Diferenciální diagnostika SCLC s využitím markerů Elecsys progrp a Elecsys NSE

Transkript

1 Diferenciální diagnostika SCLC s využitím markerů Elecsys progrp a Elecsys NSE Ing. Eva Herkommerová, PhD. prim. MUDr. Hana Mrázková Krajská zdravotní, a.s.- Nemocnice Most 1. Oddělení laboratorního komplementu 2. Oddělení TRN

2 NÁDOROVÉ MARKERY Látky produkované maligními buňkami nebo organismem jako odpověď na nádorové bujení Látky, jejichž stanovení v tkáni nádoru (kvalitativní) nebo v krevním séru či jiných biologických tekutinách (kvantitativní) pacienta s neoplastickým onemocněním poskytne informaci o biologických vlastnostech a chování nádoru

3 Karcinom plic V celosvětovém měřítku představuje karcinom plic 12,8 % mezi všemi zhoubnými nádory. V ČR nejčastější zhoubný novotvar u mužů - incidence 77,8 / 100 tisíc obyvatel - mortalita 76,5 / 100 tisíc obyvatel (cca 5 tisíc mužů / rok) U žen na druhém místě po karcinomu prsu - incidence 20 / 100 tisíc obyvatel - mortalita 20 / 100 tisíc obyvatel (cca 1 tisíc žen / rok)

4 Rizikové faktory pro vznik PK Kouření, kterému se připisuje více než 87 % případů plicního karcinomu Osobní anamnéza opakovaných zánětů průdušek Rodinná anamnéza plicního karcinomu Azbest Radon Výskyt kancerogenních látek v pracovním prostředí

5 Rozdělení plicních nádorů Nemalobuněčný (NSCLC) % zhoubných plicních nádorů pomalejší růst a vede později k metastazování v časných stadiích - chirurgické odstranění v pokročilejších stadiích - chemoterapie a radioterapie. citlivost nádoru na chemoterapii a radioterapii může být menší než u malobuněčného karcinomu Malobuněčný (SCLC) asi % zhoubných plicních nádorů. rychlý růst, má tendenci vytvářet metastázy do dalších částí těla není zpravidla vhodný k chirurgickému odnětí většinu vykazuje dobrou citlivost k chemoterapii a radioterapii po ukončení léčby nelze vyloučit recidivu

6 Jak se dá zjistit plicní karcinom? Rentgen hrudníku Snímek počítačové tomografie Biopsie pomocí jehly Bronchoskopie Rentgeny mozku, jater, kostí a nadledvin Biochemické vyšetření ALP, LD, tumorové markery

7 Biochemické testování plicních karcinomů CEA (karcinoembryonální antigen) Cyfra 21-1 (cytokeratinový fragment) NSE (neuron specifická enoláza) progrp (propeptid uvolňující gastrin)

8 Použití jednotlivých markerů CEA vyskytuje se především u adenokarcinomů v menší míře je exprimován epidermoidními a malobuněčnými karcinomy plic CYFRA21-1 Nejcitlivější marker pro NSCLC NSE běžně používaný marker pro SCLC vykazuje nízkou senzitivitu separace nejpozději do 1 hodiny falešná pozitivita v hemolytických vzorcích Kombinace těchto markerů poskytuje informaci o stavu pacienta s rakovinou plic ProGRP vhodný marker volby při SCLC progrp and NSE se vzájemně doplňují použití obou markerů zvyšuje specificitu a citlivost možno měřit v séru

9 NSE neuron specifická enoláza NSE je glykolytický enzym, který za fyziologického stavu produkuje nervová a plicní tkáň plodu, v dospělosti je jeho výskyt v normálním stavu vázán především na neurony. Je produkován rovněž maligními nádory neurálního a neuroendokrinního původu, neuroblastomech, meduloblastomech dále i seminomy a adenokarcinomy ledvin. Hlavní význam NSE spočívá především při sledování pacientů s malobuněčným plicním karcinomem, diagnostická senzitivita 93 %, pozitivní prediktivní hodnota 92 % Screening, stanovení diagnózy: neužívá se Benigní onemocnění, jiné příčiny zvýšení v séru: může být pozorována u nemaligních plicních onemocnění nebo jaterních chorob.

10 NSE neuron specifická enoláza Zvýšené hodnoty NSE zachytí recidivující onemocnění a metastazující rozšíření NSE může být využito také při sledování odpovědi organismu na chemoterapii.

11 NSE neuron specifická enoláza Vyšetření se provádí přednostně v séru Nutnost separace do 1 hodiny Hemolýza může způsobit falešné zvýšení hodnot Nepoužívat opakované rozmrazení a zmrazení Referenční hodnoty: Negativní: < 15.7 ng/ml Hraniční: ng/ml Pozitivní: > 17 ng/ml

12 progrp - propeptid uvolňující gastrin GRP fyziologicky stimuluje uvolňování gastrinu v lidském gastrointestinálním traktu a způsobuje vasodilataci v dýchacím ústrojí. U malobuněčného karcinomu plic (SCLC) byla zjištěna zvýšená exprese a uvolňování GRP velmi krátký poločas a náročné jeho stanovení. V séru se stanovuje prekurzor Pro-Gastrinreleasing Peptide (ProGRP), který je stabilní.

13 progrp - propeptid uvolňující gastrin Fyziologicky se nachází v malé koncentraci každého člověka. Zvýšené hladiny progrp jsou vysoce specifické pro SCLC a progrp je nejcitlivějším markerem pro SCLC. Uvolňování progrp není závislé na stadiu SCLC Hladiny progrp v séru slouží jako prediktor recidivy SCLC a souvisí s rozšířením nádoru. Je užitečný pro monitorování léčby pacientů s

14 progrp - propeptid uvolňující gastrin Vyznačuje se vysokou schopností rozlišení mezi SCLC a NSCLC nebo jinými maligními či benigními nemocemi. 85,7 pg/ml rozhodovací mez, vykazuje 95 % specifičnost u skupiny s NSCLC

15 progrp - propeptid uvolňující gastrin Vyšetření se provádí přednostně v séru Hemolýza neovlivňuje výsledek stanovení Referenční hodnoty: 2,0 50,0 pg/ml Hladiny progrp vyšší než 150 pg/ml indikují SCLC s pravděpodobností 93 %. prof. Molina - pacienti s renálním selháním měli hodnoty progrp pod 200 pg/ml, výsledky nad 300 pg/ml byly pozorovány pouze u pacientů s SCLC

16 progrp a NSE Současné stanovení obou markerů progrp a NSE má aditivní hodnotu zvyšuje senzitivitu a specificitu v diagnostice SCLC. Dokáže odlišit falešně pozitivní hodnoty NSE.

17 Stanovení NSE a progrp přechod na systémy fy Roche Stanovení na analyzátoru Cobas e411 PSA, fpsa, Cyfra 21-1, AFP, CEA, CA 19-9, CA15-3, CA 72-4, CA 125, progrp a NSE Kvantitativní stanovení markerů plicního karcinomu se provádí v jednom automatizovaném systému Vyšetření se provádí v séru z jedné primární zkumavky

18 Stanovení NSE a progrp Technické vlastnosti metod Elecsys progrp NSE Doba analýzy 18 min Princip metody Jednokroková sendvičová imunoanalýza ECLIA Objem vzorku 30 µl 20 µl Vyšetřovaný materiál Sérum, plazma Sérum Kalibrace Dvoubodová Vnitřní kontrola Dvě hladiny, střídány obden Velikost soupravy 100 stanovení

19 Stanovení NSE a progrp Charakteristika metod Elecsys progrp NSE Počet měřených vzorků Nejistota 3,2 % Zatím nestanovena Mezilehlá preciznost 9,83 % 5,17 % Opakovatelnost 3,2 % 3,7 % Měřící rozsah pg/ml 0, ng/ml Vynikající přesnost zajišťuje spolehlivé výsledky v celém měřícím rozsahu Návaznost Abbott Architect progrp ----

20 Srovnání progrp Abbott x Roche A:abbott, B:roche A B Počet vzorků / vyloučených: 10 0 min. 23,20 22,60 Průměrný rozdíl (%) mezi A/B: -0,30 max. 97,10 101,20 SD mezi výsledky A a B (%): 4,44 medián 48,33 47,97 pg/ml 120,00 100,00 80,00 B 60,00 40,00 y = 1,0383x - 1,9068 R² = 0, ,00 0,00 0,00 20,00 40,00 60,00 80,00 100,00 120,00 A

21 Klinická data progrp NSE Oddělení TRN vyšetření vyšetření vyšetření Interní oddělení vyšetření vyšetření vyšetření Celkem za TRN 258 vyšetření 29 vyšetření Celkem za INT 203 vyšetření 4 vyšetření

22 Diferenciální diagnostika KP Informace z interního oddělení: požadavek na progrp je ojedinělý a využívá se pouze v nejasných situacích, myšleno tím nejasný rtg nález plic a nadále se řeší s TRN. Skladba pacientů, u kterých vnesl odběr pro GRP či NSE jasno je velmi pestrá. Význam vidíme u ne zcela jasných nálezů plicních, kdy zvažujeme možný malobuněčný Ca, kde se nám opakovaně potvrdil.

23 Diferenciální diagnostika KP Od bylo na oddělení TRN přijato 226 pacientů s podezřením na KP. Celkem bylo za toto období provedeno 258 vyšetření progrp. 85 pacientů (37,6 %) s nenádorovým plicním onemocněním progrp pod 50 pg/ml (medián 36,7 pg/ml) pro upřesnění diagnózy SCLC byl výsledek progrp přínosem u 109 pacientů (48,2 %), progrp vyšší než 150 pg/ml 1 x bylo zjištěno zvýšení progrp (hodnoty pg/ml) u: - karcinom děložního čípku - epidermoidiního KP - adenocarcinomu plic - tumoru jícnu - lymfom (zjištěna hodnota více než 5000 pg/ml) falešně pozitivní výsledky: - 26 pacientů s infekčním onemocněním (11,5 %) - 1 x plicní embolie - 1 x intesticiální plicní proces

24 Diferenciální diagnostika KP Aditivní hodnota NSE Stanoveno 29 vzorků/měsíc u 5 pacientů byla zjištěna shoda při SCLC více než 370 ng/ml byla stanovena hodnota u pacienta s adenokarcinomem plic 4 pacienti měli negativní hodnotu NSE, ale izolovaně bylo pozitivní progrp 1 falešně pozitivní výsledek u infekčního procesu

25 ZÁVĚR progrp je vysoce stabilní, snadno měřitelný u pacientů s SCLC dochází ke specifickému zvýšení progrp vykazuje vysokou citlivost u pacientů se SCLC i v časné fázi onemocnění změny sérové hladiny progrp vykazují u pacientů s SCLC vynikající korelaci s odpovědí na léčbu progrp má vyšší senzitivitu a specifičnost než NSE u pacientů s SCLC progrp a NSE se vzájemně doplňují, použití

26 Děkuji za pozornost Krajská zdravotní, a.s. Nemocnice Most, o.z. Oddělení laboratorního komplementu