Sekreční karcinom slinných žláz: využití genomového profilování v personalizaci onkologické léčby: analýza 49 případů sekvenováním nové generace (NGS)

Transkript

1 Sekreční karcinom slinných žláz: využití genomového profilování v personalizaci onkologické léčby: analýza 49 případů sekvenováním nové generace (NGS) Skálová A, Santana T, Baněčková M, Vaněček T, Michal M. Bioptická laboratoř s.r.o. a Šiklův ústav patologie Lékařské fakulty UK v Plzni 25. SJEZD ČESKÝCH A SLOVENSKÝCH PATOLOGŮ, listopadu 2018, Mikulov, hotel Galant

2 WHO 2017; klasifikace nádorů hlavy a krku, 4.ed.

3 Sekreční karcinom slinných žláz Mammary Analogue Secretory Carcinoma (MASC)

4 Sekreční karcinom slinných žláz, MASC

5 Low-grade vesikulární jádra, centrálně lokalizovaná distinktní jadérka, eosinofilní cytoplasma, hojný sekret

6 Sekreční karcinom (SC) low-grade karcinom slinných žláz, charakterizovaný ve většině případů translokací t(12;15)(p13;q25) s genovou fúzi ETV6-NTRK3 Morfologie a imunoprofil CK7/S-100/SOX10 protein, mammaglobin-pozitivní, a p63/dog1 negativní shodné se sekrečním karcinomem prsu přítomnost t(12;15) nebyla dosud popsána v žádném jiném karcinomu slinných žláz nebo prsu

7 Translokace t(12;15) (p13;q25)s fúzí ETV6-NTRK3 Sekreční (juvenilní) karcinom prsu o Tognonet al. ExpressionoftheETV6-NTRK3 gene fusionas a primaryevent in human breast secretory carcinoma. Cancer Cell 2002:2: kongenitální fibrosarkom, kongenitální mesoblastický nefrom, varianty of AML, a další hematologické malignity ALK-negativní IMT o Alassiri, et al. Am J Surg Pathol 2016;40: Podtyp papilárního karcinomu štítné žlázy, tzv. černobylský karcinom o Leeman-Neil, et al. Cancer 2014;120: Podtyp papilokarcinomů ŠŽ bez radiace SC kůže, štítné žlázy, nosní sliznice, plic atd

8 Analýza ETV6 zlomu pomocí FISH FISH analysis of ETV6 gene (12p13) using break apart rearrangement probe - Vysis ETV6 Break Apart FISH Probe Kit (Abbott Molecular) in FFPE tissue. Nuclei with one fusion (yellow), one orange, and one green (split) signal pattern indicative of a rearrangement ofonecopyoftheetv6generegion.

9 Sekreční karcinom (SC) low-grade karcinom slinných žláz, charakterizovaný ve většině případů translokací t(12;15)(p13;q25) s genovou fúzi ETV6-NTRK3 Vzácně případy SC se zlomem v ETV6 genu, ale bez klasické translokace t(12;15)(p13;q25)v RT-PCR Sekvenačníanalýza SC ETV6-NTRK3 fúzní transkript

10 Sekreční karcinom s ETV6-X fúzí

11 Design a metodika Z registru nádorů Šiklova ústavu patologie LFUK a Bioptické laboratoře v Plzni, čítajícího více než nádorů slinných žláz Vybráno 49 případů SC, které byly dále analyzovány metodou sekvenování nové generace (NGS) za použití Fusion Plex Solid Tumor kit (ArcherDX) Identifikované genetické fúze byly dále potvrzeny metodami fluorescenční in situ hybridizace (FISH) break apart sondami pro ETV6 a NTRK3 geny a metodou reverzní transkripční polymerázové řetězové reakce (PCR) k průkazu translokace t(12;15) s ETV6-NTRK3 genovou fúzí

12 Výsledky-klinicko-patologické nálezy Ze 49 případů, 37 (76%) se nacházelo v příušní slinné žláze, 7 (14%) v podčelistní žláze, 2 (4%) v malých slinných žlázách, 1 (2%) v nosní sliznici, 1 (2%) v kůži tváře a 1 (2%) ve štítné žláze V souboru pacientů převažovali muži (27/55%) Věk v době diagnózy se pohyboval od 15 do 80 let (medián 49,9 let)

13 Výsledky molekulární analýzy 49 případů SC metodou NGS 38 případů SC (78%) vykazovalo klasickou ETV6-NTRK3 fúzi 9 případů (18%) bylo ETV6-NTRK3 negativních a 2 případy (4%) byly neanalyzovatelné 8 krát- byla prokázána ETV6-RET fúze 1krát-simultánní duální fúzní transkript ETV6- NTRK3 a MYB-SMR3B 1krát- nový fúzní gen VIM-RET

14 Sekreční karcinom s ETV6-RET fúzí

15 Nové fúzní geny u 2 případů SC, zjištěné pomocí NGS simultánní přítomnost ETV6-NTRK3 a MYB-SMR3B fúzních genů v jednom SC podčelistní žlázy s high grade transformací Sekreční karcinom submandibulární žlázy 56-letého muže Recidivující high-grade SC s metastázou v cervikální lymfatické uzlině ETV6 exon 5 andntrk3 exon 15;separate fusion between ETV6 exon2and MAML3 exon 2

16 Sekreční karcinom HG submandibulární žlázy 56-letého muže ETV6-NTRK3, MYB-SMR3B

17 SC s HG transformací a s duální ETV6-NTRK3, MYB-SMR3B S100 protein mamaglobin

18 Nové fúzní geny u 2 případů SC, zjištěné pomocí NGS V jediném případu SC, který byl současně negativní na ETV6-NTRK3 i ETV6-RET jsme pomocí NGS identifikovali nový fúzní gen VIM-RET Sekreční karcinom parotis 56-leté ženy typické morfologie Imunoprofil typický CK7/S100protein/mamaglobin pozitivní a DOG1/p63 negativní Intaktní ETV6 u SC je kontroverzní téma

19 Sekreční karcinom parotis u 56-leté ženy s VIM-RET fúzí na NGS CK7/S100protein/mamaglobin pozitivní a DOG1/p63 negativní

20 Léčba a prognóza sekrečního karcinomu Léčba ve většině případů chirurgická; excizeresekce-disekce krčních uzlin adjuvantní radioterapie-systémová chemoterapie U pacientů s lokálně pokročilým a generalizovaným SC-léčba paliativní Průkaz ETV6-NTRK3 translokace-použití pantrk inhibitorů, např. Entrectinib(Ignyta) Průkaz ETV6-RET použití RET inhibitorů, např. RXDX105; LOXO 292 Drilon et al. What hides behind MASC: Ann Oncol 2016;27:920-6

21 Sekreční karcinom s high grade transformací

22 Závěry byla objevena nová VIM-RET fúzní varianta SC příušní žlázy, Druhým novým nálezem je simultánní duální výskyt dvou odlišných fúzí ETV6-NTRK3 a MYB-SMR3B u pacienta s agresivním SC submandibulární žlázy rozšířené spektrum molekulárních aberací SC přináší nový pohled na onkogenezi, histopatologii a molekulární diagnostiku této nově popsané nádorové jednotky potenciální cíl biologické léčby panntrk a/nebo RET-inhibitory

23 Děkuji za pozornost 25. SJEZD ČESKÝCH A SLOVENSKÝCH PATOLOGŮ, listopadu 2018, Mikulov, hotel Galant