařízení příslušných zdravotnických úřadů. 5,6 Zacházení s reagenciemi Připravena k použití Uskladnění a stabilita Doba skladování při 2 8 C Na palubě při použití při C Čtěte datum exspirace na štítku balení cobas c pack 12 týdnů Odběr vzorků a příprava Pro odběr a přípravu vzorků používejte pouze vhodné zkumavky nebo odběrové nádobky. Pouze níže uvedené vzorky byly testované a jsou přijatelné. Sérum Plazma: Li-heparinizovaná, K 2 - nebo K 3 -EDTA Sérum a plazmu odeberte použitím standardních vzorkovacích zkumavek. Uvedené druhy vzorků byly testované s vybranými typy odběrových zkumavek, které byly komerčně dostupné v té době, tzn., že do testu nebyly zařazené všechny typy zkumavek všech výrobců. Systémy odběru vzorků různých výrobců mohou obsahovat různé materiály, které mohou mít v některých případech zásadní vliv na výsledky. Při zpracování vzorků v primárních zkumavkách (systémy odběru vzorků) dodržujte pokyny jejich výrobce. Vzorky a kontroly jsou automaticky přístrojem předředěny 1:250 (1+249) roztokem NaCl. Vzorky obsahující precipitáty centrifugujte před provedením stanovení. Pro podrobnosti o možné interferenci čtěte část Omezení a interference. Stabilita: 7 10 týdnů při C 5 měsíců při 2 8 C 4 měsíce při ( 15) ( 25) C Dodávaný materiál Reagencie jsou uvedeny v části "Reagencie - pracovní roztoky". Potřebný materiál (ale nedodávaný se soupravou) NaCl Diluent 9, Kat. č , systémové ID pro automatické následné ředění a standardní ředění v sérii. NaCl Diluent 9 je umístěn do předdefinované pozice stojánku a je stabilní po dobu 4 týdnů na palubě v analyzátoru COBAS INTEGRA 400 plus. Stanovení Optimálního využití stanovení dosáhnete, budete-li dodržovat pokyny uvedené v dokumentaci pro příslušný analyzátor. Pokyny ke stanovení specifické pro analyzátor vyhledejte v příslušném návodu k použití. 1 / 3 ALBS2

5 Tina-quant Albumin 2. generace - aplikace pro sérum/plazmu Aplikace pro sérum/plazmu Definování testu Způsob měření Způsob výpočtu abs. Způsob reakce Směr reakce Reakci startuje Vlnové délky A/B Absorbance Koncový bod R1-S--SR Nárůst Výpočet první/posl. 33/49 Kontrola nadbytku antigenu 340/659 nm Ne Faktor předředění 250 Jednotka Pipetovací parametry Diluent (H 2 O) R1 100 µl Vzorek 3 µl 10 µl 20 µl SR 6 µl 10 µl Celkový objem 149 µl Kalibrace Kalibrátor C.f.a.s. PUC Poměr ředění kalibrace Neředěný a 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32 prováděno automaticky přístrojem Mód kalibrace Logit/log 4 Opakování kalibrace Kalibrační interval Doporučuje se duplikát Každá šarže, a jestliže to vyžaduje proces kontroly kvality. Kalibrační interval lze po přijatelné verifikaci kalibrace laboratoří prodloužit. Zadejte vztažnou hodnotu albuminu neředěného kalibrátoru, specifickou pro šarži, uvedenou v příbalovém letáku C.f.a.s. PUC. Návaznost: Tato metoda byla standardizovaná podle interního postupu s návazností na certifikovaný referenční materiál v lidském séru IRMM (Institut pro referenční materiály a měření) ERM-DA470k/IFCC. Kontrola kvality Referenční rozmezí Patologické rozmezí Kontrolní interval Pořadí kontrol Kontrola po kalibraci Precinorm Protein nebo PreciControl ClinChem Multi 1 Precipath Protein nebo PreciControl ClinChem Multi 2 Doporučeno 24 hodin Určeno uživatelem Doporučena Ke kontrole kvality použijte kontrolní materiály uvedené v části "Informace pro objednání". Navíc lze použít i jiný vhodný kontrolní materiál. Kontrolní intervaly a meze by měly být uzpůsobeny pro každou laboratoř dle individuálních požadavků. Naměřené hodnoty by se měly pohybovat v definovaných mezích. Každá laboratoř by měla mít vypracovaná nápravná opatření pro případ, že hodnoty překročí definované meze. Sledujte příslušná vládní nařízení a lokální směrnice kontroly kvality. Výpočet Analyzátor COBAS INTEGRA 400 plus automaticky počítá koncentraci analytu pro každý vzorek. Pro více informací čtěte, prosím, Analýza údajů v Online nápovědě. Převodní faktory: 15.2 = µmol/l 0.1 = g/dl Omezení - interference Kritérium: Výtěžnost v rámci ± 10 počáteční hodnoty. Sérum/plazma Ikterus: 8 Bez významných interferencí do hodnoty I indexu 60 pro konjugovaný a nekonjugovaný bilirubin (přibližná koncentrace konjugovaného a nekonjugovaného bilirubinu: 1026 µmol/l nebo 60 mg/dl). b) Hemolýza: 8 Bez významných interferencí do hodnoty H indexu 1000 (přibližná koncentrace hemoglobinu: 621 µmol/l nebo 1000 mg/dl). b Lipémie (Intralipid): 8 Bez významných interferencí do hodnoty L indexu b) Mezi koncentrací triglyceridů a L indexem (odpovídá zákalu) je slabá korelace. Léčiva: Při terapeutických koncentracích nebyla při použití běžných panelů léků zjištěná žádná interference. 9,10 Revmatoidní faktory: Bez významných interferencí revmatoidních faktorů do koncentrace 1200 IU/mL. b) Ve vzácných případech může gamapatie, především u typu IgM (Waldenströmova makroglobulinémie), způsobit nespolehlivé výsledky. 11 Pro diagnostické účely je vždy nezbytné používat výsledky ve spojení s anamnestickými údaji pacienta, klinickým vyšetřením a jinými nálezy. b) Měřeno při koncentracích analytu do cca 3.5 g/dl POTŘEBNÝ KROK Programování speciálního mytí: Při zpracovávání určitých kombinací testů na analyzátorech COBAS INTEGRA je použití speciálních mycích cyklů povinné. Pro další pokyny a pro nejnovější verzi seznamu Extra mycích cyklů čtěte, prosím, metodický list CLEAN. Tam, kde se to vyžaduje, musí být před vykazováním výsledků provedeno programování speciálního mytí/zamezení přenosu mezi vzorky (carry-over). Limity a rozmezí Měřící rozsah ( µmol/l nebo g/dl) (typický měřící rozsah) Horní a dolní hranice měřícího rozsahu závisí na aktuálních hodnotách kalibrátorů. Dolní meze měření Mez detekce testu: 3 (46 µmol/l nebo 0.3 g/dl) Mez detekce představuje nejnižší měřitelnou hladinu analytu, kterou lze odlišit od nuly. Počítá se jako hodnota ležící 3 standardní odchylky od nulového vzorku (nulový vzorek + 3, opakovatelnost, n = 21). Očekávané hodnoty Konsenzuální hodnoty 12 Dospělí Referenční intervaly dle Tietze 13 Novorozenci 0 4 d Děti 4 d 14 l ( µmol/l nebo g/dl) ( µmol/l nebo g/dl) ( µmol/l nebo g/dl) Každá laboratoř by si měla prověřit převoditelnost očekávaných hodnot na svou populaci pacientů, a je-li to nutné, stanovit si vlastní referenční rozmezí. Specifické údaje o využití Reprezentativní údaje o využití pro analyzátory COBAS INTEGRA jsou uvedeny níže. Výsledky získané v různých laboratořích se mohou lišit. Preciznost Preciznost byla měřena použitím lidských vzorků a kontrol podle interního protokolu s opakovatelností (n = 21) a mezilehlou precizností (1 alikvot na sérii, 1 série denně, 10 dní). Byly získány následující výsledky: Opakovatelnost Nízké sérum ALBS2 2 / 3

6 Tina-quant Albumin 2. generace - aplikace pro sérum/plazmu Opakovatelnost Vysoké sérum Precinorm Protein Precipath Protein Mezilehlá preciznost Nízké sérum Vysoké sérum Precinorm Protein Precipath Protein Porovnání metod Hodnoty albuminu pro vzorky lidského séra, získané na analyzátoru COBAS INTEGRA 800 použitím reagencie COBAS INTEGRA Tina quant Albumin Gen.2 (y), byly porovnány s výsledky naměřenými použitím odpovídající reagencie na analyzátoru cobas c 501 (x). Analyzátor cobas c 501 Počet vzorků (n) = 80 Passing/Bablok 14 y = 0.903x Lineární regrese τ = r = y = 0.875x Koncentrace vzorků byly v rozmezí 6.9 až 97.7 (105 až 1485 µmol/l nebo 0.69 až 9.77 g/dl). Odkazy 1 Grant GH, Silverman LM, Christenson RH. Amino acids and proteins. In: Tietz NW, ed. Fundamentals of Clinical Chemistry, 3rd edition Philadelphia, PA: WB Saunders 1987: Marshall WJ, ed. Plasma proteins. In: Illustrated textbook of clinical chemistry. London: Gower Medical Publishing 1988; Gerbaut L.Immunoturbidimetry of albumin in serum, cerebrospinal fluid, and urine with a unique calibration curve. Clin Chem 1987;33: Croci D, Nespolo A, Bosoni MA, et al. A simple immunoturbidimetric method for IgG and albumin quantitation in cerebrospinal fluid and serum. J Clin Chem Clin Biochem 1989;27: Occupational Safety and Health Standards: Bloodborne pathogens. (29 CFR Part ). Fed. Register. 6 Directive 2000/54/EC of the European Parliament and Council of 18 September 2000 on the protection of workers from risks related to exposure to biological agents at work. 7 Use of Anticoagulants in Diagnostic Laboratory Investigations. WHO Publication WHO/DIL/LAB/99.1 Rev. 2: Jan Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical Comparisons of Interferences in Clinical Chemistry Instrumentation. Clin Chem 1986;32: Breuer J. Report on the Symposium Drug effects in Clinical Chemistry Methods. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1996;34: Sonntag O, Scholer A. Drug interference in clinical chemistry: recommendation of drugs and their concentrations to be used in drug interference studies. Ann Clin Biochem 2001;38: Bakker AJ, Mücke M. Gammopathy interference in clinical chemistry assays: mechanisms, detection and prevention. Clin Chem Lab Med 2007;45(9): Dati F, Schumann G, Thomas L, et al. Consensus of a group of professional societies and diagnostic companies on guidelines for interim reference ranges for 14 proteins in serum based on the standardization against the IFCC/BCR/CAP reference material (CRM 470). Eur J Clin Chem Clin Biochem 1996;34: Wu AHB, ed. Tietz Clinical Guide to Laboratory Tests, 4th ed. WB Saunders Company, 2006: Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11): Tečka se v tomto metodickém listu vždy používá jako desetinný oddělovač k označení hranice mezi celými a desetinnými místy desetinného čísla. Oddělení tisíců se nepoužívá. Symboly Roche Diagnostics používá kromě symbolů a znaků uvedených v normě ISO následující znaky (pro USA: pro definici použitých symbolů navštivte stránku GTIN Obsah soupravy Objem po rekonstituci nebo promíchání Globální číslo obchodní položky Doplnění, odstranění nebo změny textu jsou označeny pruhem podél textu. 2018, Roche Diagnostics Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D Mannheim 3 / 3 ALBS2

7 Tina-quant Albumin 2. generace - aplikace pro CSF Informace pro objednání Analyzátory, na kterých lze cobas c pack(y) použít Tina-quant Albumin Gen.2 (100 testů) Systémové ID COBAS INTEGRA 400 plus C.f.a.s. PUC (5 1 ml) Systémové ID Precipath PUC (4 3 ml) Systémové ID NaCl Diluent 9 (6 22 ml) Systémové ID Česky Systémové informace Test ALBC2, test ID Použití In vitro test pro kvantitativní imunologické měření lidského albuminu v séru, plazmě, moči a mozkomíšním moku. Aplikace pro moč a sérum/plazmu jsou popsané v metodických listech k Tina quant Albumin Gen.2 Aplikace pro moč a v Tina quant Albumin Gen.2 Aplikace pro sérum/plazmu. Souhrn 1,2,3,4,5 Albumin, protein bez sacharidů, tvoří celkových plazmatických proteinů. Jeho úkolem je udržování onkotického tlaku, účastní se také na transportu a skladování širokého spektra ligandů a je zdrojem endogenních aminokyselin. Přibližně 80 bílkovinného obsahu v CSF pochází z plazmy a je výsledkem ultrafiltrace. Nízkomolekulární bílkoviny, především albumin, prealbumin a transferin mezi nimi převažují. Albumin v centrálním nervovém systému není ani syntetizován a ani metabolizován. Proto je vhodným prostředkem indikujícím zvýšenou permeabilitu hematoencefalické bariéry v patologických, traumatických stavech a zánětech. Porušení hematoencefalické bariéry lze posuzovat použitím indexu CSF/sérum albuminu. 5 Zkrácený název členění: ALB I (0 178) Index CSF/sérum albuminu = Albumin CSF ()/Albumin Sér () Index > 9 indikuje porušení hematoencefalické bariéry. Stanovení albuminu v CSF je dále důležité při zjišťování intrathekální produkce IgG, která je spojována s poruchami demyelinizace, mezi které patří roztroušená skleróza. Zvýšená koncentrace IgG v CSF může být způsobena jednak zvýšenou propustností nebo naopak zvýšenou intrathekální syntézou. Přesnějšího měření intrathekální produkce IgG je dosaženo korekcí frakce IgG o hodnotu, způsobenou zvýšenou propustností určenou na základě stanovení albuminu podle uvedeného výpočtu: 5 Zkrácený název členění: IGG (0 179) Poměr = IgG CSF ()/Albumin CSF () Index > 0.27 indikuje zvýšenou intrathekální syntézu IgG. Zkrácený název členění: IGGI2 (0 180) IgG index = IgG CSF () Albumin Sér/Plazma () / IgG Sér () / Albumin CSF () Hodnoty indexu > 0.7 jsou znamením zvýšené syntézy IgG. Ve > 80 případů roztroušené sklerózy přesahuje index 0.7. Princip testu 6,7 Imunoturbidimetrické stanovení Lidský albumin vytváří precipitát se specifickým antisérem, které se měří turbidimetricky při 340 nm. Reagencie - pracovní roztoky R1 TRIS a) pufr: 50 mmol/l, ph 8.0; PEG: 4.2 ; EDTA: 2 mmol/l; stabilizátor Polyklonální protilátka proti lidskému albuminu (ovčí), v závislosti na titru; TRIS a) pufr: 100 mmol/l, ph 7.2; konzervans SR Reagencie pro kontrolu nadbytku antigenu Albumin v ředěném séru (lidské); fosfátový pufr: 50 mmol/l, ph 7.0; konzervans a) TRIS = Tris(hydroxymetyl)-aminometan R1 je v pozici A, je v pozici B a SR je v pozici C. Bezpečnostní opatření a varování Věnujte pozornost všem varováním a bezpečnostním opatřením uvedeným v části 1 / Úvod této Příručky metod. Všechny biologické materiály je nutné považovat za potenciálně infekční. Všechny produkty jsou připravené výhradně z krve dárců, která byla individuálně testovaná a nebyla prokázána přítomnost HBsAg ani protilátek proti HCV a HIV. Testovací metody používají stanovení schválená FDA nebo povolená v souladu s evropskou směrnicí 98/79/ES, Příloha II, Seznam A. Žádné metody stanovení nemohou nicméně zcela vyloučit případné riziko infekce, a proto je nutné s materiálem zacházet opatrně, stejným způsobem, jako se vzorky pacientů. V případě expozice, dodržujte nařízení příslušných zdravotnických úřadů. 8,9 Zacházení s reagenciemi Připravena k použití Uskladnění a stabilita Doba skladování při 2 8 C Na palubě při použití při C Čtěte datum exspirace na štítku balení cobas c pack 12 týdnů Odběr vzorků a příprava Pro odběr a přípravu vzorků používejte pouze vhodné zkumavky nebo odběrové nádobky. Pouze níže uvedené vzorky byly testované a jsou přijatelné. CSF Uvedené druhy vzorků byly testované s vybranými typy odběrových zkumavek, které byly komerčně dostupné v té době, tzn., že do testu nebyly zařazené všechny typy zkumavek všech výrobců. Systémy odběru vzorků různých výrobců mohou obsahovat různé materiály, které mohou mít v některých případech zásadní vliv na výsledky. Při zpracování vzorků v primárních zkumavkách (systémy odběru vzorků) dodržujte pokyny jejich výrobce. Vzorky a kontroly jsou automaticky přístrojem předředěny 1:6 (1+5) roztokem NaCl. Vzorky obsahující precipitáty centrifugujte před provedením stanovení. Pro podrobnosti o možné interferenci čtěte část Omezení a interference. Stabilita: 10 do 72 hodin při 4 C 6 měsíců při 20 C neomezeně při 70 C Dodávaný materiál Reagencie jsou uvedeny v části "Reagencie - pracovní roztoky". Potřebný materiál (ale nedodávaný se soupravou) NaCl Diluent 9, Kat. č , systémové ID pro automatické následné ředění a standardní ředění v sérii. NaCl Diluent 9 je umístěn do předdefinované pozice stojánku a je stabilní po dobu 4 týdnů na palubě v analyzátoru COBAS INTEGRA 400 plus. 1 / 3 ALBC2

8 Tina-quant Albumin 2. generace - aplikace pro CSF Stanovení Optimálního využití stanovení dosáhnete, budete-li dodržovat pokyny uvedené v dokumentaci pro příslušný analyzátor. Pokyny ke stanovení specifické pro analyzátor vyhledejte v příslušném návodu k použití. Aplikace pro CSF Definování testu Způsob měření Způsob výpočtu abs. Způsob reakce Směr reakce Reakci startuje Vlnové délky A/B Absorbance Koncový bod R1-S--SR Nárůst Výpočet první/posl. 33/49 Typický efekt prozóny Kontrola nadbytku antigenu Faktor předředění 6 Jednotka Pipetovací parametry 340/659 nm > 2400 (> 36.5 µmol/l nebo > 240 mg/dl) Ano (v SR) Diluent (H 2 O) R1 100 µl Vzorek 6 µl 15 µl 20 µl SR 6 µl 10 µl Celkový objem 157 µl Kalibrace Kalibrátor C.f.a.s. PUC Poměr ředění kalibrace 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32, 1:64 prováděno automaticky přístrojem Mód kalibrace Logit/log 4 Opakování kalibrace Kalibrační interval Doporučuje se duplikát Každá šarže, a jestliže to vyžaduje proces kontroly kvality. Kalibrační interval lze po přijatelné verifikaci kalibrace laboratoří prodloužit. Zadejte vztažnou hodnotu albuminu neředěného kalibrátoru (), specifickou pro šarži, jež je uvedena v příbalovém letáku C.f.a.s. PUC. Návaznost: Tato metoda byla standardizovaná podle interního postupu s návazností na certifikovaný referenční materiál v lidském séru IRMM (Institut pro referenční materiály a měření) ERM-DA470k/IFCC. Kontrola kvality Kontrola kvality Kontrolní interval Pořadí kontrol Kontrola po kalibraci Používejte komerčně dostupné kontroly CSF nebo Precipath PUC. Doporučeno 24 hodin Určeno uživatelem Doporučena Ke kontrole kvality použijte kontrolní materiály uvedené v části "Informace pro objednání". Navíc lze použít i jiný vhodný kontrolní materiál. Kontrolní intervaly a meze by měly být uzpůsobeny pro každou laboratoř dle individuálních požadavků. Naměřené hodnoty by se měly pohybovat v definovaných mezích. Každá laboratoř by měla mít vypracovaná nápravná opatření pro případ, že hodnoty překročí definované meze. Sledujte příslušná vládní nařízení a lokální směrnice kontroly kvality. Výpočet Analyzátor COBAS INTEGRA 400 plus automaticky počítá koncentraci analytu pro každý vzorek. Pro více informací čtěte, prosím, Analýza údajů v Online nápovědě. Převodní faktory: = µmol/l 0.1 = mg/dl Omezení - interference Kritérium: Výtěžnost v rámci ± 10 počáteční hodnoty. Hemolýza: Bez významných interferencí do koncentrace hemoglobinu 621 µmol/l nebo 1000 mg/dl. b) Efekt nadbytku antigenu (hook efekt) nebyl zaznamenán při koncentraci albuminu pod 36.5 µmol/l nebo Vzorky s koncentrací > 2400 jsou označeny buď ">TEST RNG" nebo "AG EXCESS. Pro diagnostické účely je vždy nezbytné používat výsledky ve spojení s anamnestickými údaji pacienta, klinickým vyšetřením a jinými nálezy. b) měřeno při hladině analytu do 175. POTŘEBNÝ KROK Programování speciálního mytí: Při zpracovávání určitých kombinací testů na analyzátorech COBAS INTEGRA je použití speciálních mycích cyklů povinné. Pro další pokyny a pro nejnovější verzi seznamu Extra mycích cyklů čtěte, prosím, metodický list CLEAN. Tam, kde se to vyžaduje, musí být před vykazováním výsledků provedeno programování speciálního mytí/zamezení přenosu mezi vzorky (carry-over). Limity a rozmezí Měřící rozsah ( µmol/l nebo mg/dl) (typický měřící rozsah) Horní hranice rozsahu měření závisí na aktuálních hodnotách kalibrátorů. Vzorky s vyššími koncentracemi stanovte použitím funkce rerun. Vzorky ředíme 1:10 pomocí funkce rerun. Výsledky ze vzorků naředěných funkcí rerun jsou automaticky vynásobené faktorem 10. Dolní meze měření Mez detekce testu: 18 (0.274 µmol/l nebo 1.8 mg/dl) Mez detekce představuje nejnižší měřitelnou hladinu analytu, kterou lze odlišit od nuly. Počítá se jako hodnota ležící 3 standardní odchylky od nulového vzorku (nulový vzorek + 3, opakovatelnost, n = 21). Očekávané hodnoty Index CSF/sérum albuminu (Q ALB 10 3 ) Dospělí: 11 do 15 let 5.0 Poměr IgG CSF /albumin CSF 5 Běžný < 0.27 do 40 let 6.5 do 60 let 8.0 Index > 0.27 indikuje zvýšenou intrathekální syntézu IgG. IgG index 5 Běžný Index > 0.70 indikuje zvýšenou intrathekální syntézu IgG. Každá laboratoř by si měla prověřit převoditelnost očekávaných hodnot na svou populaci pacientů, a je-li to nutné, stanovit si vlastní referenční rozmezí. Specifické údaje o využití Reprezentativní údaje o využití pro analyzátory COBAS INTEGRA jsou uvedeny níže. Výsledky získané v různých laboratořích se mohou lišit. Preciznost Preciznost byla měřena použitím lidských vzorků a kontrol podle interního protokolu s opakovatelností (n = 21) a mezilehlou precizností (1 alikvot na sérii, 1 série denně, 10 dní). Byly získány následující výsledky: ALBC2 2 / 3

9 Tina-quant Albumin 2. generace - aplikace pro CSF Opakovatelnost Nízké CSF Vysoké CSF Kontrola nízká Kontrola vysoká Mezilehlá preciznost Nízké CSF Vysoké CSF Kontrola nízká Kontrola vysoká Symboly Roche Diagnostics používá kromě symbolů a znaků uvedených v normě ISO následující znaky (pro USA: pro definici použitých symbolů navštivte stránku GTIN Obsah soupravy Objem po rekonstituci nebo promíchání Globální číslo obchodní položky Doplnění, odstranění nebo změny textu jsou označeny pruhem podél textu. 2018, Roche Diagnostics Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D Mannheim Porovnání metod Hodnoty albuminu pro vzorky lidského CSF, získané na analyzátoru COBAS INTEGRA 800 použitím reagencie COBAS INTEGRA Tina quant Albumin Gen.2 (y), byly porovnány s výsledky naměřenými použitím odpovídající reagencie na analyzátoru cobas c 501 (x). Analyzátor cobas c 501 Počet vzorků (n) = 66 Passing/Bablok 12 y = 1.050x Lineární regrese τ = r = y = 1.096x Koncentrace vzorků byly v rozmezí 36.7 až 1168 (0.558 až 17.8 µmol/l nebo 3.67 až 117 mg/dl). Odkazy 1 Grant GH, Silverman LM, Christenson RH. Amino acids and proteins. In: Tietz NW, ed. Fundamentals of Clinical Chemistry, 3rd edition Philadelphia, PA: WB Saunders 1987: Marshall WJ, ed. Illustrated Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed. London: Gower Medical Publishing 1989; Dati F, Lammers M. Immunochemical methods for determination of urinary proteins (albumin and α1-microglobulin) in kidney disease. J Int Fed Clin Chem 1989;1: Watts NB. Albuminuria and diabetic nephropathy: an evolving story. Clin Chem 1991;37: Silverman LM, Christenson RH. Amino acids and proteins. In Tietz NW, ed. Fundamentals of Clinical Chemistry. 4th ed. Philadelphia: WB Saunders 1996; Gerbaut L.Immunoturbidimetry of albumin in serum, cerebrospinal fluid, and urine with a unique calibration curve. Clin Chem 1987;33: Croci D, Nespolo A, Bosoni MA, et al. A simple immunoturbidimetric method for IgG and albumin quantitation in cerebrospinal fluid and serum. J Clin Chem Clin Biochem 1989;27: Occupational Safety and Health Standards: Bloodborne pathogens. (29 CFR Part ). Fed. Register. 9 Directive 2000/54/EC of the European Parliament and Council of 18 September 2000 on the protection of workers from risks related to exposure to biological agents at work. 10 Tietz NW, ed. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. Philadelphia, PA: WB Saunders Company 1995; Reiber H. External Quality Assessment in Clinical Neurochemistry: Survey of Analysis for Cerebrospinal Fluid (CSF) Proteins based on CSF/Serum Quotients. Clin Chem 1995;41: Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11): Tečka se v tomto metodickém listu vždy používá jako desetinný oddělovač k označení hranice mezi celými a desetinnými místy desetinného čísla. Oddělení tisíců se nepoužívá. 3 / 3 ALBC2