Informace pro objednání 03183742 122 α Amylase EPS ver.2 (300 testů) Systémové ID 07 6609 7 10759350 190 Calibrator f.a.s. (12 x 3 ml) Kód 401 10759350 360 Calibrator f.a.s. (12 x 3 ml, pro USA) Kód 401 12149435 122 Precinorm U plus (10 x 3 ml) Kód 300 12149435 160 Precinorm U plus (10 x 3 ml, pro USA) Kód 300 12149443 122 Precipath U plus (10 x 3 ml) Kód 301 12149443 160 Precipath U plus (10 x 3 ml, pro USA) Kód 301 10171743 122 Precinorm U (20 x 5 ml) Kód 300 10171735 122 Precinorm U (4 5 ml) Kód 300 10171778 122 Precipath U (20 x 5 ml) Kód 301 10171760 122 Precipath U (4 5 ml) Kód 301 05117003 190 PreciControl ClinChem Multi 1 (20 x 5 ml) Kód 391 05947626 190 PreciControl ClinChem Multi 1 (4 x 5 ml) Kód 391 05947626 160 PreciControl ClinChem Multi 1 (4 5 ml, pro USA) Kód 391 05117216 190 PreciControl ClinChem Multi 2 (20 x 5 ml) Kód 392 05947774 190 PreciControl ClinChem Multi 2 (4 x 5 ml) Kód 392 05947774 160 PreciControl ClinChem Multi 2 (4 5 ml, pro USA) Kód 392 04489357 190 Diluent NaCl 9 (50 ml) Systémové ID 07 6869 3 Analyzátory, na kterých lze cobas c pack(y) použít Roche/Hitachi cobas c 311, cobas c 501/502 Česky Systémové informace Pro analyzátory cobas c 311/501: : ACN 570 SAMY2: ACN 566 (STAT, reakční čas: 7) Pro analyzátor cobas c 502: : ACN 8570 SAMY2: ACN 8566 (STAT, reakční čas: 7) Použití In vitro test pro kvantitativní měření α amylázy v lidském séru, plazmě a moči na systémech Roche/Hitachi cobas c. Souhrn 1,2,3,4,5,6,7,8,9 α amylázy (1,4 α D glukanohydrolázy, EC 3.2.1.1) katalyzují hydrolytický rozklad polymerických uhlovodíků, jako je amylóza, amylopektin a glykogen štěpením 1,4 α glykosidických vazeb. Glykosidické vazby polysacharidů a oligosacharidů jsou většinou hydrolyzovány souběžně. Maltotrióza, nejmenší jednotka, je konvertována na maltózu a glukózu, ale velmi pomalu. Rozlišují se 2 typy α amyláz: pankreatická (P typ) a ze slinných žláz (S typ). Zatímco P typ můžeme přiřadit jednoznačně ke slinivce a je tedy orgánově specifický, S typ může pocházet z různých míst. Vedle slinných žláz je možné se s ním setkat ve slzách, potu, lidském mléce, plodové vodě, plicích, varlatech a epitelu vejcovodů. Jelikož specifické klinické symptomy pankreatických onemocnění jsou omezené, má stanovení α amylázy důležitou úlohu při jejich diagnostice. Proto je především užívána pro diagnostiku a monitorování akutní pankreatitidy. Hyperamylasémie se nevztahuje jen na akutní pankreatitidu nebo zánětlivou fázi chronické pankreatitidy, ale vyskytuje se rovněž ve spojitosti s renálním selháním (omezená glomerulární filtrace), nádory na plicích, vaječnících, při plicních chorobách, onemocnění slinných žláz, diabetické ketoacidóze, cerebrálním traumatu, při chirurgických zásazích nebo v případech makroamylasémie. Specifičnost pro pankreas doporučujeme potvrdit doplňujícím vyšetřením specifického enzymu pro pankreas lipázy nebo pankreatické α amylázy. Pro stanovení α amylázy bylo popsáno mnoho metod. Jejich základem bylo stanovení poklesu substrátu měřením viskozity, turbidimetricky, nefelometricky a amyloklasticky nebo měřením degradačních produktů vznikajících sacharogenním nebo kinetickým způsobem, v enzymy katalyzovaných reakcích. Zde popisovaná kinetická metoda je založena na úplném rozštěpení 4,6 etyliden (G 7 ) 1,4 nitrofenyl (G 1 ) α,d maltoheptaosidu (Ethylidene Protected Substrate = EPS) α amylázou a následné hydrolýze všech degradačních produktů na p nitrofenol s pomocí α glukosidázy (100 uvolnění chromoforu). Výsledky této metody korelují s výsledky naměřenými na HPLC. Toto stanovení se drží doporučení IFCC, bylo ale optimalizováno pro využitelnost a stabilitu. Princip testu 10,11 Enzymatické fotometrické stanovení dle IFCC. Definované oligosacharidy jako 4,6 etyliden (G 7 ) p nitrofenyl (G 1 ) α D maltoheptaosid (etyliden G 7 PNP) jsou štěpeny katalytickým účinkem α amyláz. G 2 PNP, G 3 PNP a G 4 PNP fragmenty, takto vytvořené, jsou úplně hydrolyzovány na p nitrofenol a glukózu α glukosidázou. Zjednodušené schéma reakce: 5 ethyliden G 7 PNP a) + 5 H 2 O 2 G 2 PNP + 2 G 3 PNP + G 4 PNP + 14 H 2 O a) PNP p nitrofenol α amyláza 2 etyliden G 5 + 2 G 2 PNP + 2 etyliden G 4 + 2 G 3 PNP + etyliden G 3 + G 4 PNP α glukosidáza 5 PNP + 14 G b) b) G Glukóza Intenzita zabarvení uvolňovaného p nitrofenolu je přímo úměrná aktivitě α amylázy. Stanovuje se měřením nárůstu absorbance. Reagencie - pracovní roztoky R1 R2 HEPES: 52.4 mmol/l; chlorid sodný: 87 mmol/l; chlorid vápenatý: 0.08 mmol/l; chlorid hořečnatý: 12.6 mmol/l; α glukosidáza (mikrobiální): 66.8 µkat/l; ph 7.0 (37 C); stabilizátory; konzervans HEPES: 52.4 mmol/l; ethliden G 7 PNP: 22 mmol/l; ph 7.0 (37 C); stabilizátory, konzervans R1 je v pozici B a R2 je v pozici C. 1 / 5
Bezpečnostní opatření a varování Pro diagnostické použití in vitro. Dodržujte běžná bezpečnostní opatření nutná pro nakládání se všemi reagenciemi. Likvidace všech odpadních materiálů musí probíhat v souladu s místními předpisy. Bezpečnostní listy jsou pro odborné uživatele dostupné na vyžádání. Pro USA: Varování: Federální zákon omezuje prodej tohoto přístroje pouze lékařem nebo na jeho pokyn. Zacházení s reagenciemi Připravena k použití Uskladnění a stabilita Doba skladování při 2 8 C: V analyzátoru při použití a v chlazeném prostoru analyzátoru: Diluent NaCl 9 Doba skladování při 2 8 C: V analyzátoru při použití a v chlazeném prostoru analyzátoru: Čtěte datum exspirace na štítku cobas c packu. 12 týdnů Čtěte datum exspirace na štítku cobas c packu. 12 týdnů Odběr vzorků a příprava 9,12 Pro odběr a přípravu vzorků používejte pouze vhodné zkumavky nebo odběrové nádobky. Pouze níže uvedené vzorky byly testované a jsou přijatelné. Sérum Plazma: Li heparinizovaná plazma. Uvedené druhy vzorků byly testované s vybranými typy odběrových zkumavek, které byly komerčně dostupné v té době, tzn., že do testu nebyly zařazené všechny typy zkumavek všech výrobců. Systémy odběru vzorků různých výrobců mohou obsahovat různé materiály, které mohou mít v některých případech zásadní vliv na výsledky. Při zpracování vzorků v primárních zkumavkách (systémy odběru vzorků) dodržujte pokyny jejich výrobce. Vzorky obsahující precipitáty centrifugujte před provedením stanovení. Pro podrobnosti o možné interferenci čtěte část Omezení a interference. Požadavky na stabilitu vzorku byly výrobcem ustanoveny experimentálními údaji nebo na základě referenční literatury a pouze pro teploty/časové rámce uvedené v metodickém listu. Je zodpovědností jednotlivých laboratoří používat všechny dostupné odkazy anebo vlastní studie ke stanovení specifických kritérií stability pro své laboratoře. : Odběr moči bez aditiv. α Amyláza je nestabilní v kyselé moči. Neprodleně zpracujte nebo před skladováním alkalizujte ph (těsně nad ph 7). 13 Stabilita v séru nebo plazmě: 13 7 dní při 15 25 C 1 měsíc při 2 8 C Stabilita v moči: 14 2 dny při 15 25 C 10 dní při 2 8 C Dodávaný materiál Reagencie jsou uvedeny v části "Reagencie - pracovní roztoky". Potřebný materiál (ale nedodávaný se soupravou) Viz část "Informace pro objednání" Celkové vybavení laboratoře Stanovení Optimálního využití stanovení dosáhnete, budete-li dodržovat pokyny uvedené v dokumentaci pro příslušný analyzátor. Pokyny ke stanovení specifické pro analyzátor vyhledejte v příslušném návodu k použití. Provádění aplikací, které nejsou schváleny Roche, je bez záruky a musí být definováno uživatelem. Aplikace pro sérum, plazmu a moč Definice testu cobas c 311 10 / 22 32 (STAT 7/ 22 32) Zvýšené 4 µl Definice testu cobas c 501 10 / 30 47 (STAT 7 / 30 47) Zvýšené 4 µl Definice testu cobas c 502 10 / 30 47 (STAT 7 / 30 47) Zvýšené 8 µl 2 / 5
Kalibrace Kalibrátory Mód kalibrace Frekvence kalibrace S1: H 2 O S2: C.f.a.s. Linear 2bodová kalibrace po změně šarže reagencií jestliže to vyžaduje proces kontroly kvality Kalibrační interval lze po přijatelné verifikaci kalibrace laboratoří prodloužit. Návaznost: Tato metoda byla standardizovaná podle reagencií Roche pomocí kalibrovaných pipet na manuálním fotometru, stanovením absolutních hodnot a specifické absorptivity substrátu, ε. Kontrola kvality Ke kontrole kvality použijte kontrolní materiály uvedené v části "Informace pro objednání". Navíc lze použít i jiný vhodný kontrolní materiál. Kontrolní intervaly a meze by měly být uzpůsobeny pro každou laboratoř dle individuálních požadavků. Naměřené hodnoty by se měly pohybovat v definovaných mezích. Každá laboratoř by měla mít vypracovaná nápravná opatření pro případ, že hodnoty překročí definované meze. Sledujte příslušná vládní nařízení a lokální směrnice kontroly kvality. Výpočet Systémy Roche/Hitachi cobas c automaticky vypočítá aktivitu analytu každého vzorku. Převodní faktor: U/L x 0.0167 = µkat/l Omezení - interference Lehká změna žlutého zabarvení roztoku 2 neinterferuje s využitím testu. Nepipetujte ústy a zajistěte, aby reagencie nepřišly do styku s pokožkou. Sliny a pot obsahují α amylázu! Kritérium: Výtěžnost v rámci ± 10 počáteční hodnoty při aktivitě amylázy 100 U/L (1.67 µkat/l). Ikterus: 15 Bez významných interferencí do hodnoty I indexu 60 pro konjugovaný a nekonjugovaný bilirubin (přibližná koncentrace konjugovaného a nekonjugovaného bilirubinu: 1026 µmol/l nebo 60 mg/dl). Hemolýza: 15 Bez významných interferencí do hodnoty H indexu 500 (přibližná koncentrace hemoglobinu: 311 µmol/l nebo 500 mg/dl). Lipémie (Intralipid): 15 Bez významných interferencí do hodnoty L indexu 1500. Mezi L indexem (odpovídá zákalu) a koncentrací triglyceridů je slabá korelace. Ve vzácných případech mohou vzorky s kombinací zvýšeného zákalu (L index) a vysoké aktivity amylázy způsobit označení >React nebo >Abs. Silně zakalené a výrazně lipemické vzorky mohou být označeny Abs. Antikoagulanty: Prokázána interference s citrátem, fluoridem a EDTA. 12 Glukóza: Bez významných interferencí glukózy až do koncentrace 111 mmol/l (2000 mg/dl). O přibližně 10 vyšší výtěžnost byla zjištěna při koncentracích glukózy 250 mmol/l (4500 mg/dl). K. askorbová: Bez významných interferencí kyseliny askorbové až do koncentrace 5.68 mmol/l (100 mg/dl). Léčiva: Při terapeutických koncentracích nebyla při použití běžných panelů léků zjištěná žádná interference. 16,17 Výjimka: Léčiva na základě icodextrinu mohou vést ke sníženým výsledkům amylázy. 18 Ve vzácných případech může gamapatie, především u typu IgM (Waldenströmova makroglobulinémie), způsobit nespolehlivé výsledky. 19 Hemolýza: 15 Bez významných interferencí do koncentrace hemoglobinu 311 µmol/l nebo 500 mg/dl. K. askorbová: Bez významných interferencí kyseliny askorbové až do koncentrace 2.27 mmol/l (40 mg/dl). O přibližně 15 nižší výtěžnost byla zjištěna při koncentracích kyseliny askorbové 22.7 mmol/l (400 mg/dl). Fosfát: Bez významných interferencí fosfátu až do koncentrace 70 mmol/l (217 mg/dl). ovina: Bez významných interferencí močoviny až do koncentrace 2100 mmol/l (12612 mg/dl). Léčiva: Při terapeutických koncentracích nebyla při použití běžných panelů léků zjištěná žádná interference. 17 Pro diagnostické účely je vždy nezbytné používat výsledky ve spojení s anamnestickými údaji pacienta, klinickým vyšetřením a jinými nálezy. POTŘEBNÝ KROK Programování speciálního mytí: Při zpracovávání určitých kombinací testů na systémech Roche/Hitachi cobas c je použití speciálních mycích cyklů povinné. Nejnovější verzi seznamu zamezení přenosu mezi vzorky (carry over) lze rovněž nalézt v metodických listech NaOHD-SMS- SmpCln1+2-SCCS. Pro další pokyny čtěte uživatelskou příručku. Analyzátor cobas c 502: Veškeré programování speciálního mytí nezbytné pro zamezení carry over je dostupné přes cobas link, ruční zadávání je potřebné v některých případech. Tam, kde se to vyžaduje, musí být před vykazováním výsledků provedeno programování speciálního mytí/zamezení přenosu mezi vzorky. Meze a rozmezí Měřící rozsah /moč 3 1500 U/L (0.05 25.0 µkat/l) Vzorky s vyšší aktivitou stanovte pomocí funkce rerun. Vzorky nařeďte 1:5 pomocí funkce rerun. Výsledky ze vzorků naředěných funkcí rerun jsou automaticky vynásobené faktorem 5. Dolní meze měření Mez detekce testu 3 U/L (0.05 µkat/l) Mez detekce představuje nejnižší měřitelnou hladinu analytu, kterou lze odlišit od nuly. Počítá se jako hodnota ležící 3 standardní odchylky nad nejnižším standardem (standard 1 + 3, opakovatelnost, n = 21). Očekávané hodnoty 9 Muži/ženy 0.47 1.67 µkat/l 28 100 U/L Spontánně vyloučená moč poměr α amyláza/ kreatinin Muži Ženy Muži Ženy 0.27 8.20 µkat/l 0.35 7.46 µkat/l 0.97 4.73 µkat/g 1.25 6.51 µkat/g 16 491 U/L 21 447 U/L 58 283 U/g 75 390 U/g poměr α amyláza/kreatinin Kvůli potlačení vlivu odchylek aktivity α amylázy v moči je vhodné stanovovat poměr α amylázy/kreatinin. K tomu je potřeba změřit aktivitu α amylázy a koncentraci kreatininu ve vzorku spontánně odebrané moče. Poměr [U/g nebo µkat/mmol] = α amyláza [U/L nebo µkat/l] kreatinin [g/l nebo mmol/l] Poměr clearence amyláza/kreatinin (ACCR) 13 ACCR je vypočítáno na základě aktivity amylázy a koncentrace kreatininu. Oba vzorky, sérum i moč, musí být odebrány ve stejnou dobu. ACCR [] = Amyláza v moči [U/L] x kreatinin v séru [mg/l] 100 Amyláza v séru [U/L] x kreatinin v moči [mg/l] ACCR se rovná přibližně 2 5. Každá laboratoř by si měla prověřit převoditelnost očekávaných hodnot na svou populaci pacientů, a je-li to nutné, stanovit si vlastní referenční rozmezí. Specifické údaje o využití Údaje o využití, typické pro analyzátory, jsou uvedeny níže. Výsledky získané v různých laboratořích se mohou lišit. 3 / 5
Preciznost Preciznost byla stanovená použitím lidských vzorků a kontrol podle interního protokolu s opakovatelností (n = 21) a mezilehlou precizností (3 alikvoty na sérii, 1 série denně, 21 dní). Získané byly následující výsledky: Opakovatelnost Precinorm U 83.2 (1.39) 0.8 (0.01) 0.9 Precipath U 182 (3.09) 1 (0.02) 0.6 Lidské sérum 1 34.5 (0.576) 0.4 (0.007) 1.2 Lidské sérum 2 97.9 (1.63) 0.7 (0.01) 0.7 Mezilehlá preciznost Precinorm U 84.0 (1.40) 1.1 (0.02) 1.3 Precipath U 184 (3.08) 3 (0.05) 1.5 Lidské sérum 3 35.1 (0.586) 0.9 (0.015) 2.4 Lidské sérum 4 98.9 (1.65) 1.6 (0.03) 1.6 Opakovatelnost Hladina kontroly 1 50.6 (0.845) 0.5 (0.008) 0.9 Hladina kontroly 2 164 (2.74) 1 (0.02) 0.6 1 21.4 (0.357) 0.2 (0.003) 1.1 2 68.5 (1.14) 0.7 (0.01) 0.9 Mezilehlá preciznost Hladina kontroly 1 51.8 (0.865) 0.9 (0.015) 1.7 Hladina kontroly 2 168 (2.81) 2 (0.03) 1.1 3 24.5 (0.409) 0.5 (0.008) 1.9 4 67.0 (1.12) 2.8 (0.05) 4.2 Porovnání metod Hodnoty amylázy pro vzorky lidského séra, plazmy a moči, získané na analyzátoru Roche/Hitachi cobas c 501 (y), byly porovnané s hodnotami stanovenými použitím odpovídající reagencie na analyzátoru Roche/Hitachi 917 (x). Počet vzorků (n) = 79 Passing/Bablok 20 y = 0.999x + 2.83 U/L Lineární regrese τ = 0.969 r = 0.998 y = 0.998x + 4.75 U/L Aktivity vzorků byly v rozmezí 51.7 až 1409 U/L (0.863 až 23.5 µkat/l). Počet vzorků (n) = 88 Passing/Bablok 20 y = 0.986x + 0.423 U/L Lineární regrese τ = 0.987 r = 1.000 y = 0.982x + 2.03 U/L Aktivity vzorků byly v rozmezí 33.6 až 1248 U/L (0.561 až 20.8 µkat/l). Odkazy 1 Greiling H, Gressner AM, eds. Lehrbuch der Klinischen Chemie und Pathobiochemie, 3rd ed. Stuttgart/New York: Schattauer Verlag 1995. 2 Keller H, ed. Klinisch-chemische Labordiagnostik für die Praxis, 2nd ed. Stuttgart/New York: Georg Thieme Verlag 1991:354-361. 3 Salt WB II, Schenker S. Amylase - its clinical significance: a review of the literature [Review]. Medicine 1976;55:269-281. 4 Steinberg WM, Goldstein SS, Davies ND, et al. Diagnostic assays in acute pancreatitis [Review]. Ann Intern Med 1985;102:576-580. 5 Tietz NW, Huang WY, Rauh DF, et al. Laboratory tests in the differential diagnosis of hyperamylasemia. Clin Chem 1986;32(2):301-307. 6 Junge W, Troge B, Klein G, et al. Evaluation of a New Assay for Pancreatic Amylase: Performance Characteristics and Estimation of Reference Intervals. Clin Biochem 1989;22:109-114. 7 Rauscher E, von Bülow S, Hägele EO, et al. Ethylidene protected substrate for the assay of human α-amylase. Fresenius Z Anal Chem 1986;324:304-305. 8 Kruse-Jarres JD, Hafkenscheid JCM, Hohenwallner W, et al. Evaluation of a New α-amylase Assay Using 4,6-Ethylidene- (G7)-1-4-nitrophenyl-(G1)-α-D-maltoheptaoside as Substrate. J Clin Chem Clin Biochem 1989;27:103-113. 9 Junge W, Wortmann W, Wilke B, et al. Development and evaluation of assays for the determination of total and pancreatic amylase at 37 C according to the principle recommended by the IFCC. Clin Biochem 2001;34:607-615. Erratum Clin Biochem 2003;36:161. 10 Lorentz K. Approved recommendation on IFCC methods for the measurement of catalytic concentration of enzymes. Part 9. IFCC Method for α-amylase. (1,4-α-D-Glucan 4-Glucanohydrolase, EC 3.2.1.1). Clin Chem Lab Med 1998;36(3):185-203. 11 Kurrle-Weitenhiller A, Hölzel W, Engel D, et al. Method for the determination of total and pancreatic α-amylase based on 100 cleavage of the protected substrate ethylidene-4-nitrophenylmaltoheptaoside. Clin Chem 1996;42(S6):98. 12 Young DS. Effects of Preclinical Variables on Clinical Laboratory Tests. AACC Press 1997, 2nd edition 1997. 13 Tietz NW, ed. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. Philadelphia PA: WB Saunders Company 1995;46-51. 14 Hohenwallner W, Hägele EO, Scholer A, et al. Bestimmung von alpha- Amylase mit p-nitrophenylmaltoheptaosid als Substrat. Ber Öster Ges Klin Chem 1983;6:101-112. 15 Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical Comparisons of Interferences in Clinical Chemistry Instrumentation. Clin Chem 1986;32:470-475. 16 Breuer J. Report on the Symposium Drug effects in Clinical Chemistry Methods. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1996;34:385-386. 17 Sonntag O, Scholer A. Drug interference in clinical chemistry: recommendation of drugs and their concentrations to be used in drug interference studies. Ann Clin Biochem 2001;38:376-385. 18 Gokal R, Moberly J, Lindholm B, et al. Metabolic and laboratory effects of icodextrin. Kidney Int 2002;62(81):62-71. 19 Bakker AJ, Mücke M. Gammopathy interference in clinical chemistry assays: mechanisms, detection and prevention. Clin Chem Lab Med 2007;45(9):1240-1243. 20 Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11):783-790. Tečka se v tomto metodickém listu vždy používá jako desetinný oddělovač k označení hranice mezi celými a desetinnými místy desetinného čísla. Oddělení tisíců se nepoužívá. Symboly Roche Diagnostics používá kromě symbolů a znaků uvedených v normě ISO 15223 1 následující znaky (pro USA: pro definici použitých symbolů navštivte stránku https://usdiagnostics.roche.com): Obsah soupravy Objem po rekonstituci nebo promíchání 4 / 5
GTIN Globální číslo obchodní položky Doplnění, odstranění nebo změny textu jsou označeny pruhem podél textu. 2018, Roche Diagnostics Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D-68305 Mannheim www.roche.com Distribuce v USA: Roche Diagnostics, Indianpolis, IN Zákaznická podpora v 1-800-428-2336 5 / 5