Troponin T hs. Troponin T hs (high sensitive) Elecsys 2010 MODULAR ANALYTICS E170 cobas e 411 cobas e 602

Transkript

1 (high sensitive) Česky Použití Imunostanovení pro in vitro kvantitativní stanovení srdečního troponinu T v lidském séru a plazmě. Toto stanovení lze použít při diferenciální diagnostice akutního koronárního syndromu k zjištění nekrózy, např. akutní infarkt myokardu. Test je dále určen ke stratifikaci rizika pacientů s akutním koronárním syndromem a pro odhad srdečního rizika u pacientů s chronickým selháním ledvin. Test může prospět při výběru intenzivnější léčby a zásahu u pacientů se zvýšenými hodnotami srdečního troponinu T. Elektrochemiluminiscenční imunostanovení ECLIA je určeno pro použití na analyzátorech imunostanovení Elecsys a cobas e. Souhrn Troponin T (TnT) je složkou kontraktilního aparátu příčně pruhovaného svalstva. Ačkoliv je funkce TnT je stejná ve všech příčně pruhovaných svalech, TnT pocházející výlučně z myokardu (srdeční TnT, molekulová hmotnost 39.7 kd) se zřetelně odlišuje od TnT svalstva skeletu. Vzhledem k vysoké tkáňové specifičnosti je srdeční troponin T (ctnt) pro srdce specifický, vysoce citlivý markerem poškození myokardu. Hladina srdečního troponinu T se prudce zvyšuje po infarktu myokardu (AIM) a může přetrvávat zvýšená následující 2 týdny. 1,2,3 Včasná detekovatelnost nárůstu koncentrace troponinu v krvi závisí od analytické citlivosti použitého specifického testu na troponin. Jak naznačuje několik studií 4,5,6 vysoce citlivý test na troponin T (ctnt hs) pomáhá v porovnání s konvenčními testy na troponin zkrátit čas, kdy může být detekovaný, z 6 na 3 hodiny. Jeho použití se doporučuje ve směrnicích z roku 2011 od ESC a 2014 ICE týkajících se infarktu myokardu bez elevace ST segmentu (STEMI) 7,8 Směrnice 2015 ESC týkající se STEMI dále navrhují zkrátit dobu detekce na 0h/1h. Tento zrychlený přístup k potvrzení nebo vyloučení diagnózy AIM za zkrácenou dobu v 0h/1h se musí použít s vysoce citlivými testy na srdeční troponin (hs ctn) a algoritmů validovaných pro specifické stanovení hs ctn. 9,10,11,12 Specifické hodnoty algoritmu pro ctnt hs byly doporučené v těchto směrnicích a byly validované ve 3 studiích, APACE, APACE 2015 a TRAPID AMI. 13,14,15 arozdíl od infarktu myokardu s elevací ST segmentu (STEMI) je diagnóza infarktu myokardu bez elevace ST segmentu (STEMI) výrazně založená na výsledku stanovení koncentrace srdečního troponinu. Podle nové univerzální definice je IM diagnostikován, jestliže jsou hladiny srdečního troponinu v krvi nad 99. percentilem referenční meze (zdravé populace) a je rovněž přítomný důkaz ischemie myokardu (symptomy, změny EKG nebo výsledky zobrazovacích metod). Definice vyžaduje stanovení troponinu s nepřesností (variační koeficient) u 99. percentilu optimálně menší nebo rovnou Srdeční troponin T (ctnt) je nezávislým prognostickým markerem s dobrou predikcí krátkodobého, střednědobého a dlouhodobého výhledu pacientů s akutním koronárním syndromem (AKS). 17,18,19,20 a základě výsledků 4 multicentrických studií, zahrnujících více než 7000 pacientů, bylo prokázáno, že srdeční troponin T je rovněž přínosný při identifikaci pacientů, u kterých bude úspěšná antitrombotická terapie (inhibitory GPIIb/IIIa, nízkomolekulový heparin). 21,22,23,24,25 Výsledky části studie PLATO zahrnující 9946 pacientů hospitalizovaných pro STE AKS rovněž podporují použití testování ctnt hs na identifikaci těch pacientů s STE AKS, kteří budou nejvíce profitovat z agresivní protidestičkové léčby. 26 V nových směrnicích pro diagnózu a léčbu akutního koronárního syndromu bez elevace ST segmentu byl srdeční troponin opětovně potvrzen jako preferovaný marker poškození myokardu. 9,27 Troponiny jsou vylučované během nekrózy myocytů. Ačkoliv jsou specifické pro srdce, nejsou specifické pouze pro IM. a odlišení akutního a chronického zvýšení ctn a detekci nárůstu anebo poklesu koncentrace ctn nad horní referenční mez 99. percentilu jsou potřebné podle univerzální definice AIM sériové odběry vzorků. Zdá se, že absolutní změny v koncentraci ctn mají vyšší diagnostickou přesnost AIM než relativní Elecsys 2010 MODULAR AALYTICS E170 cobas e 411 cobas e 601 cobas e 602 změny. 16,28 aměřené koncentrace ctn musí být analyzované v kontextu výsledků klinického vyšetření, včetně symptomů ischemie a změn na EKG. Podle univerzální definice AIM umožnila zvýšená analytická citlivost stanovení ctn používaných v posledních letech detekci poškození myokardu způsobenou jinými příčinami. 16 Chronické zvýšení koncentrací ctn lze detekovat u klinicky stabilních pacientů, jako např. u pacientů s ischemickým nebo neischemickým selháváním srdce, 29,30,31 pacientů s různými formami kardiomyopatie, 32 se selháváním ledvin, 33,34,35,36,37,38 sepsí 39 a diabetem. 40,41 Zvýšené hladiny troponinu T korelují se závažností onemocnění koronární tepny a slabým výsledkem nezávislým na hladinách natriuretického peptidu (BP nebo T probp). 42,43,44,45 ízké koncentrace troponinu T jsou nezávislým znamením kardiovaskulárních potíží včetně výskytu a opětovného výskytu fibrilace síní. 46 Poškození buňky srdečního svalu, které vede ke zvýšeným koncentracím ctnt v krvi se může vyskytnout i v jiných klinických případech jako jsou myokarditida, 47 kontuze srdce, 48 plicní embolie 49 a kardiotoxicita vyvolaná léky. 50 Jiné diagnostické testy jako jsou myoglobin, CK MB, T probp a CRP mohou doplnit diagnostickou a prognostickou informaci troponinu T v jiných indikacích. 42,51,52,53,54 Stanovení Elecsys používá 2 monoklonální protilátky specificky směrované proti lidskému srdečnímu troponinu T. 55,56 Protilátky rozpoznávají 2 epitopy (aminokyseliny na pozicích a ), umístěné v centrální části proteinu srdečního troponinu T, který se skládá z 288 aminokyselin. Kalibrátory ( CalSet) obsahují rekombinantní lidský srdeční troponin T (rek. hctnt). Rek. hctnt je izolován z buněčné kultury E. coli BL21, obsahující pet vektor s genem lidského srdečního troponinu T izoformy 3. Po fermentaci jsou buňky rozbity ultrazvukem a remomb. hctnt je vyčištěn chromatografií na iontoměničích. Vyčištěný rekomb. hctnt je charakterizován S PAGE, Western blotingem, imunologickou aktivitou a proteinovým obsahem. 57 Princip testu Sendvičový princip. Celková doba stanovení: 18 minut. 1. inkubace: 50 µl vzorku, biotinylovaná monoklonální protilátka proti srdečnímu troponinu T a monoklonální protilátka proti troponinu T, značená rutheniovým komplexem a) reagují za tvorby sendvičového komplexu. 2. inkubace: Po přidání mikročástic potažených streptavidinem se komplex váže na pevnou fázi prostřednictvím interakce mezi biotinem a streptavidinem. Reakční směs je nasáta do měřící cely, kde jsou mikročástice s navázanými komplexy zachyceny prostřednictvím magnetu. enavázané složky jsou odstraněny roztokem ProCell/ProCell M. Přivedené napětí na pracovní elektrodě vyvolá chemiluminiscenční emisi fotonů, která je změřena fotonásobičem. Výsledky jsou zjištěny z kalibrační křivky, která je specificky vytvořena pro přístroj dvoubodovou kalibrací, a master křivky, která se do přístroje načte z čárového kódu reagencie. a) Tris(2,2'-bipyridyl)ruthenium(II)-komplex (Ru(bpy) ) Reagencie - pracovní roztoky Reagenční rackpack je označen jako TT HS. M Mikročástice potažené streptavidinem (průhledné víčko), 1 nádobka, 12 ml: Streptavidinem potažené mikročástice, 0.72 mg/ml; konzervans. 1 / 7

2 (high sensitive) R1 R2 Anti-troponin T-Ab~biotin (šedé víčko), 1 nádobka, 14 ml: Biotinylovaná monoklonální anti-kardiální protilátka proti troponinu T (myší) 2.5 mg/l; fosfátový pufr 100 mmol/l, ph 6.0; konzervans, inhibitory. Anti-troponin T-Ab~Ru(bpy) (černé víčko), 1 nádobka, 14 ml: Monoklonální anti-kardiální protilátka proti troponinu T (myší) značená rutheniovým komplexem 2.5 mg/l; fosfátový pufr 100 mmol/l, ph 6.0; konzervans. Bezpečnostní opatření a varování Pro diagnostické použití in vitro. Dodržujte běžná bezpečnostní opatření nutná pro nakládání se všemi reagenciemi. Likvidace všech odpadních materiálů musí probíhat v souladu s místními předpisy. Bezpečnostní listy jsou pro odborné uživatele dostupné na vyžádání. U všech reagencií a druhů vzorků (vzorky, kalibrátory a kontroly) zabraňte vytvoření pěny. Zacházení s reagenciemi Reagencie v soupravě jsou sestaveny tak, že tvoří komplet připravený k použití a nemohou být odděleny. Všechny informace, potřebné pro správnou činnost, jsou načteny z příslušného čárového kódu reagencie. Uskladnění a stabilita Skladujte při 2 8 C. emrazit. Reagenční soupravu Elecsys skladujte ve vzpřímené poloze, aby byla zajištěna dostupnost všech mikročástic během automatického míchání před použitím. Stabilita: neotevřené při 2 8 C po otevření při 2 8 C v analyzátorech do uvedeného data exspirace 12 týdnů 4 týdnů Odběr vzorků a příprava Pouze níže uvedené vzorky byly testované a jsou přijatelné. Sérum odebrané standardní odběrovou soupravou nebo pomocí zkumavek se separačním gelem. K 2 EDTA, K 3 EDTA, Li heparin a a heparin plazma. Plazma (EDTA, heparin) a vzorky séra by neměly být používány navzájem. Kritérium: Sklon korelační koeficient Stabilní 24 hodin při 2 8 C, 12 měsíců při 20 C. Zmrazit jen jednou. Uvedené druhy vzorků byly testované s vybranými typy odběrových zkumavek, které byly komerčně dostupné v té době, tzn., že do testu nebyly zařazené všechny typy zkumavek všech výrobců. Systémy odběru vzorků různých výrobců mohou obsahovat různé materiály, které mohou mít v některých případech zásadní vliv na výsledky. Při zpracování vzorků v primárních zkumavkách (systémy odběru vzorků) dodržujte pokyny jejich výrobce. Vzorky obsahující precipitáty centrifugujte před provedením stanovení. epoužívejte vzorky a kontroly stabilizované azidem. Před měřením zajistěte, aby vzorky, kalibrátory a kontroly měly teplotu C. Vzhledem k možnému odparu roztoků by měly být vzorky, kalibrátory a kontroly v analyzátoru analyzovány/stanoveny do 2 hodin. Dodávaný materiál Reagencie jsou uvedeny v části "Reagencie - pracovní roztoky". Potřebný materiál (ale nedodávaný se soupravou) , CalSet, pro 4 x 1 ml , PreciControl Troponin, pro 2 x 2 ml každého z z PreciControl Troponin 1 a , Diluent MultiAssay, 2 x 16 ml diluentu vzorku Celkové vybavení laboratoře Elecsys 2010, MODULAR AALYTICS E170 nebo analyzátor cobas e Příslušenství pro analyzátory Elecsys 2010 a analyzátory cobas e 411: , ProCell, 6 x 380 ml systémový pufr , CleanCell, 6 x 380 ml čistící roztok pro měřící celu , Elecsys SysWash, 1 x 500 ml promývací přísada , Adapter for SysClean , Elecsys 2010 AssayCup, 60 x 60 reakčních nádobek , Elecsys 2010 AssayTip, 30 x 120 pipetovacích špiček Příslušenství pro analyzátory MODULAR AALYTICS E170, cobas e 601 a cobas e 602: , ProCell M, 2 x 2 L systémový pufr , CleanCell M, 2 x 2 L čistící roztok pro měřící celu , PC/CC Cups, 12 kalíšků pro předehřátí ProCell M a CleanCell M před užitím , ProbeWash M, 12 x 70 ml čistícího roztoku pro finalizaci a mytí během změny reagencií , PreClean M, 5 x 600 ml systémový čistící roztok , AssayTip/AssayCup Combimagazine M, 48 palet x 84 reak. nádobek nebo pipet. špiček, odpadní vaky , WasteLiner, odpadní vaky , SysClean Adapter M Příslušenství pro všechny analyzátory: , ISE Cleaning Solution/Elecsys SysClean, 5 x 100 ml systémový čistící roztok Stanovení Optimálního využití stanovení dosáhnete, budete-li dodržovat pokyny uvedené v dokumentaci pro příslušný analyzátor. Pokyny ke stanovení specifické pro analyzátor vyhledejte v příslušném návodu k použití. Promíchání mikročástic před použitím proběhne automaticky. ačtěte specifické parametry pro test z čárového kódu reagencie. Ve výjimečných případech, kdy čárový kód nemůže být načten, zadejte 15místnou sekvenci čísel. Analyzátory MODULAR AALYTICS E170, cobas e 601 a cobas e 602: Je vyžadován roztok PreClean M. Vytemperujte chlazené reagencie na přibl. 20 C a umístěte je do reagenčního kotouče (20 C) analyzátoru. Zabraňte tvorbě pěny. Systém automaticky reguluje teplotu reagencií a otvírá a zavírá nádobky. Kalibrace ávaznost: Stanovení ( ) bylo standardizováno dle stanovení STAT ( ). To bylo zas původně standardizováno podle metody Enzymun Test Troponin T (CARDIAC T). Každá reagenční souprava Elecsys je opatřena štítkem s čárovým kódem obsahujícím specifické informace pro kalibraci dané šarže reagencií. Předdefinovaná master křivka je uzpůsobena pro analyzátor pomocí příslušného CalSet. Frekvence kalibrace: Kalibrace musí být provedena jednou pro celou šarži reagencií novými reagenciemi (tj. ne více než 24 hodin od registrace reagenční soupravy v analyzátoru). Obnovení kalibrace je doporučeno: po 1 měsíci (28 dní) při používání stejné šarže reagencií po 7 dnech (při používání stejné reagenční soupravy v analyzátoru) dle potřeby: např. výsledky kontroly kvality jsou mimo definované rozmezí Kontrola kvality Pro kontrolu kvality používejte PreciControl Troponin. avíc lze použít i jiný vhodný kontrolní materiál. Kontroly pro rozdílné koncentrační rozmezí by měly být jednotlivě stanoveny nejméně jednou za 24 hodin při používání testu, alespoň 1x na soupravu reagencií a po každé kalibraci. 2 / 7

3 (high sensitive) Kontrolní intervaly a meze by měly být uzpůsobeny pro každou laboratoř dle individuálních požadavků. aměřené hodnoty by se měly pohybovat v definovaných mezích. Každá laboratoř by měla mít vypracovaná nápravná opatření pro případ, že hodnoty překročí definované meze. Sledujte příslušná vládní nařízení a lokální směrnice kontroly kvality. Výpočet Analyzátor automaticky vypočítá koncentraci analytu pro každý vzorek buď v pg/ml,, ng/ml, μg/l (analyzátory MODULAR AALYTICS E170, cobas e 601 a cobas e 602) nebo v pg/ml, ng/ml, μg/l (analyzátory Elecsys 2010 a cobas e 411). Omezení - interference Stanovení není ovlivněno ikteritou (bilirubin < 428 µmol/l nebo < 25 mg/dl), hemolýzou (Hb < mmol/l nebo < 0.1 g/dl; vzorky vykazující viditelné znaky hemolýzy mohou způsobit interferenci), lipémií (Intralipid < 1500 mg/dl) a biotinem (< 82 nmol/l nebo < 20 ng/ml). Při použití vzorků s koncentrací hemoglobinu > 0.1 g/dl jsou získané výsledky falešně nižší. Kritérium: Výtěžnost v rámci ± 20 počátečních hodnot při koncentraci troponinu T < 100 nebo pg/ml (± 10 při koncentraci troponinu T 100 nebo pg/ml). Vzorky by neměly být odebrány pacientům podstupujícím léčbu s vysokými dávkami biotinu (tj. > 5 mg/den) po dobu nejméně 8 hodin od podání poslední dávky biotinu. U revmatoidních faktorů nebyla interference zaznamenána do koncentrace 1500 IU/mL. Efekt nadbytku antigenu (hook efekt) nebyl zaznamenán pro troponin T do In vitro testy byly prováděny na 52 běžně užívaných lécích. ebyla zjištěna žádná interference. Ve vzácných případech je možné pozorovat interferenci způsobenou velmi vysokým titrem protilátek proti test specifickým protilátkám, streptavidinu nebo rutheniu. Tyto účinky jsou minimalizovány vhodným navržením testu. Pro diagnostické účely je vždy nezbytné používat výsledky ve spojení s anamnestickými údaji pacienta, klinickým vyšetřením a jinými nálezy. Limity a rozmezí Měřící rozsah nebo pg/ml (definováno mezí blanku a maximem master křivky). Hodnoty pod mezí blanku se vykazují jako < 3 nebo pg/ml. Hodnoty nad měřícím rozsahem se vykazují jako > nebo pg/ml (nebo do nebo pg/ml při 10násobném ředění vzorku). Dolní meze měření Mez blanku, mez detekce a mez stanovitelnosti Mez blanku = 3 Mez detekce = 5 Mez stanovitelnosti = 13 Mez blanku, mez detekce a mez stanovitelnosti byly měřené v souladu s požadavky CLSI (Institut pro klinické a laboratorní standardy) EP17 A2. Mez stanovitelnosti byla stanovena použitím výsledku testování funkční citlivosti. Mez blanku je hodnotou 95. percentilu z n 60 měření vzorku bez obsahu analytu v průběhu několika nezávislých sérií. Mez blanku odpovídá koncentraci, pod kterou jsou vzorky bez analytu zjištěny s pravděpodobností 95. Mez detekce se měří na základě meze blanku a standardní odchylky vzorků s nízkou koncentrací. Mez detekce odpovídá nejnižší koncentraci analytu, kterou lze detekovat (hodnota nad mezí blanku s pravděpodobností 95 ). Mez stanovitelnosti (funkční citlivost) je nejnižší koncentrace analytu, která může být opakovatelně měřena s mezilehlou precizností 10. (10 nezávislých sérií, 1 série/den). Stanovena byla použitím vzorků troponinu T s nízkými koncentracemi. Byla provedena studie založená na směrnici CLSI, protokolu EP17 A2. Mez blanku a mez detekce byly detekované takto: Mez blanku ( = pg/ml) Mez detekce ( = pg/ml) Analyzátory Elecsys 2010 a cobas e 411 Analyzátory MODULAR AALYTICS E170, cobas e 601 a cobas e Ředění Vzorky s koncentrací srdečního troponinu T nad rozsahem měření lze ředit použitím Elecsys Diluent MultiAssay. Doporučený poměr ředění je 1:10 (buď automaticky na analyzátorech MODULAR AALYTICS E170, Elecsys 2010 nebo cobas e nebo ručně). Koncentrace ředěného vzorku musí být > Po ručním naředění výsledek vynásobte faktorem ředění. Po naředění analyzátorem software MODULAR AALYTICS E170, Elecsys 2010 a cobas e automaticky počítá s ředěním při výpočtu koncentrace vzorku. Očekávané hodnoty Ve studiích provedených stanovením Elecsys zahrnujícím 533 zdravých dobrovolníků (věk v rozmezí: let), horní referenční mez (99. percentil) pro troponin T byl stanoven při 14, 95 interval ejnižší koncentrace s menším nebo rovnajícím se 10 (mez stanovitelnosti) se stanovením Elecsys byla 13. a základě kritéria WHO pro definici AIM 59 ze 70. let je hodnota cut-off (klinický diskriminátor) pro troponin T 0.1 µg/l (ng/ml) nebo 100 podle zjištění ROC analýzy výsledků získaných s předcházející generací testu stanovení Elecsys Troponin T. 60,61 WHO definice AIM byla nedávno aktualizovaná a zohledňuje definici ESC/ACCF/AHA/WHF, která doporučuje detekci nárůstu anebo poklesu koncentrací srdečního troponinu s klinickými známkami ischemie myokardu použitím jako cut-off hodnoty 99. percentil koncentrace troponinu. 62 Vzhledem ke kinetice uvolňování srdečního troponinu T nevylučuje původní výsledek testu < 99. perc. v rámci první hodiny po nástupu symptomů infarkt myokardu u všech pacientů. Z tohoto důvodu byly pro okamžité vyloučení AIM navrženy nižší hodnoty cut-off a rovněž specifické delta změny pro algoritmy 0h/1h. 9 Další testování ve vhodných časových intervalech je indikované, pokud výsledky prvních měření nejsou jednoznačné a diagnóza AKS je na základě klinického stavu pravděpodobná. 9 Hodnoty troponinu by měly být vždy interpretované s výsledkem kompletního klinického posouzení (včetně charakteristiky bolesti na hrudi a EKG). Důležité je získat důkladnou historii a precizní popis symptomů. ezbytná je lékařská prohlídka se zřetelem na možnou přítomnost kontuze srdce, akutního a chronického srdečního selhání, aortální disekce, onemocnění aortální chlopně, hypertrofické kardiomyopatie, tachy- nebo bradyarytmie, apikální balonové dysfunkce, rabdomyolýzy s poškozením srdce, plicní embolie, těžké plicní hypertenze, akutního neurologického onemocnění, infiltrativních onemocnění, toxicity léků, respiračního selhání, sepse, popálenin. 9,16 a rozlíšení pacientů s nebo beze změn ST segmentu je potřebné získat elektrokardiogram (EKG). Laboratorní vyšetření pacientů s podezřením na AKS by mělo zahrnovat markery myokardiálního poškození, nejlépe srdeční troponin. 9 Rostou-li koncentrace troponinu nebo srdečních enzymů, dojde k nezvratnému poškození myocytů a tyto pacienty je potřeba považovat za pacienty, u kterých došlo k poškození myokardu. Faktory spojené se zvýšenými hodnotami 16,47,63,64,65,66 Publikované klinické studie ukázaly zvýšený srdeční troponin u pacientů s poškozením myokardu, jakým je nestabilní angina pectoris, kontuze srdce a transplantace srdce. Zvýšení bylo zaznamenáno i u pacientů s rabdomyolýzou a polymyozitidou. Podle doporučení od ESC a AHA/ACC a univerzální definice AIM jsou na odlišení akutního a chronického zvýšení ctn potřebné sériové odběry s detekcí nárůstu nebo poklesu koncentrace troponinu. Výsledky by měly 3 / 7

4 (high sensitive) být interpretované spolu s klinickým stavem pacienta, symptomy, anamnézou, EKG údaji a koncentracemi jiných biomarkerů. 9,16,27 Každá laboratoř by si měla prověřit převoditelnost očekávaných hodnot na svou populaci pacientů, a je-li to nutné, stanovit si vlastní referenční rozmezí. Specifické údaje o využití Údaje o využití, typické pro analyzátory, jsou uvedeny níže. Výsledky získané v různých laboratořích se mohou lišit. Preciznost Preciznost byla stanovena použitím reagencií Elecsys, vzorků a kontrol podle protokolu (EP5 A2) CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute): 2 série denně v duplikátech každý pro 21 dní (n = 84). Byly získány následující výsledky: Vzorek Analyzátory Elecsys 2010 a cobas e 411 Prům. Opakovatelnost Mezilehlá preciznost Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum PreciControl T PreciControl T Analyzátory MODULAR AALYTICS E170, cobas e 601 a cobas e 602 Vzorek Prům. Opakovatelnost Mezilehlá preciznost Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum PreciControl T PreciControl T Porovnání metod Porovnání stanovení Elecsys (analyzátor MODULAR AALYTICS E170; y) se stanovením Elecsys STAT (analyzátor Elecsys 2010; x) použitím klinických vzorků poskytlo následující korelace ( nebo pg/ml): Počet naměřených vzorků: 142 Passing/Bablok 67 Lineární regrese y = 0.99x y = 1.02x - 14 τ = r = Koncentrace vzorků byly v rozmezí přibl. 3 až Analytická specifičnost Stanovení Elecsys nevykazuje významnou křížovou reakci s následujícími sloučeninami (testováno s koncentracemi TnT přibl. 18 a 38 ; koncentrace křížově reagujících sloučenin 500 ng/ml): lidský troponin T kosterních svalů 0.003, lidský srdeční troponin I 0.2, lidský troponin kosterních svalů I 0.003, lidský troponin C < Diagnostická senzitivita a specifičnost a prospektivních studiích s pacienty s bolestí na hrudi, přijatých na pohotovost, se podílelo 1 klinické centrum v ěmecku, 1 v Indii, 1 ve Švýcarsku a 2 centra v USA. 507 pacientů bylo zahrnuto do výpočtu citlivosti a specifičnosti podle následujících kritérií: Bolest v hrudníku po > 20 minut, měřeno 12svodovým EKG, věk > 20 let, netěhotní, bez předchozího IM během posledních 3 týdnů před přijetím a minimálně 2 odběry krve. Pacienti byli diagnostikováni s akutním IM na základě: 1. kritérií WHO 59 včetně změn EKG, symptomů charakteristických pro AKS a zvýšeného srdečního troponinu a 2. kritérií definovaných výzkumní skupinou Joint ESC/ACCF/AHA/WHFESC/ACCF/AHA/WHF. 68 a specifičnost vypočítaná s AIM definovaným podle kritéria WHO Optimální cut-off na posouzení akutního infarktu myokardu pomocí koncentrace troponinu T byl vypočítaný ve studii s předchozí generací stanovení Elecsys Troponin T analýzou ROC na 0.1 µg/l (ng/ml) nebo a specifičnost při nejvyšších hodnotách troponinu T získaných stanovením Elecsys byly vypočítány při hodnotách cut off optimalizovaných ROC analýzou při 0.1 μg/l (ng/ml) nebo interval () 95 interval () 99 78/ / a specifičnost při 0.1 ng/ml (100 pg/ml) byly dále vypočítány pro stanovení Elecsys v různých časových intervalech od přijetí v nemocnici: Čas od přijetí (hodiny) 95 interval () 95 interval / / / / / / / / / / > / / a specifičnost vypočítaná s AIM definovaným dle směrnic ESC/ACCF/AHA/WHF Pacienti s AIM byly definováni obvyklými hodnotami srdečního troponinu nad kritériem 99. perc./10 a přítomností bolesti na hrudi nebo změnami EKG: a specifičnost nejvyššího troponinu T, vysoké hodnoty citlivosti byly vypočítány při 99. perc interval () () 95 interval () / / a specifičnost stanovení Elecsys byla vypočítána v různých hladinách troponinu T. Troponin T hs pg/ml LCI b) UCI c) LCI UCI / 7

5 (high sensitive) Troponin T hs pg/ml LCI b) UCI c) LCI UCI b) LCI = dolní interval c) UCI = horní interval a specifičnost při kritériu 99. perc. (stanovení Elecsys )/10 (stanovení Elecsys Troponin T, 4. gen.; 0.03 ng/ml) byly dále vypočítány v různých časových intervalech od přijetí v nemocnici: Čas od přijetí (hodiny) > 12 Generace testu Troponin T 95 interval () 95 interval () 4. gen / / / / gen / / / / gen / / / / gen / / / / gen / / / / gen / / / / Odkazy 1 Katus HA, Remppis A, Looser S, et al. Enzyme linked immunoassay of cardiac troponin T for the detection of acute myocardial infarction in patients. Mol Cell Cardiol 1989;21(12): Liebetrau C, Mollmann H, ef H, et al. Release kinetics of biomarkers in patients undergoing transcoronary ablation of septal hypertr0pphy. Clin Chem 2012;58(6): Katus HA, Scheffold T, Remppis A, et al. Proteins of the troponin complex. Laboratory Medicine 1992;23(5): Reichlin T, Hochholzer W, Bassetti S, et al. Early diagnosis of myocardial infarction with sensitive cardiac troponin assays. EJM 2009;361(9): Giannitsis E, Becker M, Kurz K, et al. High sensitivity cardiac troponin T for early prediction of evolving non-st segment elevation myocardial infarction in patients with suspected acute coronary syndrome and negative troponin result on presentation. Clin Chem 2010;56(4): Giannitsis E, Kurz K, Hallermayer K, et al. Analytical validation of a high-sensitivity cardiac troponin T assay. Clin Chem 2010;56(2): Hamm CW, Bassand JP, Agewall S, et al. ESC guidelines for the management of acute coronary syndrome in patients presenting without persistent ST-segment elevation. The Task Force for the management of acute coronary syndrome (ACS) in patient presenting without persistent ST-segment elevation of the European Society of Cardiology (ESC). Eur Heart J 2011;32(23): ICE (2014) Myocardial infarction (acute): Early rule out using highsensitivity troponin tests (Elecsys Troponin T high-sensitive, ARCHITECT STAT High Sensitive Troponin-I and AccuTnI+3 assays). ICE diagnostics guidance DG15. Available at [ICE guideline] 9 Roffi M, Patrono C, Collet JP, et al ESC guidelines for the management of acute coronary syndromes in patients presenting without persistent ST-segment elevation. Eur Heart J 2016;37(3): Bandstein, Ljung R, Johansson M, et al. Undetectable high sensitivity cardiac troponin T level in the emergency department and risk of myocardial infarction. J Am Coll Card 2014;63: Body R, Burrows G, Carley S, et al. High-sensitivity cardiac troponin T concentrations below the limit of detection to exclude acute myocardial infarction: A prospective evaluation. Clin Chem 2015;61(7): Rubini Gimenez M, Reichlin T, Zellweger C. Rapid rule out of acute myocardial infarction using undetectable levels of high-sensitivity cardiac troponin. Int J Cardiol 2013;168(4): Reichlin T, Schindler C, Drexler B, et al. One-hour rule-out and rule-in of acute myocardial Infarction using high-sensitivity cardiac troponin T. Arch Intern Med 2012;172(16): Reichlin T, Twerenbold R, Wildi K, et al. Prospective validation of a 1-hour algorithm to rule-out and rule-in acute myocardial infarction using a high-sensitivity cardiac troponin T assay. CMAJ 2015;187(8):E Mueller C, Giannitsis E, Christ M, et al. Multicenter evaluation of a 1halgorithm in the diagnosis of myocardial infarction using high-sensitivity Troponin T: Manuscript submitted for publication; Thygesen K, Alpert JS, Jaffe AS, et al. Third definition of myocardial infarction. Eur Heart J 2012;33(20): Aviles RJ, Askari AT, Lindahl B, et al. Troponin T levels in patients with acute coronary syndromes, with or without renal dysfunction. Engl J Med 2002;346: Lindahl B, Venge P, James S. The new high- sensitivity cardiac troponin T assay improves risk assessment in acute coronary syndromes. Am Heart J 2010;160: Haaf P, Reichlin T, Twerenbold R, et al. Risk stratification in patients with acute chest pain using three high-sensitivity cardiac troponin assays. Eur Heart J 2014;35(6): Bjurman C, Larsson M, Johanson P, et al. Small changes in troponin T levels are common in patients with on-st-elevation myocardial infarction and are linked to higher mortality. J Am Coll Cardiol 2014;62(14): Lindahl B, Venge P, Wallentin L. Troponin T Identifies Patients With Unstable Coronary Artery Disease Who Benefit From Long-Term Antithrombotic Protection. J Am Coll Cardiol 1997;29(1): Hamm CW, Heeschen C, Goldmann B, et al. Benefit of abciximab in patients with refractory unstable angina in relation to serum troponin T levels. Engl J Med 1999;340(21): Heeschen C, Hamm CW, Goldmann BU, et al. for PRISM study investigators. Troponin concentrations for stratification of patients with acute coronary syndromes in relation to therapeutic efficacy of tirofiban. Lancet 1999;354: Lindahl B, Diderholm E, Lagerquist B, et al. Effects on mortality of longterm treatment with l.m.w. heparin in relation to troponin T level and ECG findings - a FRISC 2 substudy. Eur Heart J 2000;21(Suppl.): ewby LK, Ohman EM, Christenson RH, et al. Benefit of Glycoprotein IIb/IIa Inhibition in Patients With Acute Coronary Syndromes and Troponin T-Positive Status: The PARAGO-B Troponin T Substudy. Circulation 2001;103: Wallentin L, Lindholm D, Siegbahn A, et al. Biomarkers in relation to the effects of Ticagrelor compared with clopidogrel in non-st-elevation acute coronary syndrome patients managed with or without in-hospital revascularization: a Substudy from the prospective randomized Platelet inhibition and Patient Outcomes (PLATO) Trial. Circulation 2014;129(3): Amsterdam EA, Wenger K, Brindis RG, et al AHA/ACC guideline for the management of patients with non-st elevation acute coronary syndromes: a report of the American College of Cardiology/American Heart Association Task Force on Practice Guidelines. Circulation 2014;130(25):e Reichlin T, Irfan A, Twerenbold R, et al. Utility of absolute and relative changes in cardiac troponin concentrations in the early diagnosis of acute myocardial infarction. Circulation 2011;124(2): / 7

6 (high sensitive) 29 Masson S, Anand I, Favero C, et al. Serial measurement of cardiac troponin T using a highly sensitive assay in patients with chronic heart failure: data from two large randomized clinical trials. Circulation 2012;125(2): ambi V, Liu X, Chambless LE, et al. Troponin T and -terminal pro- B type natriuretic peptide: a biomarker approach to predict heart failure risk: the Atherosclerosis Risk in Communities Study. Clin Chem 2013;59(12): Yancy CW, Jessup M, Bozkurt B, et al ACCF/AHA guideline for the management of heart failure: a report of the American College of Cardiology Foundation/American Heart Association Task Force on practice guidelines. Circulation 2013;128(16):e Cramer G, Bakker J, Gommans F, et al. Relation of highly sensitive cardiac troponin T in hypertrophic cardiomyopathy to left ventricular mass and cardiovasscular risk. Am J Cardiol. 2014;113(7): McGill D, Talaulikar G, Potter JM, et al. Over time, high-sensitivity TnT replaces T-proBP as the most powerful predictor of death in patients with dialysis-dependent chronic renal failure. Clin Chim Acta 2010;411(13-14): K/DOQI clinical practice guidelines for cardiovascular disease in dialysis patients. Am J Kidney Dis. 2005;45 (4 Suppl 3):S Artunc F, Mueller C, Breidhardt T, et al. Sensitive troponins- which suits better for hemodialysis patients? Associated factors and prediction for mortality.plos One. 2012;7(10):e Wolley M, Steward R, Curry E, et al. Variation in and prosgnostic importance of troponin T measured using a high-sensitivity assay in clinically stable haemodialysis patients. Clin Kidney J. 2013;6(4): Honneger Bloch S, Semple D, Sidhu K, et al. Prognostic value and long-term variation of high sensitivity troponin T in clinically stable haemodialysis patients. Z Med J. 2014;127(1402): Twerenbold R, Wildi K, Jeger C, et al. Optimal cutoff levels of more sensitive cardiac troponin assays for the early diagnosis of myocardial infarction in patients with renal dysfunction. Circulation 2015;131(23): Landeberg G, Jaffe AS, Gilon D, et al. Troponin elevation in severe sepsis and septic shock: the role of left ventricular dysfunction and right ventricular dilatation. Crit Care Med 2014;42(4): Hillis GS, Welsh P, Chalmers J, et al. The relative and combined ability of high sensitivity cardiac troponin T and -terminal pro-bp to predict cardiovascular events and death in patients with type 2 diabetes mellitus. Diabetes Care 2014;37(1): Everett BM, Brooks MM, Vlachos HE, et al. Troponin and cardiac events in stable ischemic heart disease and diabetes. Engl J Med. 2015;373(7): European patent application by F. Hoffmann-La Roche AG and Roche Diagnostics GmbH. Cardiac Troponin as an indicator of advanced coronary artery disease. 43 European patent application by F. Hoffmann-La Roche AG and Roche Diagnostics GmbH. Means and methods for the differentiation of acute and chronic myocardial necrosis in symptomatic patients. 44 Latini R, Masson S, Anand IS, et al. Prognostic Value of Very Low Plasma Concentrations of Troponin T in Patients with Stable Chronic Heart Failure. Circulation 2007;116: Omland T, de Lemos JA, Sabatine MS, et al. A sensitive cardiac troponin T assay in stable coronary artery disease. Engl J Med 2009;361: Latini R, Masson S, Pirelli S, et al. On the behalf of the GISSI-AF Investigators. Circulating cardiovascular biomarkers in recurrent atrial fibrillation: data from the GISSI-Atrial fibrillation trial. J Intern Med 2011;269(2): Lewandrowski K. Special topics: cardiac markers in myocarditis. Cardiac transplant rejection and conditions other than acute coronary syndrome. Clin Lab Med 2014;34: Swaanenburg JC, Klaase JM, DeJongste M, et al. Troponin I, troponin T, CK-MB-activity and CK-MB mass as markers for the detection of myocardial contusion in patients who experienced blunt trauma. Clin Chim Acta 1998;272: Bajaj A, Saleeb M, Rathor P, et al. Prognostic value of troponins in acute noninvasive pulmonary embolism. A meta-analysis. Heart Lung 2105;44(4): ewby LK, Rodriguez I, Finkle J, et al. Troponin measurements during drug development-considerations for monitoring and management of potential cardiotoxicity. An educational collaboration among the Cardiac Safety Research Consortium, the Duke Clinical Research Institute, and the US Food and Drug Administration. Am Heart J 2011;162(1): European patent by F Hoffmann-La Roche AG and Roche Diagnostics GmbH. Diagnosis of myocardial infarction and acute coronary syndrome by combination of markers. 52 European patent application by F. Hoffmann-La Roche AG and Roche Diagnostics GmbH. Means and methods for optimization of diagnostic and therapeutic approaches in chronic artery disease based on the detection of Troponin T and T-pro BP. 53 Bosselmann H, Egstrup M, Rossing K, et al. Prognostic significance of cardiovascular biomarkers and renal dysfunction in outpatients with systolic heart failure: a long term follow-up study Int J Cardiol 2013;170(2): Dubin RF, Li Y, He J, et al. Predictors of high sensitivity cardiac troponin T in chronic kidney disease patients: a cross-sectional study in the chronic renal insufficiency cohort (CRIC). BMC ephrol 2013;14(1): Davis GK, Labugger R, Van Eyk JE, et al. Cardiac troponin T is not detected in western blots of diseased renal tissue. Clin Chem 2001;47(4): Ricchiuti V, Voss EM, ey A, et al. Cardiac Troponin T isoforms expressed in renal diseased skeletal muscle will not cause false positive results by the second generation ctnt assay by Boehringer Mannheim; Clin Chem 1998;44(9): Hallermayer K, Klenner D, Vogel R. Use of recombinant human cardiac troponin T for standardization of third generation troponin T methods. Scand J Clin Invest 1999;59(Suppl 230): Saenger AK, Beyrau R, Braun S, et al. Multicenter analytical evaluation of a high-sensitivity troponin T assay. Clin Chim Acta 2011;412(9-10): World Health Organization. Report of the Joint International Society and Federation of Cardiology/World Health Organization Task Force on Standardization of Clinical omenclature. omenclature and criteria for diagnosis of ischemic heart disease. Circulation 1979;59: Müller-Bardorff M, Hallermayer K, Schröder A, et al. Improved troponin T ELISA specific for cardiac troponin T isoform: assay development and analytical validation. Clin Chem 1997;43(3): Klein G, Kampmann M, Baum H, et al. Clinical performance of the new cardiac markers troponin T and CK-MB on the Elecsys A multicenter evaluation. Wien Klin Wochenschr. 1998;110(Suppl3): Mendis S, Thygesen K, Kuulasmaa K, et al. World Health Organization definition of myocardial infarction: revision. Int J Epidemiol 2011;40(1): Ferjani M, Droc G, Dreux S, et al. Circulating cardiac troponin T in myocardial contusion. Chest 1997;111(2): Erbel C, Taskin R, Doesch A, et al. High-sensitive troponin T measurements early after heart transplantation predict short- and longterm survival. Transpl Int 2013;26(3): Li SF, Zapata J, Tillem E. The prevalence of false-positive cardiac troponin I in ED patients with rhabdomyolysis. Am J Emerg Med 2005;23(7): Zhang L, Wang GC, Ma L, et al. Cardiac involvement in adult polymyositis or dermatomyositis: a systematic review Clin Cardiol 2012;35(11): / 7

7 (high sensitive) 67 Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 1988 ov;26(11): The Task Force for the diagnosis and Treatment of on-st-segment Elevation Acute Coronary Syndromes of the European Society of Cardiology. Guidelines for the diagnosis and treatment of non-st elevation acute coronary syndromes. European Heart Journal 2007;28: Pro více informací čtěte prosím příslušný návod k použití daného analyzátoru, jednotlivé aplikační listy, informace o produktu a metodické listy všech potřebných komponent (jsou-li dostupné ve Vaší zemi). Tečka se v tomto metodickém listu vždy používá jako desetinný oddělovač k označení hranice mezi celými a desetinnými místy desetinného čísla. Oddělení tisíců se nepoužívá. Symboly Roche Diagnostics používá kromě symbolů a znaků uvedených v normě ISO následující znaky: GTI Obsah soupravy Analyzátory/přístroje, na kterých lze reagencie použít Reagencie Kalibrátor Objem po rekonstituci nebo promíchání Globální číslo obchodní položky Doplnění, odstranění nebo změny textu jsou označeny pruhem podél textu. 2016, Roche Diagnostics Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D Mannheim 7 / 7