PCP. Stanovení drog. Abuscreen OnLine Phencyclidine Informace pro objednání

Transkript

1 Informace pro objednání (200 testů) Preciset DAT Plus I CAL 1-6 (6 5 ml) C.f.a.s. DAT Qualitative Plus (6 5 ml) C.f.a.s. DAT Qualitative Plus Clinical (3 5 ml) Control Set DAT I PreciPos DAT Set I (2 10 ml) PreciNeg DAT Set I (2 10 ml) Control Set DAT Clinical PreciPos DAT Clinical (2 10 ml) PreciNeg DAT Clinical (2 10 ml) Systémové ID Analyzátory, na kterých lze cobas c pack použít COBAS INTEGRA 400 plus COBAS INTEGRA 800 Česky Systémové informace Test S, test ID pro semikvantitativní stanovení Test QL, test ID pro kvalitativní stanovení Test QC, test ID pro kvalitativní stanovení, použitím C.f.a.s. DAT Qualitative Plus Clinical Použití Phencyclidine () je diagnostický in vitro test pro semikvantitativní a kvalitativní detekci fencyklidinu a jeho metabolitů v lidské moči při koncentraci cut-off 25 na systémech COBAS INTEGRA. Tímto stanovením lze získat i semikvantitativní výsledky testu, které umožňují laboratořím posoudit využití stanovení v programu kontroly kvality. Semikvantitativní stanovení slouží k měření vhodného naředění vzorku potvrzením konfirmační metody jako je plynová chromatografie/hmotnostní spektrometrie (GC/MS). Phencyclidine poskytuje pouze předběžný analytický výsledek. K získání potvrzeného analytického výsledku se musí použít více specifická alternativní chemická metoda. Preferovanou konfirmační metodou je GC/MS. 1 Výsledky testů užívání drog, zvláště jsou-li předběžně pozitivní, je třeba hodnotit s klinickým zřetelem a s odborným úsudkem. Souhrn Phencyclidine () je arylcyklohexylamin se silnými analgetickými a anestetickými vlastnostmi. 1,2,3,4,5,6 Vyvinut původně jako nitrožilní anestetikum, výskyt duševních vedlejších účinků vyloučil jeho možné klinické využití. nebyl nikdy schválen pro použití na lidech kvůli postanestetickému zmatení a deliriu, které se objevily během klinických studií. je při ilegálním prodeji na ulici známý pod různými jmény jako např. "andělský prach", zatímco pojmenování jako "supergrass" znamenají kombinaci s marihuanou. má halucinogenní, CNS (centrální nervový systém)-stimulující a CNS-uklidňující vlastnosti, kterých projev je závislý na dávce a druhu. 4 a jeho strukturální obdoba, ketamin, jsou antagonisté receptoru NMDA (N metyl-d aspartát). 2,5 Jsou známy jako disociační anestetika, které vytvářejí pocity disociace od prostředí a sebe. Dextrometorfan, prostředek proti kašli, může vyvolat podobné účinky, je-li užíván ve vysokých dávkách. 6 Voděrozpustný prášek z lze užívat perorálně, šňupáním, vpíchnutím nitrožilně nebo kouřením. Typická dávka k dostání na ulici (1 10 mg) může způsobit tachykardii, hypertenzi, halucinace, apatii, letargii, senzorickou izolaci a ztrátu koordinace. Vzrušení a neklid je rovněž průvodním znakem a může vést k bezdůvodné zuřivosti, kombinuje-li se s ostatními halucinogeny. Opakované užívání může způsobit závislost a vyšší dávky mohou způsobit symptomy podobné schizofrenii a mohou vyústit v křeče a dlouhotrvající nebo smrtelné kóma. 2,6 je metabolizován kruhovou hydroxylací a oxidací enzymy cytochromu P450. 3,7 Metabolit aminokyseliny se vyskytuje ve významných množstvích v lidské moči. 8 U lidí byly pozorovány významné rozdíly v biologickém poločasu eliminace, nicméně fáze II metabolismu sulface a glukuronidace mohly taky přispět k rozdílům biologického poločasu. 7 Princip testu Kinetická interakce mikročástic v roztoku (KIMS) 9 měřená změnou intenzity procházejícího světla. V případě absence látky ve vzorku se volné protilátky váží na látku vázanou na mikročástici, a vytváří agregáty. S probíhající agregací v případě absence léčiva ve vzorku absorbance roste. Jestliže vzorek moči obsahuje dotyčnou látku, probíhá kompetice s částicemi s navázaným derivátem látky o volné protilátky. Protilátka vázaná na léčivo ve vzorku není již dostupná pro podporu agregace částic a následný vznik struktury částic je inhibován. Přítomnost léčiva ve vzorku úměrně snižuje nárůst absorbance vůči koncentraci léčiva ve vzorku. Obsah léčiva ve vzorku se měří poměrem ke známé hodnotě cut-off koncentrace léčiva. Reagencie - pracovní roztoky Diluent vzorku (SD) Reagencie s protilátkou (AB) Reagencie s mikročásticemi (MP) Pufr obsahující stabilizátor a 0.09% azid sodný. Protilátka proti (monoklonální myší) v pufru se stabilizátorem a 0.09% azidem sodným. Mikročástice konjugované s derivátem v pufru s 0.09% azidem sodným. SD je v pozici A, AB je v pozici B a MP je v pozici C. Pipetovací sekvence R1 = AB R2 = SD R3 (SR) = MP R1 = SD R2 = AB R3 (SR) = MP Bezpečnostní opatření a varování Věnujte pozornost všem varováním a bezpečnostním opatřením uvedeným v části 1 / Úvod této Příručky metod. Pro USA: Varování: Federální zákon omezuje prodej tohoto přístroje pouze lékařem nebo na jeho pokyn. Zacházení s reagenciemi Všechny nové (nepropíchnuté) cobas c packy před použitím v analyzátoru promíchejte po dobu 1 min. v mixéru kazet. Všechny cobas c packy, které jsou již v užívání, musí být na počátku každého týdne (jedenkrát týdně) promíchány stejným způsobem. Připravena k přímému použití. Analyzátor reagencii automaticky promíchá po dobu 1 minuty po propíchnutí cobas c packu a půl minuty při sekvenci "Begin of Day". 1 / 5

2 Uskladnění a stabilita Doba skladování při 2 8 C: Na palubě při použití při C Na palubě při použití při 8 C Čtěte datum exspirace na štítku balení cobas c pack 69 dní 89 dní Reagencie nezamrazujte. Reagencie, které byly zmrazené, se nesmí použít. Odběr vzorků a příprava Pouze níže uvedené vzorky byly testované a jsou přijatelné. Moč: Vzorky moče odebírejte do čistých skleněných či plastových nádobek. Vzorky čerstvé moče nepotřebují zvláštní předúpravu nebo zacházení, ale měly by být ochráněny před kontaminací při pipetování. Vzorky by měly být v běžném fyziologickém rozmezí ph 5 8. Nejsou potřeba žádná aditiva ani konzervans. Doporučujeme uchovávat vzorky při teplotě 2 8 C a zpracovat je do 5 dnů od odběru. 10 Při delším skladování doporučujeme vzorek zamrazit. Velmi zakalené vzorky před analýzou zcentrifugujte. Příměs či naředění vzorků může způsobit chybný výsledek. Při podezření, že byl vzorek znehodnocen, proveďte nový odběr. Testování validity vzorku se požaduje pouze u vzorků odebíraných podle Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs. 11 Varování: Ředění vzorku by mělo být použito jen při jejich přípravě pro GC/MS ale jinak není vhodné. Postup ředění, je-li použit, by měl být validován. Dodávaný materiál Reagencie jsou uvedeny v části "Reagencie - pracovní roztoky". Stanovení Optimálního využití stanovení dosáhnete, budete-li dodržovat pokyny uvedené v dokumentaci pro příslušný analyzátor. Pokyny ke stanovení specifické pro analyzátor vyhledejte v příslušném návodu k použití. Aplikace pro moč Definice testu COBAS INTEGRA 400 plus Semikvantitativní Kvalitativní Způsob měření Absorbance Absorbance Způsob výpočtu abs. Koncový bod Koncový bod Způsob reakce R1-R2-S-SR R1-R2-S-SR Směr reakce Nárůst Nárůst Start reakce SR SR Vlnová délka A 520 nm 520 nm Rozmezí testu s následným ředěním Faktor postdiluce Doporučuje se 10 a) Ne Výpočet první/posl. 49/67 49/67 Jednotka a) Pro použití při výpočtu koncentrace při přípravě pro analýzu GC/MS. Pipetovací parametry Diluent (H 2 O) R1 53 µl 6 µl R2 42 µl 15 µl Vzorek 10 µl 6 µl SR 15 µl 12 µl Celkový objem 159 µl Definice testu COBAS INTEGRA 800 Semikvantitativní Kvalitativní Způsob měření Absorbance Absorbance Způsob výpočtu abs. Koncový bod Koncový bod Způsob reakce R1-R2-S-SR R1-R2-S-SR Směr reakce Nárůst Nárůst Start reakce SR SR Vlnová délka A 520 nm 520 nm Rozmezí testu s následným ředěním Faktor postdiluce 10 doporučeno b) Ne Výpočet první/posl. 44/78 44/78 Jednotka b) Používat, pokud se jedná o předběžný výsledek pro analýzu GC/MS. Pipetovací parametry Diluent (H 2 O) R1 42 µl 6 µl R2 53 µl 6 µl Vzorek 10 µl 6 µl SR 12 µl 6 µl Celkový objem 141 µl Kalibrace Kalibrátory Semikvantitativní aplikace S, Kalibrátory Preciset DAT Plus I, CAL 1-4 0, 12.5, 25, 50 fencyklidinu (DATS9, systémové ID ) Kvalitativní aplikace QL, Kalibrátory Preciset DAT Plus I, CAL 1 0 nebo deionizovaná voda a kalibrátory Preciset DAT Plus I, CAL 3 c) nebo C.f.a.s. DAT Qualitative Plus 25 (DATQ1, systémové ID ) QC, Kalibrátory Preciset DAT Plus I nebo II d), CAL 1 0 nebo deionizovaná voda a C.f.a.s. DAT Qualitative Plus Clinical 25 (DATQ5, systémové ID ) Pro kvalitativní aplikace je určená hodnota cut-off c) Při kalibraci kvalitativního stanovení Opiates 300/ (test OP2QL, test ID 0 410) nepoužívejte Preciset DAT Plus I, CAL 3. d) Preciset DAT Plus II, CAL 1, se obecně nevyžadují pro kalibraci stanovení Phencyclidine, lze je ovšem použít jako alternativní hladinu 0 pro DATQ5, systémové ID Mód kalibrace Opakování kalibrace Semikvantitativní aplikace Lineární interpolace Kvalitativní aplikace Lineární regrese Doporučen duplikát 2 / 5

3 Kalibrační interval : Každou šarži, každých 70 dní a jestliže to vyžaduje proces kontroly kvality : Každou šarži, každých 30 dní a jestliže to vyžaduje proces kontroly kvality Kalibrační interval lze po přijatelné verifikaci kalibrace laboratoří prodloužit. Kalibrační křivka je vytvářena použitím kalibrátorů. Kalibrátory musí být umístěny podle hodnot koncentrace od nejvyšší po nejnižší do CAL/QC stojánku. Vytvořená křivka je uložena v paměti systému COBAS INTEGRA a podle potřeby znovu vyvolána. Návaznost: Tato metoda byla standardizovaná dle primární referenční metody (GC/MS). Kontrola kvality Kontrola kvality Pořadí kontrol Kontrola po kalibraci Control Set DAT I PreciPos DAT Set I (DAT1P, systémové ID ) PreciNeg DAT Set I (DAT1N, systémové ID ) nebo Control Set DAT Clinical PreciPos DAT Clinical (DATCP, systémové ID ) PreciNeg DAT Clinical (DATCN, systémové ID ) Určeno uživatelem Doporučena Ke kontrole kvality použijte kontrolní materiály uvedené v části "Informace pro objednání". Navíc lze použít i jiný vhodný kontrolní materiál. Koncentrace léčiv v Control Set DAT I a Clinical byly verifikovány GC/MS. Kontrolní intervaly a meze by měly být uzpůsobeny pro každou laboratoř dle individuálních požadavků. Naměřené hodnoty by se měly pohybovat v definovaných mezích. Každá laboratoř by měla mít vypracovaná nápravná opatření pro případ, že hodnoty překročí definované meze. Sledujte příslušná vládní nařízení a lokální směrnice kontroly kvality. Výsledky Systémy COBAS INTEGRA vykazují výsledky s následujícím označením: Semikvantitativní hodnocení výsledků Označení COBAS INTEGRA Rozmezí hodnot Bez označení Negativní < 25 <TEST RNG Negativní < 0 >TEST RNG Pozitivní > 50 POS 25 Pozitivní 25 Výše uvedená rozmezí hodnot jsou založená na hladině cut-off 25. Kvalitativní hodnocení výsledků Označení COBAS INTEGRA Rozmezí hodnot Bez označení Negativní < 1000 <TEST RNG Negativní < 0 >TEST RNG Pozitivní > 3000 POS 1000 Pozitivní 1000 Výše uvedená rozmezí hodnot jsou založená na přiřazení hodnoty 1000 cut-off hodnotě 25. Semikvantitativní hodnocení výsledků Semikvantifikaci předběžně pozitivních výsledků by měly laboratoře použít pouze k měření vhodného naředění vzorku pro potvrzení konfirmační metodou jakou je GC/MS. Laboratoři rovněž umožňuje zřídit postupy kontroly kvality a stanovit využití kontroly. Upozornění: Při použití funkce následného ředění (ředění 1:10) zajistěte, aby nedošlo k přílišnému naředění vzorku. Výsledek naředěného vzorku musí mít hodnotu alespoň poloviny hodnoty cut-off krát 10. Jestliže je naředěný výsledek menší než polovina hodnoty cut-off krát 10, zopakujte stanovení s menším ředěním. Ředění, která mají výsledky v blízkosti cutoff, poskytují nejpřesnější stanovení. Chcete-li určit koncentraci předběžně pozitivního vzorku, vynásobte výsledek odpovídajícím faktorem ředění. Ředění by mělo být použito jen při přípravě hodnot pro GC/MS. Omezení - interference Informace o látkách testovaných tímto stanovením jsou uvedeny v kapitole "Specifické údaje o využití" tohoto dokumentu. Možné však je, že mohou interferovat i jiné komponenty nebo faktory, které mohou negativně ovlivnit výsledek (např. technická chyba nebo chyba postupu). Předběžný pozitivní výsledek dosažený touto metodou indikuje přítomnost v moči. Nestanovuje však míru intoxikace. Pro diagnostické účely je vždy nezbytné používat výsledky ve spojení s anamnestickými údaji pacienta, klinickým vyšetřením a jinými nálezy. POTŘEBNÝ KROK Programování speciálního mytí: Při zpracovávání určitých kombinací testů na analyzátorech COBAS INTEGRA je použití speciálních mycích cyklů povinné. Pro další pokyny a pro nejnovější verzi seznamu Extra mycích cyklů čtěte, prosím, metodický list CLEAN. Tam, kde se to vyžaduje, musí být před vykazováním výsledků provedeno programování speciálního mytí/zamezení přenosu mezi vzorky (carry-over). Specifické údaje o využití Reprezentativní údaje o využití pro analyzátory COBAS INTEGRA jsou uvedeny níže. Výsledky získané v různých laboratořích se mohou lišit. Preciznost Preciznost byla stanovena podle interního postupu zpracováním sérií kontrol v 40 replikátech, jednou denně, po dobu 5 dnů. Následující výsledky byly získané analyzátorem COBAS INTEGRA 700. Semikvantitativní preciznost Opakovatelnost Prům. SD Hladina Hladina Hladina Hladina Mezilehlá preciznost Prům. SD Hladina Hladina Hladina Hladina Kvalitativní preciznost Cut-off (x) Počet testovaných Správné výsledky VK % VK % Hladina spolehlivosti 0.8x > 95% negativní odečet 1.2x > 95% pozitivní odečet Mez detekce testu / 5

4 Mez detekce představuje nejnižší měřitelnou hladinu analytu, kterou lze odlišit od nuly. Počítá se jako hodnota ležící 2 standardní odchylky nad nulovým kalibrátorem (nulový kalibrátor + 2 SD, opakovatelnost, n = 40). Správnost 100 vzorků moči získaných v klinických laboratořích, kde byly stanoveny jako negativní v panelu látek jinou technologií, bylo hodnoceno na na systému COBAS INTEGRA. Všech 100 klinických vzorků bylo negativních vůči cut-off vzorků moče, získaných v klinických laboratořích, kde byly stanoveny jako předběžně pozitivní komerčně dostupnou enzymoimunoanalýzou a potvrzeny jako pozitivní metodou GC/MS na, bylo rovněž hodnoceno na analyzátoru COBAS INTEGRA 700. Všech 50 vzorků bylo pozitivních stanovením COBAS INTEGRA Phencyclidine vůči cut-off 25. GC/MS + Analyzátor COBAS INTEGRA Analytická specifičnost Specifičnost stanovení COBAS INTEGRA Phencyclidine byla stanovena vytvořením inhibiční křivky pro jednu každou uvedenou sloučeninu a určením přibližného množství každé sloučeniny, která by byla ekvivalentní reaktivitě nordiazepamu při hodnotách cut-off 25. Sloučenina Přibližné odpovídající 25 Přibližné procento křížové reaktivity Thienylcyklohexylpiperidin (TCP) Chlorprothixen Dextrometorfan Interference léčiv Následující sloučeniny byly přidané k alikvotům poolované normální lidské moči v koncentraci Žádná z těchto sloučenin ve stanovení nevykázala křížovou reaktivitu větší nebo rovnou 0.5 %. Acetaminofen Kys. acetylsalicylová Aminopyrin Amitriptylin Amobarbital d-amfetamin l-amfetamin Ampicilin Kys. askorbová Aspartam Atropin Benzokain Benzoylekgonin (metabolit kokainu) Benzfetamin Butabarbital Kofein Chlornan vápenatý Karbamazepin Chlordiazepoxid Chlorochin Ibuprofen Imipramin Izoproterenol Ketamin Lidokain LSD MDA MDMA Melanin Meperidin Metadon d-metamfetamin Metakvalon Metylfenidat Metyprylon Morfin Naloxon Naltrexon Naproxen Niacinamid Nordoxepin Chlorfeniramin Chlorpromazin Kokain Kodein Cyklobenzaprin Dextropropoxyfen Diazepam Difenhydramin Dopamin Doxepin Doxylamin Ekgonin Ekgoninmetylester d-efedrin d,l-efedrin l-efedrin Epinefrin Erytromycin Estriol Fenoprofen Furosemid Kys. gentisová Glutetimid Guajakol glyceroléter Hydrochlorotiazid p-hydroxyamfetamin Hydroxyzin Noretindron l-norpseudoefedrin Ofloxacin Oxazepam Penicilin G Pentobarbital β-fenetylamin Fenobarbital Fenotiazin Fentermin Fenylbutazon d-fenylpropanolamin d,l-fenylpropanolamin Prokain Prometazin d-pseudoefedrin l-pseudoefedrin Chinidin Chinin Sekobarbital Sulindak Tetracyklin Kys. Δ 9 THC 9 karboxylová Tetrahydrozolin Trifluoperazin Tyramin Verapamil Jakákoliv modifikace přístroje, jak je zde uvedeno, vyžaduje validaci laboratoří. Odkazy 1 Karch SB, ed. Drug Abuse Handbook. Boca Raton, FL: CRC Press LLC Hardman JG, Limbird LE, Gilman A, eds. Goodman and Gilman s The Pharmacological Basis of Therapeutics. 10th ed. New York, NY: McGraw Hill Pub Co Baselt RC. Disposition of Toxic Drugs and Chemicals in Man. 7th ed. Foster City, CA: Biomedical Publications Clouet DH, ed. Phencyclidine: An Update. NIDA Research Monograph 64. National Institute on Drug Abuse De Souza EB, Clouet D, London ED, eds. Sigma,, and NMDA receptors. Research Monograph 133. National Institute on Drug Abuse Leshner AI. Hallucinogens and dissociative, including LSD,, Ketamine, dextromethorphan. NIH Publication Number , NIDA Research Report Series Laurenzana EM, Owens SM. Metabolism of phencyclidine by human liver microsomes. Drug Metab Dispos 1997;25: ElSohly MA, Little TL Jr, Mitchell JM, et al. GC/MS analysis of phencyclidine acid metabolite in human urine. J Anal Toxicol 1988;12: Armbruster DA, Schwarzhoff RH, Pierce BL, et al. Method comparison of EMIT II and ONLINE with RIA for drug screening. J Forensic Sci 1993;38: / 5

5 10 Toxicology and Drug Testing in the Clinical Laboratory; Approved Guideline. 2nd ed. (C52-A2). Clinical and Laboratory Standards Institute 2007;27: Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs. Fed Regist 2008 Nov 25;73: Tečka se v tomto metodickém listu vždy používá jako desetinný oddělovač k označení hranice mezi celými a desetinnými místy desetinného čísla. Oddělení tisíců se nepoužívá. Symboly Roche Diagnostics používá kromě symbolů a znaků uvedených v normě ISO následující znaky (pro USA: pro definici použitých symbolů navštivte stránku GTIN Obsah soupravy Objem po rekonstituci nebo promíchání Globální číslo obchodní položky Doplnění, odstranění nebo změny textu jsou označeny pruhem podél textu. 2016, Roche Diagnostics Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D Mannheim Distribuce v USA: Roche Diagnostics, Indianpolis, IN Zákaznická podpora v / 5