Laboratorní příručka

Transkript

1 Labratrní příručka Zkntrlval: Mgr. Iva Slámvá STRANA 1 (CELKEM 26)

2 OBSAH OBSAH ÚVOD ÚVODNÍ SLOVO SEZNAM POUŽITÝCH ZKRATEK INFORMACE O LABORATOŘI IDENTIFIKACE LABORATOŘE A DŮLEŽITÉ ÚDAJE (KONTAKTY) ZÁKLADNÍ INFORMACE O LABORATOŘI A STAV AKREDITACE PRACOVIŠTĚ ZAMĚŘENÍ LABORATOŘE, ÚROVEŇ ORGANIZACE LABORATOŘE... 9 Schéma labratře SPEKTRUM NABÍZENÝCH SLUŽEB LABORATOŘE Seznam labratrních vyšetření Seznam primárních materiálů (vzrků) Indikace k vyšetření MANUÁL PRO ODBĚRY PRIMÁRNÍCH VZORKŮ ZÁKLADNÍ INFORMACE ŽÁDANKA NA LABORATORNÍ VYŠETŘENÍ POUŽÍVANÝ ODBĚROVÝ SYSTÉM PŘÍPRAVA PACIENTA PŘED VYŠETŘENÍM, ODBĚR VZORKU Příprava pacienta Infrmvané suhlasy Odběrvá místnst Odběry blastmer a buněk trfblastu mim zařízení: IDENTIFIKACE PACIENTA NA ŽÁDANCE A OZNAČENÍ VZORKU MNOŽSTVÍ VZORKU Periferní krev Zkntrlval: Mgr. Iva Slámvá STRANA 2 (CELKEM 26)

3 3.7 NEZBYTNÉ OPERACE SE VZORKEM, STABILITA ZÁKLADNÍ INFORMACE K BEZPEČNOSTI PŘI PRÁCI SE VZORKY INFORMACE K DOPRAVĚ VZORKŮ A K ZAJIŠTĚNÍ SVOZU VZORKŮ Krevní vzrky Vzrky pr PGD vyšetření PREANALYTICKÉ PROCESY V LABORATOŘI PŘÍJEM ŽÁDANEK A BIOLOGICKÝCH VZORKŮ KRITÉRIA PRO PŘIJETÍ NEBO ODMÍTNUTÍ NESTANDARDNÍCH PRIMÁRNÍCH VZORKŮ Důvdy pr dmítnutí přijetí vzrku d labratře Pstupy při nesprávné identifikaci vzrku neb žádanky Pstup při dplňvání neúplně neb chybně vyplněné žádanky Pstup při zjištění nestandardníh vzrku (nádby s materiálem) VYŠETŘOVÁNÍ SMLUVNÍMI A SPOLUPRACUJÍCÍMI LABORATOŘEMI VYDÁVÁNÍ VÝSLEDKŮ A KOMUNIKACE S LABORATOŘÍ HLÁŠENÍ VÝSLEDKŮ V KRITICKÝCH INTERVALECH VYDÁVÁNÍ VÝSLEDKŮ, TYPY NÁLEZŮ A LABORATORNÍCH ZPRÁV ZMĚNY VÝSLEDKŮ A NÁLEZŮ INTERVALY OD DODÁNÍ VZORKU K VYDÁNÍ VÝSLEDKU ZPŮSOB ŘEŠENÍ STÍŽNOSTÍ KONZULTAČNÍ ČINNOST LABORATOŘE, VYDÁVÁNÍ POTŘEB LABORATOŘÍ SKLADOVÁNÍ VYŠETŘENÝCH VZORKŮ SEZNAM LABORATORNÍCH VYŠETŘENÍ VČETNĚ POPISU Přehled prváděných vyšetření a příslušné standardní perační pstupy (SOP) STANOVENÍ KARYOTYPU Princip metdy Pžadavky na primární vzrek Skladvání debrané krve Zkntrlval: Mgr. Iva Slámvá STRANA 3 (CELKEM 26)

4 Transprt vzrku d labratře STANOVENÍ HODNOTY ZÍSKANÝCH CHROMOZOMÁLNÍCH ABERACÍ (ZCHA) Princip metdy Pžadavky na primární vzrek FISH VYŠETŘENÍ Princip metdy PGD FISH Princip metdy PGD PCR - VYŠETŘENÍ MONOGENNÍCH CHOROB Princip metdy PGD ACGH COMPARATIVNÍ GENOMOVÁ HYBRIDIZACE Princip metdy POKYNY PRO SPOLUPRACUJÍCÍ LÉKAŘE POKYNY PRO PACIENTY DALŠÍ INFORMACE LIKVIDACE BIOLOGICKÉHO MATERIÁLU PŘÍLOHY Zkntrlval: Mgr. Iva Slámvá STRANA 4 (CELKEM 26)

5 1. ÚVOD 1.1 ÚVODNÍ SLOVO Sanatrium Helis je nestátní gyneklgické lůžkvé zařízení, které se nachází v centru Brna. Byl zalžen v rce Přínsem pr pacienty je individuální přístup, bližší kntakt s pacientem a zkrácení dby hspitalizace na minimum. Sučástí Sanatria Helis je perační sál a lůžkvá část. S výjimku prdů nabízí Sanatrium Helis kmplexní gyneklgicku péči. Vedle běžných gyneklgických ambulancí a prvádění gyneklgických perací pskytuje specializvanu péči v blastech: diagnstika a léčba pruch pldnsti genetická pradna Labratř lékařské genetiky (včetně preimplantační genetické diagnstiky) prenatální diagnstika ultrazvukvá diagnstika 3D pradna rizikvéh těhtenství nemcnění dělžníh čípku - nklgické prevence - knsiliární klpskpie miniinvazivní chirurgie - laparskpie a hysterskpie Péči zajišťují zkušení lékaři erudvaní v nejmdernějších pstupech. Zaměstnanci lůžkvéh zařízení, ambulancí a labratří splňují svým vzděláním pdmínky dbrné způsbilsti. V rce 2002 Sanatrium Helis získal licenční smluvu s australsku firmu Genea (dříve Sydney IVF), která je v celsvětvém měřítku leaderem v blasti IVF, genetiky a preimplantační genetické diagnstiky (PGD). Od rku 2004 je Sanatrium Helis držitelem certifikace ĆSN ISO 9001:2000. ISO pskytuje systematicku specifikaci pr zlepšvání prvzníh výknu, služí jak mdel pr zajištění jaksti a kntrly a řízení těcht prcesů. V prsinci 2009 byl Sanatriu Helis udělen certifikát ČSN ISO 27001:2006 týkající se systému managementu infrmační bezpečnsti (=ISMS) pr pskytvání zdravtnických služeb v blasti diagnstické, léčebné a šetřvatelské péče. Labratř lékařské genetiky je sučástí Sanatria Helis již d rku Více zaměření labratře viz kapitly 2.3 a 2.5. Zkntrlval: Mgr. Iva Slámvá STRANA 5 (CELKEM 26)

6 1.2 SEZNAM POUŽITÝCH ZKRATEK SH LLG PGD IVF AR CAR FISH PCR acgh WGA ZCHA BM Sanatrium Helis labratř lékařské genetiky preimplantační genetická diagnstika in vitr fertilizace asistvaná reprdukce centrum asistvané reprdukce Flurescenční in situ hybridizace plymerázvá řetězvá reakce mikrčipvá kmparativní genmvá hybridizace celgenmvá amplifikace získané chrmzmální aberace bilgický materiál Zkntrlval: Mgr. Iva Slámvá STRANA 6 (CELKEM 26)

7 2. INFORMACE O LABORATOŘI 2.1 IDENTIFIKACE LABORATOŘE A DŮLEŽITÉ ÚDAJE (KONTAKTY) PRACOVIŠTĚ: LABORATOŘ LÉKAŘSKÉ GENETIKY Adresa: CZ - Brn Zřizvatel: SANATORIUM Helis s.r.. IČ: DIČ: CZ Jednatel splečnsti Klinický genetik Veducí LLG Zástupce veducíh LLG Manažer kvality LLG MUDr. Pavel Texl MUDr. Věra Hřínvá RNDr. Wernervá Vendula Mgr. Iva Slámvá Bc. Texlvá Kateřina Tel.: texl@sanatriumhelis.cz Tel.: hrinvav@seznam.cz Tel: karytyp@seznam.cz Tel: iva.slamva@seznam.cz Tel.: texlva.k@sanatriumhelis.cz 2.2 ZÁKLADNÍ INFORMACE O LABORATOŘI A STAV AKREDITACE PRACOVIŠTĚ Labratř lékařské genetiky (LLG) zahájila svůj prvz v lednu V rce 2004 Sanatrium Helis získal certifikaci ISO 9001:2000. ISO pskytuje systematicku specifikaci pr zlepšvání prvzníh výknu, služí jak mdel pr zajištění jaksti a kntrly a řízení těcht prcesů byla labratř lékařské genetiky začleněna d certifikace ISO 9001:2000, jehž držitelem je Sanatrium Helis již d rku Zkntrlval: Mgr. Iva Slámvá STRANA 7 (CELKEM 26)

8 V bdržela LLG certifikaci NASKL I. V sučastné dbě se labratř připravuje k auditu ČIA (ISO ), je evidvána v Registru labratří Nárdníh autrizačníh střediska pr klinické labratře při ČLS JEP a je zapjena d prgramu zvyšvání kvality ve zdravtnictví garantvaném MZ ČR. 2.3 ZAMĚŘENÍ LABORATOŘE, ÚROVEŇ LLG nabízí genetická vyšetření metdami cytgenetickými, mlekulárně cytgenetickými i mlekulárně bilgickými v rámci pstnatálníh vyšetření a preimplantační genetické diagnstiky (PGD). Zabývá se základní cytgeneticku analýzu chrmzmů - stanvením karytypu za pužítí klasických metd zpracvání vzrků periferní krve - kultivace buněk in vitr s jejich následnu chrmzmvu analýzu. V rámci PGD nabízí pr asistvanu reprdukci (AR) vyšetření embryí před jejich zavedením d dělhy. Materiálem jsu buňky trfblastu, případně blastmery. PGD využívá především flurescenční in situ hybridaizaci (FISH) a array kmparativní genmvu hybridizaci (acgh) k dhalení aneuplidií chrmzmů, případně strukturálních chrmzmálních aberací u embryí a vyšetřvání mngenních chrb pmcí plymerázvé řetězvé reakce (PCR). Pracviště labratří jsu technicky a persnálně vybavena v suladu s legislativu platnu pr prvádění všech nabízených labratrních vyšetření. Zkntrlval: Mgr. Iva Slámvá STRANA 8 (CELKEM 26)

9 2.4 ORGANIZACE LABORATOŘE Pracvní dba labratře Příjem vzrků Pndělí - pátek* 7:00 15:30 7:00-15:30 * v případě PGD vyšetření zajištěn i víkendvý prvz 7:00 12:00 Labratř lékařské genetiky je sučástí splečnsti Sanatrium Helis s.r.. Činnst labratře řídí veducí labratře, který je v rámci mateřské rganizace pdřízen řediteli SH. Cytgenetická část labratře se nachází v budvě na adrese Štefánikva 8, část PGD je umístěna v bezprstřední blízksti centra asistvané reprdukce v Sanatriu Helis na, nebť s tímt centrem velice úzce funkčně suvisí. Schéma labratře Veducí labratře LG Lékař/garant 816 Manažer kvality Interní auditr Metrlg Zástupce veducíh labratře VŠ nelékaři Jiní dbrní pracvníci labranti Zkntrlval: Mgr. Iva Slámvá STRANA 9 (CELKEM 26)

10 2.5 SPEKTRUM NABÍZENÝCH SLUŽEB LABORATOŘE Seznam labratrních vyšetření Stanvení karytypu z periferní krve u dětí i dspělých (zejména u párů s pruchami reprdukce a dárců gamet) klasicku cytgeneticku analýzu Stanvení hdnty získaných chrmzmvých aberací z periferní krve FISH vyšetření (numerické aberace) PGD FISH (numerické a strukturální aberace) PGD PCR vyšetření mngenních chrb PGD acgh mikrčipvá kmparativní genmvá hybridizace Seznam primárních materiálů (vzrků) periferní krev kapilární krev buňky trfblastu Indikace k vyšetření Stanvení karytypu z periferní krve: páry s pruchami reprdukce (sterilita, infertilita) páry s výskytem ptvrzené neb suspektní chrmzmální aberace u nich samtných neb u rdinnéh příslušníka abnrmální fentyp pacienta dárci gamet (cytů, spermií) Stanvení hdnty ZCHA z periferní krve: pacienti vystavení škdlivinám v živtním prstředí (prfesní rizik) plánující těhtenství pacienti p léčbě cytstatiky neb p transplantaci plánující těhtenství pacienti, u kterých byla při stanvení karytypu z periferní krve nalezena zvýšená hdnta ZCHA a plánují těhtenství neb darvání gamet PGD vyšetření mngenních chrb ptvrzený výskyt mngenní chrby u jednh z páru ptvrzený výskyt mngenní chrby u příméh rdinnéh příslušníka PGD metdu FISH, případně acgh pakvaně neúspěšné IVF spntánní abrty v histrii pacienta věk pacientky, pacienta nález chrmzmální aberace při předchzím cytgenetickém vyšetření páru chrby vázané na phlaví zjištěné v rdině Zkntrlval: Mgr. Iva Slámvá STRANA 10 (CELKEM 26)

11 3. MANUÁL PRO ODBĚRY PRIMÁRNÍCH VZORKŮ 3.1 ZÁKLADNÍ INFORMACE V labratři lze vyšetřit tyt primární vzrky: periferní krev kapilární krev buňky trfblastu Základním pžadavkem je bezpečná a jednznačná identifikace pacienta na nádbě s bilgickým materiálem a specifikace pžadvanéh vyšetření na žádance. Vzrky se debírají vždy d předem značené nádby. viz ZÁSADY SPRÁVNÉHO ODBĚRU PRIMÁRNÍHO VZORKU, dstavec ŽÁDANKA NA LABORATORNÍ VYŠETŘENÍ Pukaz na vyšetření / šetření musí být řádně vyplněn a musí bsahvat následující infrmace: jmén, příjmení, rdné čísl (u cizinců čísl pjistky), pjišťvna pacienta (pkud ze jména pacienta jednznačně nevyplývá phlaví pacienta, musí být uveden) jmén, dbrnst, IČZ a pdpis indikujícíh lékaře razítk s kntaktem na indikujícíh lékaře druh, případně tkáňvý půvd zaslanéh vzrku datum a čas dběru vzrku, pdpis sby, která dběr prvedla diagnózu a klinicku indikaci k vyšetření druh pžadvanéh vyšetření pžadavek urgentníh vyšetření musí být na žádance značen STATIM Vzrky patřené takt kmpletně vyplněnými žádankami mhu být bez prdlení zařazeny ke zpracvání v labratři. Vzrky jsu přijímány puze s vyplněnu žádanku. Viz bdy 4.1, 4.2 a 4.3, dále také viz směrnice S- LLG-004 Příjem standardníh bilgickéh materiálu a S-LLG-005 Příjem nestandardníh bilgickéh materiálu. Všechny žádanky jsu p prvedení vyšetření ulženy v jedntlivých labratřích p dbu 30 let. Ústní pžadavky na vyšetření nelze akceptvat. Všechny pžadavky na ddatečná / pakvaná vyšetření musí být dlžena nvu žádanku se všemi údaji dle bdu 3.2. Zkntrlval: Mgr. Iva Slámvá STRANA 11 (CELKEM 26)

12 Přípustný je ddatečný ústní pžadavek lékaře na přednstní zhdncení již přijatéh vzrku, který nebyl na žádance značen jak STATIM. Periferní krev je mžn skladvat nejdéle šest dnů d dběru, p tét dbě krev hemlyzuje a není z ní již mžn stanvit karytyp. Ddatečné vyšetření lze tedy pžadvat d pěti dnů d dběru. V případě PGD vyšetření jsu vzrky zpracvány v den dběru, případně zamraženy a uchvány pr pzdější analýzu při -20 C. Zamražené vzrky jsu zpracvány nejpzději d 1 měsíce. Ddatečná vyšetření lze knzultvat p dmluvě s VL neb zástupcem VL. 3.3 POUŽÍVANÝ ODBĚROVÝ SYSTÉM K dběru krve je třeba pužít uzavřený dběrvý systém viz níže. V Sanatriu Helis je t. č. pužíván dběrvý systém firmy Sarstedt, stříkačka Mnvette 109 Název dběru Katalgvé čísl Velikst stříkačky karytyp Li - Heparin ,9 ml 3.4 PŘÍPRAVA PACIENTA PŘED VYŠETŘENÍM, ODBĚR VZORKU Příprava pacienta - dieta není pžadván, žádné mezení - léky, vitamíny není žádné mezení - v případě akutníh nemcnění knzultace s lékařem Infrmvané suhlasy Pr každý typ vyšetření existuje knkrétní typ suhlasu, které jsu k dispzici na pžádání v LLG. Pr pracvníky Sanatria Helis jsu přístupny na QM Prtále. K PGD vyšetření je vždy pžadván písemný suhlas s vyšetřením embryí d bu partnerů, který je devzdán a pdepsán při příjmu pacientky k dběru cytů. Obsahuje identifikační údaje bu partnerů, důvd testvání, infrmace úskalích vyšetření, infrmace pplatcích atd. Infrmvaný suhlas s preimplantační geneticku diagnstiku metdu FISH Infrmvaný suhlas s preimplantační geneticku diagnstiku metdu acgh Infrmvaný suhlas s preimplantační geneticku diagnstiku metdu PCR Infrmvaný suhlas s genetickým vyšetřením Odběrvá místnst Odběry periferní krve a kapilární dběry prvádí kvalifikvaný zdravtnický persnál Sanatria Helis v místnsti pr tyt účely určené. Pracvník debírající primární vzrek svým pdpisem na žádance ptvrzuje, že primární vzrek byl debrán v suladu s pžadavky uvedenými v Labratrní příručce. Zkntrlval: Mgr. Iva Slámvá STRANA 12 (CELKEM 26)

13 Odběrvá místnst pr dběry krve se nachází v 2.NP Sanatria Helis a je vybavena plhvacími dběrvými křesly s nastavitelnu plhu pdruček, pěradla zad, hlavy a nhu. Nezbytným vybavením je kntejner na dkládání pužitých jehel a stříkaček z dstatečně pevnéh materiálu patřený víčkem a příslušně značený. Odběr periferní krve: Pr dběry periferní krve se pužívají supravy firmy SARSTEDT bjemu 2,5-5 ml (viz bd 3.4) s náplní lithium/heparin, ihned p dběru jemně prmíchat! Vzrky krve určené k vyšetření v labratři Sanatria Helis, musí být bezprstředně p dběru ulženy d chladničky. Pracvník labratře lékařské genetiky si je na výzvu pracvníka prvádějícíh dběr vyzvedne. Odběry kapilární krve: Pr dběry kapilární krve se pužívají jednrázvé sterilní dběrvé pmůcky. Lehce se napíchne lůžk prstu a vzniklá kapka krve se nechá vsáknut d příslušnéh kénka FTA kartičky (FTA Micr Card, Cat N. WB120210). Ta se nechá na vzduchu zaschnut. Pracvník labratře lékařské genetiky si je na výzvu pracvníka prvádějícíh dběr vyzvedne. Odběry periferní a kapilární krve mim zařízení: Transprt vzrků, debraných mim Sanatrium Helis zajišťuje p dmluvě svz Sanatria Helis vlastními vzy a pršklenými pracvníky za ddržení zásad manipulace s BM. Objednání je mžné na tel. čísle každý pracvní den v dbě d hd. K dběru periferní krve je nutné pužít jednrázvu sterilní dběrvu supravu bjemu 2,5-5 ml s náplní lithium/heparin, ihned p dběru nutn prmíchat, nedezinfikvat míst vpichu jódem. Odběry periferní krve a FTA se musí řídit ZÁSADAMI SPRÁVNÉHO ODBĚRU PRIMÁRNÍHO VZORKU PERIFERNÍ KREV (bd 3. 4). Ihned p dběru musí být vzrky ulženy d chladničky, kde jsu uschvány až d jejich vyzvednutí dpravcem Sanatria Helis. Ke svzu periferní krve se pužívá transprtní nádba termska, ve které je během transprtu mnitrvána a při příjmu vzrků kntrlvána a zaznamenána teplta. Za ddržvání správné teplty při transprtu BM je zdpvědný pracvník, který prvádí svz. Externí žadatel musí prvést dběr tak, aby byly splněny pdmínky kapitl 3.1 až 3.9. Transprtní bx je pravidelně desinfikván dle aktuálníh Desinfekčníh řádu Sanatria Helis zdpvídá labratř. Žádanky žadatelů jsu skladvány a transprtvány dděleně d BM tak, aby byl zamezen přístup neprávněných sb k jejich bsahu a nedšl k jejich kntaminaci BM. Zkntrlval: Mgr. Iva Slámvá STRANA 13 (CELKEM 26)

14 ZÁSADY SPRÁVNÉHO ODBĚRU PRIMÁRNÍHO VZORKU PERIFERNÍ KREV 1. Seznámení pacienta s pstupem dběru. 2. Pacient se usadí d dběrvéh křesla, před dběrem by měl být 15 min v klidu. 3. Výběr vhdné injekční stříkačky a veliksti jehly pdle pžadavků na vyšetření a pdle stáří pacienta. Vizuální kntrla stavu jehly, injekční stříkačky a dběrvých nádbek. 4. Prvede se kntrlní pzitivní identifikace a značení dběrvých nádb štítkem s identifikačními údaji pacienta (tázka na jeh jmén a datum narzení musí být stejné jak na žádance). 5. Označení dběrvých nádb štítkem s identifikačními údaji pacienta viz Zajištění vhdné plhy paže k dběru. Odběr krve se prvádí v plze vsedě neb vleže, paže se vlně svěsí dlů neb plží na pěradl dběrvéh křesla. 7. Psuzení kvality žilníh systému v lketní jamce: mál zřetelné žíly je mžn zvýraznit velmi šetrnu masáží paže d zápěstí k lkti. Nešetrná masáž i palpace ruky může způsbit změny některých kmpnent. 8. Pacient může být vyzván k sevření pěsti. Opakvané pumpvání paží je nevhdné. Jsu-li žíly dbře viditelné neb hmatné, je lépe škrtidl nepužít. 9. Desinfekce místa vpichu desinfekčním prstředkem na bázi lihu nedesinfikvat míst vpichu jódem!!! Desinfekci aplikujeme pmcí čtverečku z buničité vaty neb pstřikem z rzprašvače přím na paži. Desinfekční činidl se musí nechat zaschnut. P zaschnutí je další palpace místa vpichu nepřípustná. 10. Pracvník prvádějící dběr nasadí jehlu na dběrvu stříkačku, palcem ve vzdálensti 2 až 5 cm pd pístem dběru stabilizuje plhu žíly. Prvede venepunkci. Tahem za píst djde k nabrání krve. 11. Při dběru více zkumavek se naplněná zkumavka vyjme a nasadí se na zavedenu jehlu další. První se plní zkumavka srážlivu krví. Zkumavky s prtisrážlivými činidly je nutné debrat krev p značku na zkumavce, aby nedšl ke zkreslení neb ke sražení vzrku. Ihned p dběru se musí jemně prmíchat s nabranu krví, ne třepat. 12. Jakmile začne krev vtékat d dběrvé zkumavky, uvlní se škrtidl. P dběru je míst vpichu překryt čtverečkem buničité vaty. Na čtvereček se jemně zatlačí a jehla je pmalým tahem dstraněna ze žíly. 13. Ošetření místa vpichu je prveden náplastí, kteru je dpručen pnechat na místě vpichu nejméně 15 minut, a paži p dběru nezatěžvat a fyzicky nenamáhat. 14. Pacientvi je dpručen tisknut na míst vpichu tampnek nejméně 2 minuty. 15. P dběru krve je pacientvi dpručen 15 min. klid v čekárně. 16. Vždy je nutn zaznamenat na žádanku mim jiné čas dběru (hdina, minuta), parafu a razítkem (jmenvku) debírajícíh. Bez těcht údajů nebude vyšetření prveden. Pžadavky na vyplnění žádanky jsu shrnuty v bdě Pužitý dběrvý materiál je ulžen d kntejneru na pužité injekční stříkačky a jehly. Zkntrlval: Mgr. Iva Slámvá STRANA 14 (CELKEM 26)

15 ZÁSADY SPRÁVNÉHO ODBĚRU PRIMÁRNÍHO VZORKU KAPILÁRNÍ KREV 1. Pacient se usadí d dběrvéh křesla, před dběrem by měl být 15 min v klidu. 2. Výběr vhdné veliksti injekční jehly. Vizuální kntrla stavu jehly. 3. Prvede se kntrlní pzitivní identifikace a značeni FTA kartičky identifikačními údaji pacienta. 4. Označení FTA kartičky identifikačními údaji pacienta viz Zajištění vhdné plhy paže k dběru. Odběr krve se prvádí v plze vsedě neb vleže, paže se vlně svěsí dlů neb plží na pěradl dběrvéh křesla. 6. Desinfekce místa vpichu plštářku prstu) desinfekčním prstředkem na bázi lihu nedesinfikvat míst vpichu jódem!!! Desinfekci aplikujeme pmcí čtverečku z buničité vaty neb pstřikem z rzprašvače přím na paži. Desinfekční činidl se musí nechat zaschnut. P zaschnutí je další palpace místa vpichu nepřípustná. 7. Pracvník lehce bdne d lůžka prstu a pnechá krev vytvřit kapičku. 8. Prst přilžíme k FTA kartičce a kapičku krve necháme vsáknut d místa na FTA kartičce značenéh klečkem. Krevní skvrnku necháme zaschnut vlně na vzduchu. NEURYCHLUJEME SCHNUTÍ FOUKÁNÍM! 9. Ošetření místa vpichu je prveden náplastí, kteru je dpručen pnechat na místě vpichu nejméně 15 minut. 10. Vždy je nutn zaznamenat na žádanku m. j. parafu a razítkem (jmenvku) debírajícíh. Bez těcht údajů nebude vyšetření prveden. Pžadavky na vyplnění žádanky jsu shrnuty v bdě Pužitý dběrvý materiál je ulžen d kntejneru na pužité injekční stříkačky a jehly. Odběry trfblastu embryí v Sanatriu Helis: Jedná se dběr materiálu z embryí vykultivvaných v rámci IVF léčby. Bipsie je mžn prvádět 5., případně 6. den kultivace. Odběry prvádí vysce specializvaný embrylg v embrylgické labratři (2.NP Sanatria Helis, ). Pmcí mikrskpu s mikrmanipulátrem a laseru je debrán asi 5 buněk trfblastu z embrya ve stádiu hatchující blastcysty. V bu případech jsu debrané buňky transprtvány v petrihi miskách v kultivačním médiu nejpzději d 1 hdiny d susedící PGD labratře - viz příjem vzrků, bd 4.1. Odběry blastmer a buněk trfblastu mim zařízení: Odběr materiálu pr PGD vyš. debraný mim Sanatrium je mžný jen ve výjimečných případech p zašklení persnálu prvádějící dběr a manipulaci s bilgickým materiálem. Materiál je p dběru zamražen, d dby přepravy uchvám v mrazícím bxu (při asi -20) a přepravván v termnádbě při zachvání teplty v rzmezí -20 až 0 C. Materiál musí být dpraven d LLG d 30 dnů d dběru materiálu. Zkntrlval: Mgr. Iva Slámvá STRANA 15 (CELKEM 26)

16 3.5 IDENTIFIKACE PACIENTA NA ŽÁDANCE A OZNAČENÍ VZORKU Žádanka musí bsahvat údaje ppsané v bdě 3.2 tét příručky. Označení vzrku na nádbě s bilgickým materiálem štítek bsahující minimální pvinné údaje: jmén, příjmení a rdné čísl pacienta neb datum narzení neb rk narzení. Odběr vzrku se prvádí výhradně d předem značených nádb! 3.6 MNOŽSTVÍ VZORKU Periferní krev Odebírá se žilní krev pacienta z paže, 1-4 ml d jednrázvé sterilní dběrvé nádbky bjemu 2,5-5 ml s náplní Lithia/heparinu, ihned p dběru prmíchat táčením nádbky 180 C. Pr každé vyšetření je třeba minimální mnžství krve 1 ml. Trfblast Odběry buněk trfblastu cca 5 buněk trfblastu z embrya ve stadiu hatchující blastcysty, minimální pžadvané mnžství jsu asi 3 buňky. Kapilární krev Minimální pžadvané mnžství primárníh vzrku je velikst krevní skvrny průměru 5 mm. Více dběrech viz NEZBYTNÉ OPERACE SE VZORKEM, STABILITA Periferní krev může být skladvána nejdéle pět dnů d dběru u zákazníka v lednici, za teplty 2-10 C (krev nesmí zmrznut!), p tét dbě krev hemlyzuje a není z ní již mžn stanvit karytyp. V případě PGD vyšetření musí být vzrky dručeny d labratře d 60 min, neb je mžn vzrek p dběru zamrazit a d dby přepravy uchvám v mrazícím bxu (při asi -20). Materiál musí být dpraven d LLG d 30 d dběru materiálu. 3.8 ZÁKLADNÍ INFORMACE K BEZPEČNOSTI PŘI PRÁCI SE VZORKY S každým vzrkem BM je zacházen jak s ptenciálně infekčním. Více infrmací viz kapitla 9 (Likvidace bilgickéh materiálu). Zkntrlval: Mgr. Iva Slámvá STRANA 16 (CELKEM 26)

17 3.9 INFORMACE K DOPRAVĚ VZORKŮ A K ZAJIŠTĚNÍ SVOZU VZORKŮ Krevní vzrky a) debrané v Sanatriu Helis pracvník, který prvedl dběr, si v labratři vyžádá vyzvednutí vzrku (telefnicky či sbně), zajistí ulžení vzrku d chladničky. Pracvník labratře p převzetí vzrků v dběrvé místnsti zkntrluje jmén, příjmení, rdné čísl na žádance a vzrku a jejich shdu. K transprtu periferní krve se pužívá plastvá transprtní nádba, ve které se p dbu přepravy udržuje teplta 4-25 C a která je mnitrvána vlženým teplměrem. Žádanky k vyšetření jsu přepravvány sučasně v samstatném balu. Nádba je pravidelně desinfikvána. b) debrané mim Sanatrium Helis splupracující klinické pracviště si v labratři vyžádá svz vzrku (telefnicky na č neb em slamva@sanatriumhelis.cz, vrchní sestra Jarmila Slámvá), d dby vyzvednutí vzrku dpravcem Sanatria Helis vzrek ulží d chladničky při 2-10 C. Ke svzu periferní krve se pužívá transprtní nádba termska, ve které se p dbu přepravy udržuje teplta 4-25 C, která je mnitrvána vlženým teplměrem. Teplta v transprtní nádbě se kntrluje při vlžení a vyjmutí vzrků a zaznamenává se na přilženu žádanku. Nádba je pravidelně desinfikvána. Žádanky žadatelů jsu skladvány dděleně d BM, tak aby byl zamezen přístup neprávněných sb k jejich bsahu a jejich kntaminace BM. Kntakt pr dmluvu svzu vzrků při dběru mim zařízení: tel. č.: slamva@sanatriumhelis.cz Labratř nezdpvídá za ddržení pdmínek transprtu při dpravě vzrků externím dpravcem. Pracvník prvádějící svz d externích žadatelů musí vždy vyčkat na fyzické převzetí BM d pracvníka LLG. Pracvník labratře před dpravcem zkntrluje správnst údajů na žádankách a stav BM. Je nezbytné zajistit svz bilgickéh materiálu resp. předání na příjmvý úsek labratře d externích lékařů tak, aby byly ddrženy všechny pdmínky uvedené v LP. Vzrky pr PGD vyšetření Vzrky pr PGD vyšetření jsu ihned p dběru (nejpzději d 1 hd.) předány d susedící PGD labratře v kultivačním médiu. Předávající ptvrdí předání na žádance. V případě dběru mim Sanatrium Helis je vzrek přelžen d stripů s 5 ul extrakčníh pufru ( DNA amplifikační kit BlueGnme kat.č. PR ), d dby přepravy uchvám v mrazícím bxu (při asi -20). Zkntrlval: Mgr. Iva Slámvá STRANA 17 (CELKEM 26)

18 Přepravu materiálu zajišťuje Sanatrium Helis. K transprtu je pužit termbx, ve kterém je mnitrvána teplta (0-25 C). Ta je při předání zaznamenána na žádanku. Termbx je pravidelně desinfikván. 4. PREANALYTICKÉ PROCESY V LABORATOŘI 4.1 PŘÍJEM ŽÁDANEK A BIOLOGICKÝCH VZORKŮ Viz bdy 3.1 až ) Dpravce (labrantka, pracvník Sanatria Helis) předá bilgický materiál se žádankami pracvníkvi labratře, který prvádí příjem bilgickéh materiálu a vyčká jeh převzetí. 2) Pracvník pvěřený příjmem bilgickéh materiálu prvádí při převzetí kntrlu úplnsti vyplnění údajů na žádance a vzrku. 3) Pkud žádanka i vzrek splňují všechny frmální pžadavky dle bdů 3. 2 (žádanka) a 3.6 (vzrek), zaeviduje přijatý vzrek d Knihy příjmu a značí vzrky i žádanku přadvými čísly. 4) V Knize příjmu se zaznamenávají tyt údaje: datum a čas přijetí v labratři, datum a čas dběru vzrku, přadvé čísl vzrku, jmén a příjmení pacienta, rdné čísl, pjišťvna a další infrmace dle typu vzrku. Všechny dchylky d pžadavků na vzrky a žádanky, viz bd. 3.2 (žádanka) a 3.6 (vzrek), jsu pvažvány za nestandardní vzrky / žádanky a za jejich psuzení z hlediska mžnsti dalšíh zpracvání je dpvědný pracvník labratře prvádějící příjem materiálu viz kapitla 4.2. a směrnice Příjem nestandardníh bilgickéh materiálu (S-LLG-005). 4.2 KRITÉRIA PRO PŘIJETÍ NEBO ODMÍTNUTÍ NESTANDARDNÍCH PRIMÁRNÍCH VZORKŮ Za nestandardní vzrky jsu pvažvány všechny vzrky, které se svými vlastnstmi či náležitstmi dchylují d pžadavků uvedených v těcht bdech: 3.2 žádanka, 3.6 značení vzrku, 3.3 dběrvé nádby (dběrvý systém) a 3.6 mnžství vzrku Důvdy pr dmítnutí přijetí vzrku d labratře vzrky v neznačených zkumavkách, s nečitelným zápisem na zkumavce vzrky bez žádanky vzrky, u nichž se ani na výzvu ze strany labratře nepdařil zajistit stprcentní identifikaci pacienta, tedy shdu údajů na nádbě s materiálem a žádanku vzrky se sraženu krví, viditelně kntaminvané vzrky periferní krve debrané d zkumavky s jiným prtisrážlivým rztkem, než s heparinem Zkntrlval: Mgr. Iva Slámvá STRANA 18 (CELKEM 26)

19 zkumavka se vzrkem ptřísněná bilgickým materiálem neb mechanicky pškzená krevní vzrky skladvané neb transprtvané mim pžadvané rzmezí teplt, vzrky skladvané déle než 5 dnů d dběru pkud žadatelem není smluvně zajištěný klinický genetik Odmítnuté vzrky jsu evidvány v Knize nestandardních příjmů. Pstupy při nesprávné identifikaci vzrku neb žádanky Neshdu zjištěnu při příjmu žádanky se vzrkem, tedy výskyt nestandardníh vzrku či žádanky (chybějící neb evidentně špatné údaje, rzdíly vedlejších údajů na žádance a vzrku, nejasný pžadavek na vyšetření netýká se zásadních údajů typu rdné čísl neb příjmení) řeší pracvník prvádějící příjem materiálu kamžitě při příjmu dle zásad při příjmu vzrků směrnic S-LLG-004 a S- LLG-005. Pstup při dplňvání neúplně neb chybně vyplněné žádanky Údaje na neúplně neb chybně vyplněné žádance, která ale umžňuje jednznačnu identifikaci vzrku a pacienta, lze za určitých pdmínek dplnit ddatečně. Dplnění údajů prvádí pracvník přijímající bilgický materiál ihned p nalezení nedstatku telefnicky u vyšetření pžadujícíh lékaře. Zjištěné údaje dplní d žádanky, není-li t mžné, vyžádá si žádanku nvu. Údaje pravené neb upravené na riginální žádance pracvníkem/pracvníky labratře musí být jasně značeny datem a pdpisem pracvníka, který změnu prvedl. Pstup při zjištění nestandardníh vzrku (nádby s materiálem) V případě, že jsu nestadardní primární vzrky přijaty a zpracvány, musí být ve výsledkvém listu ppsána pvaha prblému či dchylky d nrmy (ppis stavu přijatéh vzrku a případný vliv tht stavu na výsledek vyšetření). Drbné nedstatky v značení vzrku (překlepy, nesprávně uvedené jmén, ale suhlasící rdné čísl) jsu řešeny s indikujícím lékařem, prjednání je veden záznam na žádance s uvedením dpvědnéh pracvníka labratře. 4.3 VYŠETŘOVÁNÍ SMLUVNÍMI A SPOLUPRACUJÍCÍMI LABORATOŘEMI Labratř lékařské genetiky Sanatria Helis v sučasnsti nevyužívá služeb žádné smluvní labratře. Případná splupracující labratř (nejčastěji OLG PDM FN Brn a Genea Sydney) je vybírána v závislsti na typu pžadvanéh dplňujícíh vyšetření. Vzrky deslané d splupracujících labratří jsu evidvány v Knize deslaných vzrků a jsu vždy dprvázeny žádanku s infrmacemi typu vzrku a pžadvaném vyšetření. Zkntrlval: Mgr. Iva Slámvá STRANA 19 (CELKEM 26)

20 5. VYDÁVÁNÍ VÝSLEDKŮ A KOMUNIKACE S LABORATOŘÍ 5.1 HLÁŠENÍ VÝSLEDKŮ V KRITICKÝCH INTERVALECH LLG neprvádí vyšetření, pr která lze stanvit kritické intervaly výsledků. 5.2 VYDÁVÁNÍ VÝSLEDKŮ, TYPY NÁLEZŮ A LABORATORNÍCH ZPRÁV Všechna vyšetření prvedená labratří lékařské genetiky Sanatria Helis jsu uzavřena výsledkvým listem. Tent se liší dle prvedených vyšetření. Výsledkvá list LLG bsahuje: Identifikaci labratře (jmén a adresa) Identifikační údaje pacienta (jmén, rdné čísl, pjišťvna) Identifikační údaje žadatele (IČZ, pracviště) Označení vyšetření Datum a čas dběru primárníh vzrku Datum a čas přijetí žádanky a vzrku d labratře Datum uvlnění zprávy Typ primárníh vzrku Výsledky vyšetření Interpretace výsledků Pznámky k metdě (infrmace kvalitě vzrku) Pdpis pracvníka, který výsledek vydal a pdpis pracvníka, který výsledek schválil Závěrečné zprávy jsu vždy vydávány v tištěné pdbě, pdepsané právněným VŠ pracvníkem, který prvádí finální kntrlu správnsti výsledků a je tímt za správnst výstupu dpvědný. Každý tištěný výsledek, krmě pdpisu, bsahuje razítk labratře neb kntrlujícíh veducíh pracvníka VŠ s atestací. Výsledky splu se zápisem průběhu analýzy jsu uchvávány v písemné pdbě ve spisvně labratře a zárveň v elektrnické pdbě. Údaje pacientvi jsu přístupné puze pracvníkům labratře, kteří vyšetření prvádějí. Elektrnická databáze je pravidelně zálhvána a přístup k ní mají puze právnění pracvníci labratře pd heslem. Za chranu dat a jejich zálhvání dpvídá správce sítě, viz směrnice S-LLG-016 Prvz pčítačvé sítě. Zprávy jsu cytgeneticku labratří předávány puze žadateli, tedy lékaři právněnému pžadvat genetické vyšetření. Zkntrlval: Mgr. Iva Slámvá STRANA 20 (CELKEM 26)

21 Výsledky jsu žadatelům vydány v tištěné frmě, také jsu zapisvány d interní databáze pacientů Sanatria Helis PC-dktr. Lékařům pracujícím mim Sanatrium Helis jsu výsledky zasílány pštu dpručeným dpisem neb dručvány svzvu službu Sanatria Helis (sbní předání). Sdělvání výsledků telefnicky se neprvádí. Výsledky nejsu předávány přím pacientvi. Tištěná verze je rvněž předána lékařem pacientce jak sučást suhrnné zprávy léčebném IVF cyklu. 5.3 ZMĚNY VÝSLEDKŮ A NÁLEZŮ Pkud djde k nalezení chyby v již vydaném výsledku, veducí labratře známí tut skutečnst ihned indikujícímu lékaři a prvede vydání nvéh pravenéh výsledku. Dále se prvede prava výsledku ve všech databázích a spisvnách, ve kterých výsledky LLG uchvává. Půvdní frmulace výsledku je sučástí archivvanéh pravenéh nálezu. 5.4 INTERVALY OD DODÁNÍ VZORKU K VYDÁNÍ VÝSLEDKU Přijaté vzrky jsu vyhdncvány v přadí, ve kterém byly dručeny d labratře. Vzrky značené STATIM se zpracvávají a hdntí přednstně, výsledek vyšetření je lékaři sdělen neprdleně p dknčení vyšetření, ve lhůtě d 10 pracvních dní. Pkud nález vyžaduje další labratrní vyšetření pacienta jinu metdu, je v tmt termínu mžn vydat dílčí výsledek a lékař je infrmván dalším průběhu vyšetření. Karytyp z periferní krve 6-8 týdnů STATIM d 10 pracvních dnů ZCHA 6-8 týdnů STATIM d 10 pracvních dnů FISH D 10 pracvních dnů STATIM d 5 pracvních dnů PGD - FISH D 24 hd. - PGD PCR D 10 pracvních dnů - PGD acgh D 20 pracvních dnů - Při nálezu patlgickéh karytypu je v některých případech nutné dplnit klasicku cytgeneticku analýzu labratrním vyšetřením pmcí jiné metdy, buď v Sanatriu Helis, neb na jiném splupracujícím pracvišti. V tm případě lze vydat cytgeneticku labratří v uvedeném termínu dílčí výsledek a p bdržení dplňujících výsledků bude pak vydán knečný výsledek cytgenetické analýzy. Zkntrlval: Mgr. Iva Slámvá STRANA 21 (CELKEM 26)

22 5.5 ZPŮSOB ŘEŠENÍ STÍŽNOSTÍ Případné stížnsti na činnst labratře je mžn pdat písemně na adresu Sanatria Helis, elektrnicky na adrese telefnicky na tel.: , neb sbně. Všechny stížnsti řeší veducí labratře a infrmuje ředitele Sanatria Helis. Stížnsti lze pdávat z jakéhkliv důvdu, zejména na: Průběh a rzsah prvedenéh labratrníh vyšetření Termín vydání výsledku Výsledky labratrníh vyšetření Způsb jednání pracvníků Sanatria Helis Jiné důvdy Stížnst je vyřízena c nejdříve, nejpzději d 30 dnů. Výsledek sdělí veducí labratře písemně sbě, která stížnst uplatnila. Oprávněné stížnsti budu pdnětem pr zkvalitnění další práce v naší labratři. 5.6 KONZULTAČNÍ ČINNOST LABORATOŘE, VYDÁVÁNÍ POTŘEB LABORATOŘÍ Cytgenetická labratř v sučasné dbě nepskytuje labratrní knzultace. 5.7 SKLADOVÁNÍ VYŠETŘENÝCH VZORKŮ Z důvdu mžnéh kultivačníh neúspěchu a ptřeby pakvání kultivace se vzrek periferní krve v cytgenetické labratři uchvává následujících 7 dnů p dběru. Periferní krev se uchvává v chladničce při tepltě 2-10 C. P uplynutí tét dby jsu vzrky likvidvány, viz kapitla 9 - Likvidace bilgickéh dpadu a Prvzní-prtiepidemický řád (PPŘ). Primární vzrky pr PGD vyšetření nadále skladvány nejsu, prtže jsu kmpletně pužity pr analýzu. Pr případ ptřeby prvést pakvání vyšetření neb ddatečných vyšetření je uchváván vzrek zpracvaný (suspenze lymfcytů, izlvaná a amplifikvaná DNA) p dbu 1 měsíce d vydání závěrečné zprávy. Zkntrlval: Mgr. Iva Slámvá STRANA 22 (CELKEM 26)

23 6. SEZNAM LABORATORNÍCH VYŠETŘENÍ VČETNĚ POPISU Přehled prváděných vyšetření a příslušné standardní perační pstupy (SOP) Stanvení karytypu z periferní krve SOP-LLG-001 Stanvení hdnty ZCHA (získaných chrmzmálních aberací) z periferní krve Dplňující barvící techniky (C-pruhy, NOR-barvení) FISH Flurescenční In Situ Hybridizace PGD - FISH Preimplantační genetická diagnstika metdu FISH PGD - PCR Preimplantační genetická diagnstika metdu PCR PGD acgh Preimplantační genetická diagnstika metdu acgh SOP-LLG-002 SOP-LLG-003 SOP-LLG-010 SOP-LLG-011 SOP-LLG-012 SOP-LLG STANOVENÍ KARYOTYPU Princip metdy Při klasické cytgenetické analýze hdntíme pmcí mikrskpu pčet a strukturu chrmzmů získaných z T-lymfcytů pacienta. Periferní krev pacienta nejdříve hdin kultivujeme v kultivačním médiu, následně připravíme suspenzi vhdnu ke kapání na mikrskpická skla. Preparáty barvíme pmcí G-barvení (SOP-LLG-001), případně dplňujícími barvícími technikami (SOP- LLG-003) neb prvedeme FISH (SOP-LLG-010). Cytgenetická analýza prbíhá v suladu s mezinárdními nrmami ECA a dle nmenklatury ISCN 2009, hdntí se mitóz. Pkud je při nálezu patlgickéh karytypu třeba upřesnit nalezenu chrmzmální aberaci, jsme schpni zajistit vyšetření CGH, SKY, micrarray, MLPA neb mband na splupracujících pracvištích. Pžadavky na primární vzrek dběr periferní krve - zajišťuje lékař - klinický genetik Odebírá se žilní krev, 1-4 ml d jednrázvé sterilní dběrvé supravy bjemu 2,5-4 ml s náplní Lithium/heparin, ihned p dběru lehce prmíchat, nesmí se třepat! Zkntrlval: Mgr. Iva Slámvá STRANA 23 (CELKEM 26)

24 Skladvání debrané krve Zkumavka s krví se uchvává v ledničce při tepltě 2-10 C (nesmí zmrznut!). Odebranu krev je mžn skladvat za těcht pdmínek až pět dní, nejpzději d pěti dnů je třeba ji dpravit d labratře. Transprt vzrku d labratře Transprt prvádí zaměstnanci labratře, svz z jiných zařízení zajišťuje pvěřený a pršklený zaměstnanec Sanatria Helis firemním vzidlem. Vzrky musí být přepravvány v transprtní nádbě při tepltě 2 10 C (vhdná je termska) a ihned p dručení ulženy v ledničce při tepltě 2-10 C. Vzrek je přijat v labratři puze s řádně vyplněnu žádanku, neznačené vzrky neb vzrky bez žádanek nemhu být přijaty. 6.2 STANOVENÍ HODNOTY ZÍSKANÝCH CHROMOZOMÁLNÍCH ABERACÍ (ZCHA) Princip metdy Při stanvení hdnty získaných chrmzmálních aberací sledujeme pmcí mikrskpu pčet aberantních buněk v periferní krvi pacienta. Pstup přípravy mikrskpických preparátů je bdbný, jak u stanvení karytypu z periferní krve, puze dba kultivace periferní krve je v tmt případě 48 hdin a k hdncení se pužívají nepruhvané preparáty (SOP-LLG-002). Hdntíme 100 buněk. Pžadavky na primární vzrek Pžadavky jsu stejné jak u vzrků periferní krve pr stanvení karytypu. Pkud je debrané mnžství krve dstatečné - alespň 2ml, lze stanvení ZCHA a karytypu prvést z téhž vzrku periferní krve. 6.3 FISH VYŠETŘENÍ Princip metdy Flurescenční In Situ hybridizace je mlekulárně cytgenetická metda zalžena na hybridizaci flurescenčně značené DNA sndy na cílvé míst analyzvané DNA na principu kmplementarity. Pužívá se především k dplnění a upřesnění nálezu cytgenetickéh vyšetření. Labratř pužívá kmerční centrmerické FISH sndy. (SOP-LLG-010) Zkntrlval: Mgr. Iva Slámvá STRANA 24 (CELKEM 26)

25 6.4 PGD FISH Princip metdy V PGD nám FISH metda pskytuje infrmace numerických chrmzmálních aberacích aneuplidiích zastupených v buňkách embrya. Je zpravidla pužívána pětibarevná kmerční snda, detekující chrmzmy 13, 18, 21 a X, Y. Aneupldie těcht chrmzmů jsu nejčastějšími příčinami vývjvých vad. Tt vyšetření může být případně rzšířen detekci chrmzmů 16 a 22, jejichž aneuplidie bývají častými příčinami abrtů. (SOP-LLG-011). FISH metda se rvněž využívá k detekci translkací. Umžňuje nám dlišit embrya s nebalancvanu frmu translkace d embryí bez translkace a embryí s balancvanu translkací. Pužívají se kmbinace 2-3 lkus-specifických, telmerických a centrmerických snd navržených specificky pr každý případ. (SOP-LLG-011) 6.5 PGD PCR - VYŠETŘENÍ MONOGENNÍCH CHOROB Princip metdy PGD-PCR je určen k vyšetření embryí partnerů pdstupujících IVF, v jejichž rdině byl diagnstikván knkrétní mngenní nemcnění (děděné autzmálně dminantně, recesivně neb vázané na phlaví). Principem metdy je kmbinace přímé analýzy vlastníh místa genvé alterace a segregační nepřímé DNA diagnstiky na základě vyšetření plymrfních mikrsatelitních markerů předem charakterizvaných v rdině nsiče genvé alterace. Labratrně se využívá PCR technika s kmerčně dstupnými primery, fragmentační analýza a sekvence. (SOP-LLG-012) 6.6 PGD ACGH COMPARATIVNÍ GENOMOVÁ HYBRIDIZACE Princip metdy acgh je metda zalžená na kvantitativní dvubarevné flurescenční in situ hybridizaci, kdy rzdílné genmy (testvaný a kntrlní) jsu p izlaci DNA značeny různými flurchrmy, hybridizvány na DNA mikrčipu a pak hdnceny. Sftware kvantifikuje změny v testvaném genmu na základě prvnání flurescenčních intenzit. Tat metda nám umžňuje identifikvat kvantitativní změny (zisky a ztráty materiálu) v celém genmu testvaných embryích získaných v rámci IVF cyklu, prti FISH metdě nám tedy dává mnhem více infrmací genetickém statusu testvanéh embrya (viz SOP-LLG-013). Zkntrlval: Mgr. Iva Slámvá STRANA 25 (CELKEM 26)

26 7. POKYNY PRO SPOLUPRACUJÍCÍ LÉKAŘE Infrmace dběrech viz ddíl 3 Infrmace vydávání výsledků v ddíle 5 Kntakty viz ddíl 2.1 LLG má své vlastní žádanky, které na pžádání ddáme, lze však pužít i běžný Pukaz na vyšetření/šetření typ K, pkud bude dplněn pžadvanými infrmacemi definvanými v bdu POKYNY PRO PACIENTY Infrmvané suhlasy před genetickým vyšetřením viz ddíl DALŠÍ INFORMACE 9.1 LIKVIDACE BIOLOGICKÉHO MATERIÁLU Nebezpečný dpad Veškerý dpad se ihned třídí v místě vzniku a separuje d vhdných přepravních balů. Nebezpečný dpad se ukládá d barevných přepravních balů, drbný dpad, včetně jednrázvých jehel, se ukládá d pevnstěnných, uzavíratelných a spalitelných balů bez další manipulace. Tyt baly jsu značeny na viditelném místě štítky s katalgvým číslem, názvem shrmažďvanéh dpadu, značením půvdce, jménem zdpvědné sby za bsluhu a údržbu shrmažďvanéh dpadu a datem vzniku. Odpad je denně dnášen z pracviště pracvníky úklidu d vyčleněné místnsti, která služí pr shrmáždění nebezpečnéh dpadu. Tat místnst je uzamčená a zabezpečená před vlným přístupem veřejnsti. V tét místnsti je chladicí bx, který splňuje pžadavek ddržení teplty v rzmezí mezi +3 až +8 C, (teplta se denně sleduje a eviduje). Hrní tevírání chladícíh bxu zajišťuje bezpečnější ukládání infekčníh dpadu. Chladící bxy jsu patřené zámkem. Odvz je zajištěn d smluvní firmu TEPAS s.r.. Družstevní 221, Adamv, v intervalu 1x týdně. Firma má pr dvz a nakládání s nebezpečnými dpady všechna legislativu vyžadvaná pvlení 10. PŘÍLOHY Přílha č. 1 Přílha č. 2 Přílha č. 3 Přílha č. 4 Seznam kódů schválený VZP Rzdělvník a záznamy revizích Seznámení se s dkumentem Histrie dkumentu Zkntrlval: Mgr. Iva Slámvá STRANA 26 (CELKEM 26)