Bioptická laboratoř s.r.o. a Šiklův ústav patologie Lékařské fakulty UK v Plzni

Transkript

1 Genové fúze NCOA4-RET a TRIM27- RETdiferencují intraduktální karcinom slinných žláz na duktální a apokrinní podtyp: analýza 18 případů pomocí sekvenování nové generace (NGS) Skálová A, Baněčková M, Martínek P, Michal M. Bioptická laboratoř s.r.o. a Šiklův ústav patologie Lékařské fakulty UK v Plzni 25. SJEZD ČESKÝCH A SLOVENSKÝCH PATOLOGŮ, listopadu 2018, Mikulov, hotel Galant

2 Intraduktálníkarcinom Intraduktální karcinom (IC) je dle WHO 2017 nové označení pro karcinomy dříve nazývané "low-grade kribriformní cystadenokarcinom" a "low-grade salivární duktální karcinom Vztah mezi IC a salivárním duktálním karcinomem (SDC)je kontroverzní odlišné nádorové jednotky

3 Intraduktálníkarcinom IC je vzácná low-grade malignita slinných žláz s rysy napodobujícími atypickou duktální hyperplázii prsu nebo duktální in situ karcinom Imunoprofil: difuzní pozitivita CK7/S100 proteinu/sox10 a mammaglobinu intaktní myoepiteliální vrstva kolem proliferujících epitelových struktur pozitivita myepitelií- např. p63 proteinu/calponinu a CK14 Nádorové buňky jsou negativní na myoepiteliální markry!

4 Intraduktální karcinom Pravidelné monomorfní duktální buňky; solidně microcystické struktury, cystopapilární, sekreční aktivita

5 Intraduktální karcinom Intaktní myoepiteliální vrstva, pozitivní barvení v myoepiteliích (p63)

6 Intraduktální karcinom Difuzní exprese S100 proteinu

7 Salivární duktální karcinom (SDC) SDC je agresivní, rychle progredující karcinom slinných žláz s vysokým rizikem lokoregionálních i vzdálených metastáz S100 protein/sox10 vždy negativní AR/CK7 pozitivní; HER-2/neu amplifikace u 15-50% případů SDC

8 Salivární duktální karcinom HER2/neu HER2 gene amplification, mutace v genech TP53, PIK3CA, PTEN a HRAS NCOA4-RET fúze?? (Wang et al. Clin Cancer Res 2016;22: ).

9 Design a metodika Detekce fúzních transkriptů 53 genů byla provedena u 18 případů IC metodou sekvenování nové generace (NGS) kitem Fusion Plex Solid Tumor (ArcherDX) Identifikované genové fúze byly dále potvrzeny metodami FISH break apart sondami a v některých případech i fúzními FISH sondami a metodou reverzní transkripční polymerázové řetězové reakce (RT-PCR) Všechny analyzované případy byly negativní na zlom ETV6 genu metodou FISH a ETV6-NTRK3 fúzi metodou RT- PCR Pro porovnání bylo stejným NGS panelem vyšetřeno 9 případů SDC

10 Intraduktálníkarcinom IC je jen částečně geneticky definovaný Pouze v několika případech byl popsán zlom v genu RET a NCOA4-RET genová fúze 1případ IC-fúze NCOA4-RET pomocí NGS 6 dalších případů zlom genu RET pomocí FISH (6/15 =47%) Am J Surg Pathol 2018;42:

11 Intraduktálníkarcinom NGS analysis prokázala NCOA4-RET fúzi exonu 7 a 8 NCOA4 genu a exonu 12 RET genu v 6 případech (6/17; 38%) novátrim27-ret fúze exonu 3 a 12 byla nalezena ve 2 případech IC s apokriními rysy Am J Surg Pathol 2018;42:

12 Intraduktální karcinom s NCOA4RET fúzí, klasická varianta Typ IC s intercalated duct-like difereniciací S100 protein pozitivní

13 NCOA4-RET fusion transcript (exons 8-12 joining) by NGS

14 Intraduktální karcinom s TRIM27-RET fúzí,apokrinní varianta Androgen receptor

15 TRIM27-RET fusion transcript (exons 3-12 joining) by NGS

16 Výsledky- IC NGS analýzou byl v 6 případech IC duktálního typu nalezen NCOA4-RET fúzní transkript sdružující exon 7 nebo 8 NCOA4 genu a exon 12 RET genu Novým nálezem je průkaz TRIM27-RET fúze mezi exony 3 a 12 ve dvou IC apokrinního typu Více než 50% všech IC bylo charakterizováno RET fúzí Tyto translokace nebyly nalezeny v žádném případu SDC

17 Výsledky-SDC Onkogenní mutace nalezeny v genech HRAS (3/9) (HRAS: c.182a>g p.gln61arg, HRAS: c.37g>c p.gly13arg) AKT1: c.49g>a p.glu17lys, TERT, a PTEN amplifikaceher2/neu genu pomocí FISH a potvrzena NGS (3/9) Homozygotní delece lokusu 9p21 (CDKN2A) (1/9) Amplifikace genu MDM2 u pacientky se současnou amplifikací HER2/neu a mutací v genu PTEN (1/9) mutace genu MYB, pomocí FISH (2/9)

18 Intraduktální karcinom parotis s NCOA4-RET fúzí, u 35-letého muže Metastáza v periglandulární LU CK7, S100 protein, SOX10 a mammaglobin- pozitivní AR/GATA3 a DOG1 - negativní

19 Intraduktální karcinom NCOA4-RET fúzí a metastázou v lymfatické uzlině Detekce fúzních transkriptu pomocí FusionPlex Solid Tumor Kitu (ArcherDx).* Prokázána fúze genů NCOA4-RET

20 Intraduktální karcinom s NCOA4-RET fúzí a invazí Absence myoepiteliální vrstvy p63 protein Široce infiltrativní růst s desmoplastickou reakcí a perineurální invazí

21 Závěry Potvrdili jsme, že NCOA4-RET je dominantní genovou fúzí v IC duktálního typu, včetně 3 případů s invazí, jeden s metastázou v LU Novým nálezem je objev TRIM27-RET translokace v IC apokrinního typu Absence uvedených translokací v případech klasického SDC dále potvrzuje odlišnost IC a SDC

22 Děkuji za pozornost 25. SJEZD ČESKÝCH A SLOVENSKÝCH PATOLOGŮ, listopadu 2018, Mikulov, hotel Galant