Next Generation Sequencing v klinické genetice, Iveta Valášková,
|
|
- Alžběta Kašparová
- před 5 lety
- Počet zobrazení:
Transkript
1 Next Generation Sequencing v klinické genetice, Iveta Valášková,
2 Sekvenování je v tomto oboru nepostradatelné Cílem molekulární diagnostiky je přinést v krátké době správné a přesné výsledky, které lékař použije k cílené léčbě.
3 Vývoj sekvenačních metod za posledních 30 let Stratton et al Nature 458:
4 Kapilární sekvenování Příprava DNA fragmetnů. Fragmenty DNA se připravují jednotlivě (PCR amplifikace či klonování). Sekvenace jednotlivých DNA fragmentů. Možnost paralelní sekvenace max. 96 sekvencí v jednom běhu (96 kapilárové sekvenátory) Délka získané sekvence cca 650 bp. Max. sekvenační výtěžek jednoho běhu cca 60 kb
5 Sekvenování nové generace ( next-generation sequencing, NGS) Revoluční technologie. Poskytuje levné, správné a přesné informace o genomické sekvenci. Tato technologie od svého uvedení postupně téměř ovládla oblast základního či aplikovaného výzkumu zabývajícího se analýzou DNA.
6 Sekvenování nové generace ( next-generation sequencing, NGS) (massivelly parallel sequencing) Fragmentace DNA. PCR se provádí paralelně pro všechny fragmenty DNA Paralelní sekvenování několika miliónů sekvencí. Délka získaných sekvencí cca bp. Sekvenační výtěžek jednoho běhu několik až několik tisíc Gb (o 4 až 6 řádů vyšší než u kapilárního sekvenování). Cena sekvenace za bázi o řád až dva nižší než u kapilárního sekvenování.
7 Sekvenování nové generace ( next-generation sequencing, NGS) Humánní genom Celogenomové - de novo - resekvenování Exomové Transkriptonové Cílené sekvenování amplikonové sekvenování ultra-široké - ultra-hluboké - Hybridization based capture Non-humánní genom člověk Metagenomické studium mirobiálního složení v různých typech prostředí střevní mikroflóra, zubní plak.
8 Nyní NGS vstupuje i do klinické diagnostiky. Jedná se zejména o aplikace, kde se vyžaduje velké množství sekvenačních informací případně vysoká citlivost. Pro diagnostické účely zatím není požadováno celogenomové nebo exomové sekvenování, které se v medicíně používá především pro výzkumné účely. V současné době sekvenování v klinické diagnostice znamená sekvenování v malém rozsahu zaměřené na analýzu jednotlivých genů nebo vybraných skupin genů asociovaných s konkrétním onemocněním. Pro splnění těchto požadavků jsou vhodné tyto postupy: amplikonové sekvenování sekvenování vybraných úseků DNA získaných na základě hybridizace sond komplementárních k cílové sekvenci (hybridization-based capture sequencing, Hyb-Seq) Liší se tvorbou knihovny cílové DNA
9 NGS Amplikonové sekvenování Amplikonové sekvenování
10 Tvorba knihovny
11 Amplikonové sekvenování Příprava knihovny amplikonů může probíhat třemi způsoby záchytu vybrané oblasti pomocí fúzních primerů je nejjednodušším a zároveň nejlevnějším postupem jsou primárně vhodné pro experimenty s nižším počtem sekvenovaných amplikonů a vzorků, protože každý amplikon vyžaduje syntézu svého specifického páru primerů (+)MID (-)MID využití již existujících amplikonů, které vznikly amplifikací s normálními primery. Na takto vzniklé amplikony se poté připojí tzv. Y adaptory. Tyto adaptory jsou podobné fúzním primerům. Obsahují sekvenci komplementární k mikrokuličkám, která se naváže na templát, a mohou také obsahovat MID. Tento přístup je obzvlášť vhodný, pokud je možné připravit více amplikonů pomocí páru jednoduchých primerů, v případě většího množství amplikonů či vzorků je však tento postup dražší a složitější MASTR assay (z anglického Multiplex Amplification of Specific Targets for Resequencing ) produkt firmy Multiplicon ( lze redukovat množství specifických primerů, neboť je prováděna dvoukroková mnohonásobná PCR. V prvním kroku jsou použity primery složené z univerzální sekvence a sekvence komplementární k templátu. To vyžaduje jen tolik párů primerů, kolik bude sekvenováno druhů amlikonů. V druhém kroku PCR jsou poté použity fúzní primery s MID, které cíleně nasedají na univerzální sekvenci z předchozího kroku. To sníží množství použitých specifických fůzních primerů na počet odpovídající počtu sekvenovaných vzorků. Celkově tedy MASTR assay vyžaduje pouze tolik párů primerů, kolik činí součet všech amplikonů a vzorků v experimentu. Je vhodné využít při větším množství vzorků
12 Ultra-hluboké sekvenování využívá přípravu knihovny amplikonů, kde jsou amplifikovány a sekvenovány cílené geny nebo oblasti genů. Tato metoda nabízí dostatečně velkou hloubku pokrytí čteného fragmentu, Aby bylo možno identifikovat i sekvenční varianty s frekvencí nižší než 1 % v analyzovaném vzorku To je možné díky tomu, že každý zmnožený fragment je sekvenován zvlášť Nachází své uplatnění tam, kde je nutné detekovat mutace, které se vyskytují ve vzorku v malém počtu amplikonů (mozaicismus, somatické mutace). Ultra-široké sekvenování Využívá přípravu knihovny amplikonů a pomocí hybridizace s komplementárními sondami (Hybridization-based capture sequencing-seqcap) Hledá varianty s vyšší frekvencí výskytu ve velkém počtu vzorků najednou Například se může jednat o detekci heterozygotní ch SNP (jednonukleotidový polymorfismus; z anglického Single Nucleotide Polymorfism ) ve velké skupině exonů. To umožňuje za krátký čas analyzovat vzorky od většího množství pacientů. Výsledky ukázali, že ultraširoké sekvenování má 30x větší pokrytí než klasická Sangerova metoda s pouze 0,05 % falešně pozitivních výsledků.
13 Hybridization-based capture sekvenování K získání vybraných úseků z fragmentované celkové DNA, jsou používány sondy komplementární k cílové sekvenci Hybridizační sondy označeny biotinylovanou značkou a po navázání vybraného úseku DNA jsou připojeny na mikrokuličky pokryté streptavidinem. Po uvolnění fragmentů lze vybraný úsek sekvenovat. Pro větší efektivitu bývá použito několik cyklů zachycení
14 Masivně paralelní sekvenování probíhá ve dvou následných postupech: 1. Oddělení a namnožení jednotlivých fragmentů nukleových kyselin zajištěn pomocí emulzní PCR (empcr) nebo amplifikací ve shlucích empcr dochází k vytvoření tzv. mikroreaktorů, vytvořených v olejové emulzi. Mikroreaktory obsahují složky pro normální PCR reakci (nukleotidy, enzym polymeráza, primery) a mikrokuličky s navázaným fragmentem nukleové kyseliny. dochází ke klonální amplifikaci všechny molekuly DNA vytvořené v mikroreaktoru pochází z jediné molekuly templátu. Na konci empcr k mikrokuličce přichyceno v průměru 10 milionů identických kopií původní jednořetězcové DNA. 2. Čtení sekvence u dostupných platforem NGS řešena dvěma metodami: sekvenováním syntézou ( sequencing by synthesis ), které používá např. platforma 454 sekvenování a sekvenováním založeném na ligaci ( ligation based sequencing ) používaným platformou Solid ( Sequencing by Oligo Ligation and Detection ).
15 Platforma 454 (2005) využívá k namnožení DNA empcr a sekvenci DNA čte pomocí pyrosekvenování.
16 454 Genome Sequencers FLX System 1 million reads/run bp/read GS Junior 0.1 millions reads/run 400 bp/read
17 Solexa-Illumina (2007) Můstková bridge PCR Sekvenování pomocí DNA syntézy 1. Navázání jednořetězcových fragmentů k destičce ( the flow cell ), jejiíž povrch je pokryt oligonukleotidy komplementárními k oběma typům adaptérů. Můsková amplifikace 2. Přidání neznačených nukleotidů a enzymů.po přidání enzymů dochází k ohnutí fragmentu. 3. Enzymy inkorporují neznačené nukleotidy a staví dvouřetězcové mosty na solid phase substrátu. Tento proces je také nazýván jako tzv. vytváření shluků ( cluster generation ). Dochází ke klonování každého fragmentu knihovny a výsledkem této izotermické amplifikace je sto milionů jedinečných svazků. 4. V závěru můstkové amplifikace dochází na konci každého úseku DNA k navázání primeru. 5. V průběhu sekvenování se připojují 4 značené terminátory (T,A,G,C), po laserové excitaci je emitují fluorescenci z každého shluku na flow cell 6. Opakováním cyklů sekvenování je determinována sekvence bazí fragmentu
18 Illumina sequencers Illumina MiSeq 4 millions reads/run 150bp/read Illumina GAIIX 300 millions reads/run 150bp/read Illumina HighSeq millions reads/run 100bp/read
19 Solid (2008) Emulzní PCR Sekvenování pomocí ligace
20 Solid sequencer Solid 5500xl 1500 millions reads/run 75bp/read
21 Další sekvenační metody nové generace Ion Torrent (2010) Sekvenování na polovodičovém čipu Pacific Bioscience (2010) Single molecul real- time sequencing Není třeba PCR Sekvence čtena přímo při procesu replikace DNA pomocí DNA polymerázy používající fluorescenčně značené nukleotidy Dlouhé sekvence ( bp) Oxford Nanopore (2012) Single molecul sequencing Báze DNA jsou určeny na základě elektrické vodivosti při průchodu nanopórem
22 GS Junior System je představitelem laboratorního sekvenátoru, který přináší všechny výhody sekvenování nové generace ( next-generation sequencing, NGS) je založen na ověřené 454 technologii pyrosekvenování umožňuje velmi rychle (za cca. 12 hodin) osekvenovat stovky úseků DNA pocházejících od různých pacientů čtení v jednom běhu 35 milionů bazí v jednom běhu
23 Kritická místa
24 Příprava knihovny 1.Vzorek genomové DNA rozštěpen do krátkých ( bp) fragmentů. Vzorek DNA je vložen do nebulizéru, ve kterém je DNA řetězec vlivem stlačeného vzduchu (220,6 kpa po dobu 6 minut) rozdělen na menší fragmenty Nebulizace je reprodukovatelná technika, která není závislá na sekvenci DNA a zároveň je rychlá a levná. Pro menší vzorky jako např. malé nekódující RNA nebo amplikony PCR není nutná fragmentace. 2. Konce fragmentů jsou opravovány enzymatickou reakcí. 3. Příprava DNA knihovny. Mezi standardní molekulárně biologické techniky patří specifické připojení krátkých adaptérů A a B na 3 a 5 -konec každého odděleného úseku DNA. Adaptéry jsou důležité pro čištění, amplifikaci a sekvenaci
25 kapilára Kalibrační přímka koncentrace standardu ng/µl fluorescence Kvantifikace knihovny vzorky fluorescence koncentrace ng/µl x 100 Délky (bp) počet molekul v µl µl TE E Hodnoty fluorescence vzorků, vypočítané koncentrace, počet molekul v μl a množství TE pufru pro dosažení koncentrace 10 9 kopií/μl. Koncentrace a hodnoty fluorescence standardů
26 Kontrola obohacení cílové sekvence Hybridization-based capture sequencing-seqcap Model analýzy kontroly obohacení cílové sekvence pomocí qpcr. Data QF PCR kontroly obohacení generovaná LightCycler 480 Instrument. Pro oblast cílové sekvence hodnoty Cp z QF PCR z amplifikované zachycené cílové DNA (CAP-Cp RYR1 ) byly signifikantně nižší než hodnoty Cp z QF PCR amplifikované knihovny vzorků fragmentované celkové DNA (NON-Cp RYR1 ). Naopak pro oblast kontrolní hodnoty Cp z QF PCR amplifikované zachycené DNA CAP-Cp NF1 ) byly signifikantně vyšší než hodnoty Cp z QF PCR amplifikované knihovny vzorků fragmentované celkové DNA (NON-Cp NF1 ).
27 Výsledek emulzní PCR Doporučené množství pro sekvenování na GS Junior je obohacených kuliček. Stanovení množství obohacených kuliček bylo provedeno pomocí počítače GS Junior Bead Counter. Spodní okraj okna počítače definuje kuliček a horní hrana definuje kuliček. V okénku počítače u dolní rysky byl vidět vrch peletky navázaných kuliček, což ukazuje, že množství obohacených kuliček je dostačující pro sekvenaci (cca obohacených kuliček).
28 A B C A Graficky znázorněný průběh pyrosekvenační reakce B Záznam CCD kamery, zeleně svítí jamky, kde probíhá sekvenační reakce C detail záznamu CCD kamery
29 Kontrola počtu čtení jednotlivých vzorků
30 Vedlejší škody NGS: způsobuje obrovské hromadění dat, vyžadující výpočetní biology a bioinformatiky
31 Analýza dat Sekvenační jsou byla analyzována pomocí softwaru Sequence Pilot (SeqNext module, JSI Medical Systems).
32 Autosomálně dominantní Frekvence 1:3000 Lokus 17q 50% mutací de novo Neurofibromatoza typu 1 von Recklinhausen disease Predispozice k tumorům nervového systému NF1 gen kb - 60 exonů kb mrna Protein neurofibromin aminokyselin - tumor supresor Lisch nodule Café-au- lait spots Neurofibromy absence hot spot oblastí - nutnost vyhledávání mutací v celém genu
33 Amplikonové sekvenování Neurofibromatosa typu 1 - Testováno 9 pacientů v jednom běhu - Průměrné pokrytí exonů je 44 z 58 - Záchyt kauzální mutace u 66% pacientů z 45 analyzovaných - U pacientů bez nálezu mutace bylo sekvenováno zbývajících 9 exonů metodou Sangerova sekvenování, mutace nebyla nalezena Všechny mutace objevené sekvenováním byly potvrzeny klasickou sekvenací
34 Srovnání finančních nákladů Sangerova metoda x NGS Sanger NGS univerzální adaptor fúzní primery
35 Retinoblastom zhoubný nádor oka, pocházející z primitivních buněk sítnice incidence 1/5 000 až 1/ živě narozených dětí manifestace do 5-ti let věku projevy: ztráta zrakové ostrosti, strabismus, leukokorie, slepota, zvětšování oka, zarudnutí, otok postižení: oko, mozek, mícha (může se šířit do CNS přes opticus) léčba: chemoterapie, lokální terapie (kryoterapie, nitrooční podání cytostatik), enukleace oka (oko je už většinou slepé, jde o život zachraňující výkon) úspěšnost léčby při zahájení: nádor uvnitř oka 95% mimo oblast oka 10%
36 Gen RB1 jediný známý gen asociovaný se vznikem retinoblastomu (RBL) lokalizace - 13q exonů, >180kb genomické DNA kóduje retinoblastomový tumorsupresorový protein,(prb,928 aa), významný negativní regulátor buněčného cyklu tumor-supresorová aktivita mutace RB1 gen inaktivace ztráta deregulace buněčného cyklu vznik retinoblastomu
37 Retinoblastom metodou sekvenování Porovnání výsledků pomocí Sangerova sekvenování versus sekvenování nové generace na přístroji GS JUNIOR Pacient Rb1 na cdna (iz. z PK) nebyla zachycena mutace pomocí Sangera na DNA (iz. z PK) mutace zachycena pomocí Sangera na DNA i cdna (iz. z PK) zachycena mutace pomocí GS JUNIOR!!!
38 Retinoblastom metodou Sangerovo sekvenování RB1 gen: p.[r255x]+[=], c. [763C>T]+[=] DNA cdna
39 Retinoblastom metodou sekvenování DNA
40 cdna Retinoblastom metodou sekvenování cdna
41 RNA-antisense decay
42 Cystická fibróza U nás jedno z nejčastějších dědičných onemocnění s přibližným výskytem dle nových poznatků 1 na 5000 novorozených dětí. Onemocnění postihuje dýchací a zažívací systém postižených jedinců a je charakteristické tvorbou abnormálně hustého hlenu v těchto orgánech. Molekulární podstata choroby porucha v transportu iontů chlóru, sodíku a vody přes apikální membránu specializovaných epiteliálních buněk
43 CFTR gen lokalizován na chromozomu 7 (7q31) 250 kb dlouhý 27 exonů cdna sekvence dlouhá 6129 bp kóduje 1480 aminokyselin CFTR proteinu
44 Cystická fibróza Scoring nejčastějších mutací SSCP s pozitivními kontrolami analýza teploty tání s pozitivními kontrolami PCR s primery ohraničujícími předpokládané delece v DNA hybridizace PCR produktu s alelově specifickými oligonukleotidy PCR s alelově specifickými primery (ARMS test) Scanning raritních mutací jednořetězcový konformační polymorfismus (SSCP) denaturační gradientová elektroforéza analýza teploty tání sekvenování
45 Multiplex Amplification of Specific Targets for Resequencing (MASTR) using NGS Technolgy Mutační analýza CFTR genu sekvenací multiplexů za využití platformy NGS MASTR kombinace PCR primerů v ready-to-use kit,
46 The output of the software JSI, group evaluation (pool).
47 Coverage analysis Coverage for bp Average mean run run run Coverage for MIDs (MID1 MID8) run run run 3 MID
48 Detected sequence changes in CFTR gene false positive true positive homopolymers CF causal mutation Variant Novel sequence change
49 Workflow NGS for analyzing CFTR DNA Next Generation Sequencing Target enrichment (CFTR MASTR Multiplicon) Target resequencing (454 Titanium Chemistry, GS Junior Roche) Data analysis Variant report Coverage report Filtering deletion and insertion in homopolymers coverage > 25 forward coverage or reverse coverage = 0. Coverage >25 Visual inspection Sanger sequencing
50 Variants in homopolymer sequences Mutation 2184delA wasn t detected, lies in 7-mer homopolymer tract
51 CFTRdele2,3(21kb) 1, , Exon calibrator Normalized amplicon valuee = Normalized amplicon valuee 0, , ,5 0, amplicon reads MID reads amplicon reads MID reads Exon calibrator sample calibrator calibrators samples without 21kb deletions 0,5
52 Novel mutations c.2537_2547delinstcggtcacaagag, p.w846fs* c.729g>a, p.m243i c.2863t>c, p.s955p c.2537_2547delinstcggtcacaagag, p.w846fs* c.2863t>c, p.s955p
53 Sequence variation may be predicted to cause CF if: it introduces a premature termination signal (insertion, deletion or nonsense mutation) it alters the invariant nucleotide of intron splice sites absence of the sequence change from 100 control samples for exclusion of polymorphisms the sequence variant changes a highly evolutionarily conserved amino acid residue the sequence variation creates a novel/cryptic splice site Indirect evidence that a CFTR sequence variations does not cause CF is: the other allele is carrying a well know CF-causing mutation in a clearly asymptomatic individual a silent exonic sequence variation, without a priori splicing modification an intronic sequence variation outside the known consensus sites and which does not create a splicing site frequency in the general population equal to or above 0.4% Castellani et al, 2008
54 Nová mutace c.2537_2547delins
55 Nová missense mutace c.2863t>c, p. S955P
56 nová missense mutace c.2863t>c, p. S955P. p.[f508del]+[=] p.[=]+[s955p] p.[=]+[s955p] p.[f508del]+[s955p]
57 Maligní hypertermie exprimace život pacienta bezprostředně ohrožující komplikace celkové anestezie potenciálně letální farmakogenetická choroba manifestuje se na základě geneticky podmíněné dispozice s autozomálně dominantní dědičností po expozici tzv. vyvolávajících substancí. chromozom 19 poloha 19q13.1 počet exonů 106 velikost RYR 1 v kosterním svalstvu 15376nt počet AK v proteinu 5032 Za hlavní příčinu je považována porucha funkce ryanodinového receptoru RYR1 sval se změněnou funkcí RYR1 - vnímavý sval hmotnost proteinu 563,5kD
58 Mutační analýza genu RYR1 Mutace asociované s MH jsou nahromaděny ve třech mutačních hot spot oblastech. a Tetramerická struktura RYR uvolňujícího kanálu s membránovou topologií vyznačené v jedné podjednotce. b Distribuce více než 300 mutací asociovaných s MH (převzato Betzenhauser & Marks, 2010). Metody Scanning Mutační analýza hot spot RYR1 genu pomocí sekvenování na úrovni genomické DNA Mutační analýza hot spot RYR1 genu pomocí sekvenování na úrovni cdna Scoring Detekce mutací pomocí analýzy teploty tání MLPA
59 Maligní hypertermie Byly analyzovány celé kódující oblasti a přilehlé intronové oblasti (50bp) genu RYR1 na chromosomu 19 v oblasti 19:38,924,339-39,078,204 a genu CACNA1S na chromosomu 1 v oblasti 1: Celková délka analyzované oblasti je bp.
60 Kalkulace Hybridization-based capture sekvenování genu RYR1 a CACN1S Kat. číslo Produkt cena s DPH počet reakcí cena s dph počet knihoven v cena s dph v balení za 1 reakci jednom běhu použité v běhu Příprava knihovny - produkty Roche SeqCap EZ Developer Library 4 Reaction SeqCap EZ Hybridisation and wash kit 24 rxn GS Rapid Library Prep Kit GS Rapid Library MID Adap. Kit COT Human DNA, Fluorometric Grade 11929, FastStart HiFi PCR System, dntpack 5190, LightCycler 480 SYBR Green I Master 12617, Příprava knihovny - produkty třetích stran Dynabeads M-270 Streptavidin (Invitrogen) 9, ml Drobný materiál: 0 NA qpcr QC oligos 0 NA Blocking oligos HE (IDT) NA LM PCR oligos A63881 Agencourt AMPure XP Kit (Beckmann) ml QIAquick PCR Purification Kit (Quiagen) , , Agilent DNA 7500 Kit (Agilent) ,5 není potřeba NA Acetic Acid, glacial (Fisher scientific) 787, , Sekvenování - produkty Roche GS Junior Titanium empcr Kit (Lib-L) GS Junior Titanium PicoTiterPlate Kit GS Junior Titanium Sequencing Kit Celkem celkem cena za 1 vzorek s 21% DPH
61 Výstup s hodnotícího softwaru JSI, skupinové hodnocení (pool).
62 Výstup s hodnotícího softwaru JSI, detekce mutace p ma >IS v genu CACN1S.
63 Výstup s hodnotícího softwaru JSI, sekvenční změna v homopolymeru
Sekvenování nové generace. Radka Reifová
Sekvenování nové generace Radka Reifová Prezentace ke stažení www.natur.cuni.cz/zoologie/biodiversity v záložce Přednášky 1. Přehled sekvenačních metod nové generace 2. Využití sekvenačních metod nové
VíceSekvenování nové generace. Radka Reifová
Sekvenování nové generace Radka Reifová Prezentace ke stažení www.natur.cuni.cz/zoologie/biodiversity v záložce Přednášky 1. Přehled sekvenačních metod nové generace 2. Využití sekvenačních metod nové
VíceMgr. Veronika Peňásová vpenasova@fnbrno.cz Laboratoř molekulární diagnostiky, OLG FN Brno Klinika dětské onkologie, FN Brno
Retinoblastom Mgr. Veronika Peňásová vpenasova@fnbrno.cz Laboratoř molekulární diagnostiky, OLG FN Brno Klinika dětské onkologie, FN Brno Retinoblastom (RBL) zhoubný nádor oka, pocházející z primitivních
VícePŘEHLED SEKVENAČNÍCH METOD
PŘEHLED SEKVENAČNÍCH METOD Letní škola bioinformatiky 2014, Brno Ing.Matej Lexa, Phd (FI MU Brno) CO JE TO SEKVENACE A CO SE BUDE SEKVENOVAT? POŘADÍ NUKLEOTIDU V DNA SEKVENOVÁNÍ DNA od manuálních metod
VíceElektroforéza Sekvenování
Elektroforéza Sekvenování Výsledek PCR Elektroforéza V molekulární biologii se používá k separaci nukleových kyselin a bílkovin Principem je pohyb nabitých molekul v elektrickém poli Gelová, polyakrylamidová
VíceVyužití Sequence Capture v diagnostice svalových onemocnění
Využití Sequence Capture v diagnostice svalových onemocnění Kristýna Stehlíková Daniela Skálová Lenka Fajkusová Centrum molekulární biologie a genové terapie IHOK, FN Brno Sekce vrozených genetických poruch
VíceVýzkumné centrum genomiky a proteomiky. Ústav experimentální medicíny AV ČR, v.v.i.
Výzkumné centrum genomiky a proteomiky Ústav experimentální medicíny AV ČR, v.v.i. Systém pro sekvenování Systém pro čipovou analýzu Systém pro proteinovou analýzu Automatický sběrač buněk Systém pro sekvenování
VíceEKONOMICKÉ ASPEKTY GENETICKÝCH VYŠETŘENÍ. I. Šubrt Společnost lékařské genetiky ČLS JEP
EKONOMICKÉ ASPEKTY GENETICKÝCH VYŠETŘENÍ I. Šubrt Společnost lékařské genetiky ČLS JEP Lékařská genetika Lékařský obor zabývající se diagnostikou a managementem dědičných onemocnění Genetická prevence
VíceSekvenování příští generace (Next Generation Sequencing, NGS)
Sekvenování příští generace (Next Generation Sequencing, NGS) Přednáška 6, 2013/14 Ivo Papoušek Next generation sequencing poptávka po nízkonákladovém sekvenování vyvolala tlak na vývoj high-throughput
VíceInovace studia molekulární a buněčné biologie
Investice do rozvoje vzdělávání Inovace studia molekulární a buněčné biologie Tento projekt je spolufinancován Evropským sociálním fondem a státním rozpočtem České republiky. Investice do rozvoje vzdělávání
VíceMasivně paralelní sekvenování
Boris Tichý Sdílená laboratoř Genomika Brno, 4. 12. 2014 Informace je uložená v DNA Informace uložená jako sekvence bazí A, C, G, T V každé lidské buňce je ~ 3 miliardy bazí = ~ 3 metry = ~ 6.6 pikogramů
VíceMasivně paralelní sekvenování
Boris Tichý Sdílená laboratoř Genomika Brno, 9.10.2015 Informace je uložená v DNA Informace uložená jako sekvence bazí A, C, G, T V každé lidské buňce je ~ 3 miliardy bazí = ~ 3 metry = ~ 6.6 pikogramů
VíceOndřej Scheinost Nemocnice České Budějovice, a.s.
Ondřej Scheinost Nemocnice České Budějovice, a.s. Nové technologie přelomové období principy technologií klinická použitelnost chips (arrays) sekvenační technologie Důležitost genetických informací i další
VíceInovace studia molekulární a buněčné biologie
Investice do rozvoje vzdělávání Inovace studia molekulární a buněčné biologie Tento projekt je spolufinancován Evropským sociálním fondem a státním rozpočtem České republiky. Investice do rozvoje vzdělávání
VíceMOLEKULÁRNÍ BIOLOGIE. 2. Polymerázová řetězová reakce (PCR)
MOLEKULÁRNÍ BIOLOGIE 2. Polymerázová řetězová reakce (PCR) Náplň praktik 1. Izolace DNA z buněk bukální sliznice - izolační kit MACHEREY-NAGEL 2. PCR polymerázová řetězová reakce (templát gdna) 3. Restrikční
VíceMolekulární genetika
Molekulární genetika Genetické inženýrství Technologie rekombinantní DNA Vektor Genomová DNA Štěpení RE Rozštěpení stejnou RE, lepivé konce Ligace Transformace Bakteriální chromozóm Rekombinantní vektor
VíceInovace studia molekulární a buněčné biologie reg. č. CZ.1.07/2.2.00/
Inovace studia molekulární a buněčné biologie reg. č. CZ.1.07/2.2.00/07.0354 Genomika (KBB/GENOM) Sekvenování genomů Ing. Hana Šimková, CSc. Cíl přednášky - seznámení se strategiemi celogenomového sekvenování,
VíceNGS analýza dat. kroužek, Alena Musilová
NGS analýza dat kroužek, 16.12.2016 Alena Musilová Typy NGS experimentů Název Materiál Cílí na..? Cíl experimentu? amplikon DNA malý počet vybraných genů hledání variant exom DNA všechny geny hledání
VíceVyužití molekulárních markerů v systematice a populační biologii rostlin. 11. Next generation sequencing (NGS)
Využití molekulárních markerů v systematice a populační biologii rostlin 11. Next generation sequencing (NGS) Next generation sequencing (NGS) první generace Sangerovo sekvenování další generace paralelní
VíceMolekulárně biologické metody princip, popis, výstupy
& Molekulárně biologické metody princip, popis, výstupy Klára Labská Evropský program pro mikrobiologii ve veřejném zdravotnictví (EUPHEM), ECDC, Stockholm NRL pro herpetické viry,centrum epidemiologie
VíceInovace studia molekulární a buněčné biologie reg. č. CZ.1.07/2.2.00/
Inovace studia molekulární a buněčné biologie reg. č. CZ.1.07/2.2.00/07.0354 Genomika (KBB/GENOM) Analýza transkriptomu Ing. Hana Šimková, CSc. Cíl přednášky - seznámení s moderními metodami komplexní
VíceSekvenování DNA. stanovení pořadí nukleotidů v molekule DNA (primární struktury)
Sekvenování DNA stanovení pořadí nukleotidů v molekule DNA (primární struktury) Sekvencování / Sekvenování?? Sequencing / - die Sequenzierung / - Klasické techniky sekvenování 2 metody: Chemická (Maxamova-Gilbertova)
VíceLaboratoř sekvenace DNA Servisní laboratoř biologické sekce PřF UK
Laboratoř sekvenace DNA Založena 2003, momentálně jsme 2 zaměstnankyně, máme dvě spolupracovnice na DPP a jsme finančně soběstačné, včetně platů. Rok Počet sekvenací Počet fragmentací 2009 10 700 8 100
VíceCystická fibróza. Iveta Valášková ivalskova@fnbrno.cz. Fakultní nemocnice Brno Oddělení lékařské genetiky
Cystická fibróza Iveta Valášková ivalskova@fnbrno.cz Fakultní nemocnice Brno Oddělení lékařské genetiky Cystická fibróza nejčastěji se vyskytující autozomálně recesivní dědičná metabolická porucha v zakavkazské
VíceDIAGNOSTICKÝ KIT PRO DETEKCI MINIMÁLNÍ REZIDUÁLNÍ CHOROBY U KOLOREKTÁLNÍHO KARCINOMU
Úvod IntellMed, s.r.o., Václavské náměstí 820/41, 110 00 Praha 1 DIAGNOSTICKÝ KIT PRO DETEKCI MINIMÁLNÍ REZIDUÁLNÍ CHOROBY U KOLOREKTÁLNÍHO KARCINOMU Jednou z nejvhodnějších metod pro detekci minimální
VíceUniverzita Karlova v Praze
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Studijní program: Zdravotnická bioanalytika Katedra biochemických věd PŘÍNOS NEXT GENERATION SEQUENCING PRO LABORATORNÍ DIAGNOSTIKU Diplomová
VíceSekvenace aplikace ve virologické diagnostice. Plíšková Lenka FN Hradec Králové
Sekvenace aplikace ve virologické diagnostice Plíšková Lenka FN Hradec Králové Vývoj sekvenačních technik 2.generace sekvenování až tisíců molekul najednou 1.generace detekce DNA bazí za sebou Stratton
VíceGENETIKA A MOLEKULÁRNĚ GENETICKÁ DIAGNOSTIKA DUCHENNEOVY MUSKULÁRNÍ DYSTROFIE
GENETIKA A MOLEKULÁRNĚ GENETICKÁ DIAGNOSTIKA DUCHENNEOVY MUSKULÁRNÍ DYSTROFIE POHLED Z LABORATOŘE Petra Hedvičákov ková ÚBLG FN Motol Odd. lékal kařské molekulárn rní genetiky MZO 00064203 23.-24.5.2008
VíceModerní metody analýzy genomu
LÉKAŘSKÁ FAKULTA MASARYKOVY UNIVERSITY Interní hematoonkologická klinika LF MU a FN Brno Centrum molekulární biologie a genové terapie Moderní metody analýzy genomu Aplikace 25.11. 2011 Boris Tichý Aplikace
VíceMETODY MOLEKULÁRNÍ PATOLOGIE. Mgr. Jana Slováčková, Ph.D. Ústav patologie FN Brno
METODY MOLEKULÁRNÍ PATOLOGIE Mgr. Jana Slováčková, Ph.D. Ústav patologie FN Brno Molekulární patologie Využívá molekulární a genetický přístup k určení diagnózy a klasifikaci onemocnění Rutinně využívá
VíceMOLEKULÁRNĚ BIOLOGICKÉ METODY V ENVIRONMENTÁLNÍ MIKROBIOLOGII. Martina Nováková, VŠCHT Praha
MOLEKULÁRNĚ BIOLOGICKÉ METODY V ENVIRONMENTÁLNÍ MIKROBIOLOGII Martina Nováková, VŠCHT Praha MOLEKULÁRNÍ BIOLOGIE V BIOREMEDIACÍCH enumerace FISH průtoková cytometrie klonování produktů PCR sekvenování
VíceAnalýza DNA. Co zjišťujeme u DNA DNA. PCR polymerase chain reaction. Princip PCR PRINCIP METODY PCR
o zjišťujeme u DN nalýza DN enetickou podstatu konkrétních proteinů Mutace bodové (sekvenční delece nebo inzerce nukleotidů), chromosomové aberace (numerické, strukturální) Polymorfismy konkrétní mutace,
VíceMetagenomika NGS (454, Illumina, IonTorrent) Petra Vídeňská, Ph.D.
Metagenomika NGS (454, Illumina, IonTorrent) Petra Vídeňská, Ph.D. 1 Next Generation Sequencing The total number of genes is estimated at around 30,000--much lower than previous estimates of 80,000 to
VíceImplementace laboratorní medicíny do systému vzdělávání na Univerzitě Palackého v Olomouci. reg. č.: CZ.1.07/2.2.00/
Implementace laboratorní medicíny do systému vzdělávání na Univerzitě Palackého v Olomouci reg. č.: CZ.1.07/2.2.00/28.0088 Hybridizační metody v diagnostice Mgr. Gabriela Kořínková, Ph.D. Laboratoř molekulární
VíceDIAGNOSTICKÝ KIT PRO DETEKCI MINIMÁLNÍ REZIDUÁLNÍ CHOROBY U KARCINOMU PANKREATU
Úvod IntellMed, s.r.o., Václavské náměstí 820/41, 110 00 Praha 1 DIAGNOSTICKÝ KIT PRO DETEKCI MINIMÁLNÍ REZIDUÁLNÍ CHOROBY U KARCINOMU PANKREATU Jednou z nejvhodnějších metod pro detekci minimální reziduální
VíceRIGORÓZNÍ OTÁZKY - BIOLOGIE ČLOVĚKA
RIGORÓZNÍ OTÁZKY - BIOLOGIE ČLOVĚKA 1. Genotyp a jeho variabilita, mutace a rekombinace Specifická imunitní odpověď Prevence a časná diagnostika vrozených vad 2. Genotyp a prostředí Regulace buněčného
VíceCentrum aplikované genomiky, Ústav dědičných metabolických poruch, 1.LFUK
ové technologie v analýze D A, R A a proteinů Stanislav Kmoch Centrum aplikované genomiky, Ústav dědičných metabolických poruch, 1.LFUK Motto : "The optimal health results from ensuring that the right
VíceMolekulární základy dědičnosti. Ústřední dogma molekulární biologie Struktura DNA a RNA
Molekulární základy dědičnosti Ústřední dogma molekulární biologie Struktura DNA a RNA Ústřední dogma molekulární genetiky - vztah mezi nukleovými kyselinami a proteiny proteosyntéza replikace DNA RNA
VíceStudium genetické predispozice ke vzniku karcinomu prsu
Univerzita Karlova v Praze 1. lékařská fakulta Studium genetické predispozice ke vzniku karcinomu prsu Petra Kleiblová Ústav biochemie a experimentální onkologie, 1. LF UK - skupina molekulární biologie
VíceBi5130 Základy práce s lidskou adna
Bi5130 Základy práce s lidskou adna Mgr. et Mgr. Kristýna Brzobohatá pizova@sci.muni.cz Laboratoř biologické a molekulární antropologie, ÚEB, PřF, Mu Bi5130 Základy práce s lidskou adna PCR polymerase
VícePRO MOLEKULÁRNÍ BIOLOGII REAGENCIE. SLEVA 10 % na nákup nad , bez DPH. Polymerázy a mastermixy GENEDIREX Nejlepší poměr cena/výkon
REAGENCIE PRO MOLEKULÁRNÍ BIOLOGII 092018 SLEVA 10 % na nákup nad 20 000, bez DPH Polymerázy a mastermixy GENEDIREX Nejlepší poměr cena/výkon Taq DNA polymeráza a mastermix skladování a tepelná odolnost:
VíceMgr. et Mgr. Lenka Falková. Laboratoř agrogenomiky. Ústav morfologie, fyziologie a genetiky zvířat Mendelova univerzita
Mgr. et Mgr. Lenka Falková Laboratoř agrogenomiky Ústav morfologie, fyziologie a genetiky zvířat Mendelova univerzita 9. 9. 2015 Šlechtění Užitek hospodářská zvířata X zájmová zvířata Zemědělství X chovatelství
VíceInovace studia molekulární a buněčné biologie reg. č. CZ.1.07/2.2.00/07.0354
Inovace studia molekulární a buněčné biologie reg. č. CZ.1.07/2.2.00/07.0354 Genomika (KBB/GENOM) SNPs Odvozování a genotyping Ing. Hana Šimková, CSc. Cíl přednášky - seznámení s problematikou hledání
VíceDNA TECHNIKY IDENTIFIKACE ŽIVOČIŠNÝCH DRUHŮ V KRMIVU A POTRAVINÁCH. Michaela Nesvadbová
DNA TECHNIKY IDENTIFIKACE ŽIVOČIŠNÝCH DRUHŮ V KRMIVU A POTRAVINÁCH Michaela Nesvadbová Význam identifikace živočišných druhů v krmivu a potravinách povinností každého výrobce je řádně a pravdivě označit
Více1. Definice a historie oboru molekulární medicína. 3. Základní laboratorní techniky v molekulární medicíně
Obsah Předmluvy 1. Definice a historie oboru molekulární medicína 1.1. Historie molekulární medicíny 2. Základní principy molekulární biologie 2.1. Historie molekulární biologie 2.2. DNA a chromozomy 2.3.
VíceMolekulární metody ve studiích kořenových systémů. Jiří Košnar, 2016
Molekulární metody ve studiích kořenových systémů Jiří Košnar, 2016 Úvod Řešení otázek: identifikace (barcoding) a kvantifikace rostlinných druhů ve společenstvu identifikace (barcoding) a kvantifikace
VíceLékařská genetika a onkologie. Renata Gaillyová OLG a LF MU Brno 2012/2013
Lékařská genetika a onkologie Renata Gaillyová OLG a LF MU Brno 2012/2013 *genetické souvislosti *onkogenetická vyšetření u onkologických onemocnění * genetické vyšetření u hereditárních nádorů *presymptomatické
VíceSTRATEGIE NEXT-GENERATION SEKVENOVÁNÍ PRO REALIZACI PROJEKTŮ MALÉHO AŽ STŘEDNÍHO ROZSAHU NÁVOD NA OBJEDNÁNÍ
SHARESEQ STRATEGIE NEXT-GENERATION SEKVENOVÁNÍ PRO REALIZACI PROJEKTŮ MALÉHO AŽ STŘEDNÍHO ROZSAHU NÁVOD NA OBJEDNÁNÍ WWW.SHARESEQ.EU OBSAH SHARESEQ - NEXT-GENERATION SEKVENAČNÍ PROTOKOL PRO REALIZACI PROJEKTŮ
VíceUSING OF AUTOMATED DNA SEQUENCING FOR PORCINE CANDIDATE GENES POLYMORFISMS DETECTION
USING OF AUTOMATED DNA SEQUENCING FOR PORCINE CANDIDATE GENES POLYMORFISMS DETECTION VYUŽITÍ AUTOMATICKÉHO SEKVENOVÁNÍ DNA PRO DETEKCI POLYMORFISMŮ KANDIDÁTNÍCH GENŮ U PRASAT Vykoukalová Z., Knoll A.,
VíceMikrosatelity (STR, SSR, VNTR)
Mikrosatelity (STR, SSR, VNTR) Repeats Více než polovina našeho genomu Interspersed (transposony) Tandem (mini- a mikrosatelity) Minisatellites (longer motifs 10 100 nucleotides) mikrosatelity Tandemová
VíceSEKVENAČNÍ METODY NOVÉ GENERACE: JEJICH PRINCIPY A POTENCIÁLNÍ VYUŢITÍ V GENETICE ČLOVĚKA, ETICKÉ ASPEKTY
BAKALÁŘSKÁ PRÁCE MASARYKOVA UNIVERZITA PŘÍRODOVĚDECKÁ FAKULTA ÚSTAV EXPERIMENTÁLNÍ BIOLOGIE ODDĚLENÍ GENETIKY A MOLEKULÁRNÍ BIOLOGIE SEKVENAČNÍ METODY NOVÉ GENERACE: JEJICH PRINCIPY A POTENCIÁLNÍ VYUŢITÍ
VíceBeličková 1, J Veselá 1, E Stará 1, Z Zemanová 2, A Jonášová 2, J Čermák 1
Beličková 1, J Veselá 1, E Stará 1, Z Zemanová 2, A Jonášová 2, J Čermák 1 1 Ústav hematologie a krevní transfuze, Praha 2 Všeobecná fakultní nemocnice, Praha MDS Myelodysplastický syndrom (MDS) je heterogenní
VícePolymorfizmy detekované. polymorfizmů (Single Nucleotide
Polymorfizmy detekované speciálními metodami s vysokou rozlišovací schopností Stanovení jednonukleotidových polymorfizmů (Single Nucleotide Polymorphisms - SNPs) Příklad jednonukleotidových polymorfizmů
VíceDIAGNOSTICKÝ KIT PRO DETEKCI MINIMÁLNÍ REZIUDÁLNÍ CHOROBY MRD EGFR
Úvod IntellMed, s.r.o., Václavské náměstí 820/41, 110 00 Praha 1 DIAGNOSTICKÝ KIT PRO DETEKCI MINIMÁLNÍ REZIUDÁLNÍ CHOROBY MRD EGFR Jednou z nejvhodnějších metod pro detekci minimální reziduální choroby
VíceVyužití DNA markerů ve studiu fylogeneze rostlin
Mendelova genetika v příkladech Využití DNA markerů ve studiu fylogeneze rostlin Ing. Petra VESELÁ Ústav lesnické botaniky, dendrologie a geobiocenologie LDF MENDELU Brno Tento projekt je spolufinancován
VíceZáklady molekulární biologie KBC/MBIOZ
Základy molekulární biologie KBC/MBIOZ Ivo Frébort 5. Metody molekulární biologie II DNA footprinting hledání interakcí DNA s proteiny Polymerázová řetězová reakce (Polymerase chain reaction PCR) Malé
VíceReferenční lidský genom. Rozdíly v genomové DNA v lidské populaci. Odchylky od referenčního genomu. Referenční lidský genom.
Referenční lidský genom Rozdíly v genomové DNA v lidské populaci Zdroj DNA: 60% sekvencí pochází ze sekvenování DNA od jednoho dárce (sekvenování a sestavování BAC klonů) některá místa genomu se nepodařilo
VíceLaboratoř molekulární patologie
Laboratoř molekulární patologie Ústav patologie FN Brno Prof. RNDr. Jana Šmardová, CSc. 19.11.2014 Složení laboratoře stálí členové Prof. RNDr. Jana Šmardová, CSc. Mgr. Květa Lišková Mgr. Lenka Pitrová
VíceAnalýza DNA. Co zjišťujeme u DNA
Analýza DNA Co zjišťujeme u DNA Genetickou podstatu konkrétních proteinů Mutace bodové (sekvenční delece nebo inzerce nukleotidů, záměny), chromosomové aberace (numerické, strukturní) Polymorfismy konkrétní
VícePolymerázová řetězová reakce. Základní technika molekulární diagnostiky.
Polymerázová řetězová reakce Základní technika molekulární diagnostiky. Kdo za to může? Kary Mullis 1983 Nobelova cena 1993 Princip PCR Polymerázová řetězová reakce (polymerase chain reaction PCR) umožňuje
VíceGenotypování: Využití ve šlechtění a určení identity odrůd
Molekulární přístupy ve šlechtění rostlin Aplikovaná genomika Genotypování: Využití ve šlechtění a určení identity odrůd Miroslav Valárik 14.2. 2017 Šlěchtění rostlin: Cílený výběr a manipulace s genomy
VíceAtestace z lékařské genetiky inovované otázky pro rok A) Molekulární genetika
Atestace z lékařské genetiky inovované otázky pro rok 2017 A) Molekulární genetika 1. Struktura lidského genu, nomenklatura genů, databáze týkající se klinického dopadu variace v jednotlivých genech. 2.
VíceÚstav experimentální medicíny AV ČR úspěšně rozšířil přístrojové vybavení pro vědce z peněz evropských fondů
Ústav experimentální medicíny AV ČR úspěšně rozšířil přístrojové vybavení pro vědce z peněz evropských fondů Ústav úspěšně dokončil realizaci dvou investičních projektů s využitím prostředků z Operačního
VíceMetody studia exprese mrna. jádro a genová exprese 2007
Metody studia exprese mrna Buněčné jádro a genová exprese 2007 Aktivita genu je primárn ě vyjád ř ena jeho transkripcí-prvním krokem vedoucím k syntéze kódovaného proteinu. Cíle metod Ur č ení mno ž ství
VíceSekvenování DNA. stanovení pořadí nukleotidů v molekule DNA (primární struktury)
Sekvenování DNA stanovení pořadí nukleotidů v molekule DNA (primární struktury) Důvody řešení genomových projektů Genomika modelových organismů (de novo sekvenování) Analýza mutací a SNP, výzkum genetických
VíceMasivně paralelní sekvenování v diagnostice závažných časných epilepsií. DNA laboratoř KDN 2.LF a FN v Motole
Masivně paralelní sekvenování v diagnostice závažných časných epilepsií DNA laboratoř KDN 2.LF a FN v Motole Financial disclosure (konflikt zájmů) Projekt je v současné době finančně zabezpečen pouze z
VíceZáklady molekulární biologie KBC/MBIOZ
Základy molekulární biologie KBC/MBIOZ 4. Metody molekulární biologie I Izolace DNA a RNA Specifické postupy pro baktérie, kvasinky, rostlinné a živočišné tkáně U RNA nutno zabránit kontaminaci RNasami
VíceMolekulárn. rní. biologie Struktura DNA a RNA
Molekulárn rní základy dědičnosti Ústřední dogma molekulárn rní biologie Struktura DNA a RNA Ústřední dogma molekulárn rní genetiky - vztah mezi nukleovými kyselinami a proteiny proteosyntéza replikace
VíceV. letní škola metod molekulární biologie nukleových kyselin a genomiky 16. - 20. 6. 2014. Ústav morfologie, fyziologie a genetiky zvířat AF MENDELU
V. letní škola metod molekulární biologie nukleových kyselin a genomiky 16. - 20. 6. 2014 Ústav morfologie, fyziologie a genetiky zvířat AF MENDELU Zemědělská 1, Budova A, 4. patro (učebny dle programu)
VíceAPLIKACE METAGENOMIKY PRO HODNOCENÍ PRŮBĚHU SANAČNÍHO ZÁSAHU NA LOKALITÁCH KONTAMINOVANÝCH CHLOROVANÝMI ETHYLÉNY
APLIKACE METAGENOMIKY PRO HODNOCENÍ PRŮBĚHU SANAČNÍHO ZÁSAHU NA LOKALITÁCH KONTAMINOVANÝCH CHLOROVANÝMI ETHYLÉNY Monika Stavělová 1, Jakub Rídl 2, Maria Brennerová 3, Hana Kosinová 1, Jan Pačes 2 1 AECOM
VíceZáklady molekulární biologie KBC/MBIOZ
Základy molekulární biologie KBC/MBIOZ Ivo Frébort 4. Metody molekulární biologie I Izolace DNA a RNA Specifické postupy pro baktérie, kvasinky, rostlinné a živočišné tkáně U RNA nutno zabránit kontaminaci
VíceNěkteré vlastnosti DNA důležité pro analýzu
Některé vlastnosti DNA důležité pro analýzu Spiralizace Denaturace Záporný náboj Syntéza Ligace Rekombinace Mutabilita Despiralizace Reasociace Štěpení Metody používané k analýze DNA Southern blotting
VíceNAT testování dárců krve v ÚVN Praha
Oddělení hematologie a krevní transfuze NAT testování dárců krve v ÚVN Praha Ludmila Landová Organizace laboratorního vyšetření dárců krve - OHKT ÚVN Praha Konsolidované řešení ZVÝŠENÍ bezpečnosti pro
VíceUživatelská příručka
PGM Barcoding Set 1-8 Navrženo pro PGM ION-TORRENT KÓD PRODUKTU: 2001 (1-8) BALEN9: 32 testů Uživatelská příručka Rev02.2015 Str. 1 Rejstřík 1. POUŽITÍ VÝROBKU 3 2. OBSAH KITU 4 3. SKLADOVÁNÍ 4 4. STABILITA
VíceBiotechnologický kurz. II. letní škola metod molekulární biologie nukleových kyselin a genomiky 17. - 21. 6. 2013
Biotechnologický kurz Biotechnologický kurz II. letní škola metod molekulární biologie nukleových kyselin a genomiky 17. - 21. 6. 2013 Ústav morfologie, fyziologie a genetiky zvířat AF MENDELU v Brně Zemědělská
VíceSYNTETICKÉ OLIGONUKLEOTIDY
Oddělení funkční genomiky a proteomiky Přírodovědecká fakulta Masarykovy university SYNTETICKÉ OLIGONUKLEOTIDY Hana Konečná CENTRÁLNÍ LABORATOŘ Masarykovy Univerzity v Brně ODDĚLENÍ FUNKČNÍ GENOMIKY A
VíceAmplifikační metody umožňují detekovat. k dispozici minimálně kopií DNA,
Diagnostické amplifikační metody nevyužívající PCR Amplifikační metody umožňují detekovat jedinou kopii cílové DNA, zatímco při hybridizačních metodách musí být k dispozici minimálně 10 4-10 5 kopií DNA,
VícePříloha Odůvodnění účelnosti veřejné zakázky pro účely předběžného oznámení veřejného zadavatele
Příloha Odůvodnění účelnosti veřejné zakázky pro účely předběžného oznámení veřejného zadavatele podle 1 Vyhlášky č. 232/2012 Sb. o podrobnostech rozsahu odůvodnění účelnosti veřejné zakázky a odůvodnění
VíceSekvence. Genom. Základní informace. Výstupy z výukové jednotky
Sekvence Základní informace Následující text je součástí učebních textů předmětu Analýza sekvencí DNA a je určen hlavně pro studenty Matematické biologie. Může být ovšem přínosný i pro další studenty biologických
VíceEKO/MEM - Molekulární ekologie mikroorganizmů Klonování a sekvenování přírodní DNA základ pro fylogenetickou analýzu společenstva
EKO/MEM - Molekulární ekologie mikroorganizmů Klonování a sekvenování přírodní DNA základ pro fylogenetickou analýzu společenstva Iva Buriánková Katedra ekologie PřF UP KLONOVÁNÍ GENŮ KLONOVÁNÍ GENŮ Klonování
VícePokročilé biofyzikální metody v experimentální biologii
Pokročilé biofyzikální metody v experimentální biologii Ctirad Hofr 1/1 Proč biofyzikální metody? Biofyzikální metody využívají fyzikální principy ke studiu biologických systémů Poskytují kvantitativní
Více"Učení nás bude více bavit aneb moderní výuka oboru lesnictví prostřednictvím ICT ". Základy genetiky, základní pojmy
"Učení nás bude více bavit aneb moderní výuka oboru lesnictví prostřednictvím ICT ". Základy genetiky, základní pojmy 1/75 Genetika = věda o dědičnosti Studuje biologickou informaci. Organizmy uchovávají,
VíceNávrh směrnic pro správnou laboratorní diagnostiku Friedreichovy ataxie.
Návrh směrnic pro správnou laboratorní diagnostiku Friedreichovy ataxie. Připravila L.Fajkusová Online Mendelian Inheritance in Man: #229300 FRIEDREICH ATAXIA 1; FRDA *606829 FRDA GENE; FRDA Popis onemocnění
VíceMetody používané v MB. analýza proteinů, nukleových kyselin
Metody používané v MB analýza proteinů, nukleových kyselin Nukleové kyseliny analýza a manipulace Elektroforéza (délka fragmentů, čistota, kvantifikace) Restrikční štěpení (manipulace s DNA, identifikace
VíceDiagnostika infekce Chlamydia trachomatis pomocí molekulárně genetické metody real time PCR nejen u pacientek z gynekologických zařízení
Diagnostika infekce Chlamydia trachomatis pomocí molekulárně genetické metody real time PCR nejen u pacientek z gynekologických zařízení Mgr. Klára Vilimovská Dědečková, Ph.D. Synlab genetics s.r.o. Molekulární
VíceNUKLEOVÉ KYSELINY. Základ života
NUKLEOVÉ KYSELINY Základ života HISTORIE 1. H. Braconnot (30. léta 19. století) - Strassburg vinné kvasinky izolace matiére animale. 2. J.F. Meischer - experimenty z hnisem štěpení trypsinem odstředěním
VíceBiotechnologický kurz. II. letní škola metod molekulární biologie nukleových kyselin a genomiky
Biotechnologický kurz Biotechnologický kurz II. letní škola metod molekulární biologie nukleových kyselin a genomiky 20. - 24. 6. 2011 Ústav morfologie, fyziologie a genetiky zvířat AF MENDELU v Brně Zemědělská
VíceInovace studia molekulární a buněčné biologie reg. č. CZ.1.07/2.2.00/
Inovace studia molekulární a buněčné biologie reg. č. CZ.1.07/2.2.00/07.0354 Genomika (KBB/GENOM) Poziční klonování Ing. Hana Šimková, CSc. Cíl přednášky - seznámení s metodou pozičního klonování genů
VíceAKTUÁLNÍ KONTROVERZE A NOVÉ SMĚRY V PREIMPLANTAČNÍM GENETICKÉM TESTOVÁNÍ EMBRYÍ. Mgr. Jakub Horák, Ph.D.
AKTUÁLNÍ KONTROVERZE A NOVÉ SMĚRY V PREIMPLANTAČNÍM GENETICKÉM TESTOVÁNÍ EMBRYÍ Mgr. Jakub Horák, Ph.D. PGD/PGS - JAK TO BYLO? Preimplantační genetická diagnostika (PGD) cíleně zaměřené vyšetření k detekci
VíceZáklady praktické Bioinformatiky
Základy praktické Bioinformatiky PETRA MATOUŠKOVÁ 2018/2019 8/10 Základy praktické bioinformatiky Téma 8/10 Nukleotidová bioinformatika IV Cíle: Student bude schopen navrhnout primery pro kvantitativní
VíceMetody studia historie populací. Metody studia historie populací
1) Metody studia genetické rozmanitosti komplexní fenotypové znaky, molekulární znaky. 2) Mechanizmy evoluce mutace, přírodní výběr, genový posun a genový tok 3) Anageneze x kladogeneze - co je vlastně
VíceGenetický polymorfismus jako nástroj identifikace osob v kriminalistické a soudnělékařské. doc. RNDr. Ivan Mazura, CSc.
Genetický polymorfismus jako nástroj identifikace osob v kriminalistické a soudnělékařské praxi doc. RNDr. Ivan Mazura, CSc. Historie forenzní genetiky 1985-1986 Alec Jeffreys a satelitní DNA 1980 Ray
VíceBiotechnologický kurz. III. letní škola metod molekulární biologie nukleových kyselin a genomiky
Biotechnologický kurz Biotechnologický kurz III. letní škola metod molekulární biologie nukleových kyselin a genomiky 18. - 22. 6. 2012 Ústav morfologie, fyziologie a genetiky zvířat AF MENDELU v Brně
VíceInovace studia molekulární a buněčné biologie
Investice do rozvoje vzdělávání Inovace studia molekulární a buněčné biologie Tento projekt je spolufinancován Evropským sociálním fondem a státním rozpočtem České republiky. Investice do rozvoje vzdělávání
VíceMikrosatelity (STR, SSR, VNTR)
Mikrosatelity (STR, SSR, VNTR) Repeats Více než polovina našeho genomu Interspersed (transposony) Tandem (mini- a mikrosatelity) Minisatellites (longer motifs 10 100 nucleotides) mikrosatelity Tandemová
VíceGenetický polymorfismus
Genetický polymorfismus Za geneticky polymorfní je považován znak s nejméně dvěma geneticky podmíněnými variantami v jedné populaci, které se nachází v takových frekvencích, že i zřídkavá má frekvenci
VíceInovace studia molekulární a buněčné biologie
Investice do rozvoje vzdělávání Inovace studia molekulární a buněčné biologie Tento projekt je spolufinancován Evropským sociálním fondem a státním rozpočtem České republiky. Investice do rozvoje vzdělávání
VíceMetody používané v MB. analýza proteinů, nukleových kyselin
Metody používané v MB analýza proteinů, nukleových kyselin Nukleové kyseliny analýza a manipulace Elektroforéza (délka fragmentů, čistota, kvantifikace) Restrikční štěpení (manipulace s DNA, identifikace
VíceHybridizace nukleových kyselin
Hybridizace nukleových kyselin Tvorba dvouřetězcových hybridů za dvou jednořetězcových a komplementárních molekul Založena na schopnosti denaturace a renaturace DNA. Denaturace DNA oddělení komplementárních
VíceCo zjišťujeme u DNA ACGGTCGACTGCGATGAACTCCC ACGGTCGACTGCGATCAACTCCC ACGGTCGACTGCGATTTGAACTCCC
Analýza DNA Co zjišťujeme u DNA genetickou podstatu konkrétních proteinů mutace bodové, sekvenční delece/inzerce nukleotidů, chromosomové aberace (numerické, strukturální) polymorfismy konkrétní mutace,
Více