SBARB. Serum Barbiturates Informace pro objednání. Stanovení drog

Transkript

1 Informace pro objednání (200 testů) Abuscreen OnLine Calibrators 1: ml 2-5: ml TDM Control Set I (2 5 ml), II (2 5 ml), III (2 5 ml) Control Set DAT I PreciPos DAT Set I (2 10 ml) PreciNeg DAT Set I (2 10 ml) Systémové ID Analyzátory, na kterých lze cobas c pack použít COBAS INTEGRA 400 plus COBAS INTEGRA 800 Česky Systémové informace Test, test ID 0 670: implicitní typ vzorku - sérum Test UBARB, test ID 0 667: implicitní typ vzorku - moč Test a UBARB mohou být použity vzájemně zaměněné pro všechny typy vzorků. Použití () je in vitro diagnostický test pro detekci barbiturátů a jejich metabolitů v lidském séru, heparinizované plazmě nebo moči na systémech COBAS INTEGRA. Tyto reagencie jsou určeny pro použití u toxikologických screeningů, kde analytický výsledek je součástí zjišťování užívání nebo předávkování barbituráty. poskytuje pouze předběžný analytický výsledek. K získání potvrzeného analytického výsledku musí být použita více specifická alternativní chemická metoda. Upřednostňována je plynová chromatografie s hmotnostní spektrometrií (GC/MS). 1 Výsledky testů užívání drog, zvláště je-li předběžně pozitivní, je třeba hodnotit s klinickým zřetelem a odborným úsudkem. Souhrn Barbituráty, skupina drog odvozených od kyseliny barbiturové (malonylurea), jsou sedativní hypnotika účinkující na centrální nervový systém (CNS) s antidepresivní aktivitou. 1,2,3,4,5,6 Podle relativní délky trvání této aktivity se dělí do tříd (ultrakrátká, krátká, střední a dlouhotrvající aktivita). Předepisují se jako sedativa, snižující emoční napětí a navozující spánek a u některých typů epilepsie kvůli snížení četnosti výskytu záchvatů, kdy zvyšují práh záchvatu. Nadměrná dávka může způsobit poruchu koordinace motoriky (špatnou artikulaci, ztrátu rovnováhy), vjemové změny (chybné úsudky, zvýšení vnímavosti činnosti) a disinhibici euforie. Předávkování může způsobit apatii, kóma a smrt. Barbituráty v kombinaci s alkoholem, opiáty nebo jinými sedativy CNS mohou fatálně skončit, potlačením dechových funkcí. Ačkoliv jejich užití jako sedativně-hypnotická léčiva bylo nahrazeno benzodiazepiny, zůstává barbiturátům dál důležitá role anestetik a antikonvulsantních léčiv. Nejběžnější způsob podávání barbiturátů je perorální aplikace, i když je možné i intravenózní či intramuskulární podání. Po požití jsou v žaludku rychle resorbovány a vstupují do oběhu. Rozložení jednotlivých barbiturátů a jejich koncentrace v různých tkáních je z velké části závislá na jejich rozpustnosti v tucích a vazebné afinitě k proteinům; tukové zásoby a tkáně bohaté na proteiny kumulují tato léčiva nejvíce. Většina barbiturátů je metabolizována játry, oxidací a konjugací, dealkylací dusíku, hydroxylací dusíku anebo desulfatací thiobarbiturátů. Rozsah metabolizace v játrech závisí na druhu léčiva, neboť např. sekobarbital je z větší části oxidován na farmakologicky neaktivní metabolity, zatímco relativně vysoké procento fenobarbitalu a barbitalu je vylučováno prakticky v nezměněné podobě močí. Barbituráty jsou vylučovány jako směs aktivního léčiva a metabolitů, jejichž vzájemný poměr a koncentrace závisí na vlastnostech požadovaného barbiturátu. Princip testu Fluorescenční polarizace Stanovení COBAS INTEGRA barbiturátů v séru probíhá v systémech COBAS INTEGRA na principu fluorescenční polarizace. Jestliže je fluorescentní molekula nebo fluorofor osvícen světlem určité vlnové délky (excitační), část světla absorbuje. Po několika nanosekundách je absorbované světlo emitováno, ale s jinou, delší vlnovou délkou (emisní). Jestli bude emitované světlo polarizované či ne, závisí na možnosti fluoroforu rotovat v roztoku. Malé molekuly, jako je fluorescein, mohou rotovat rychleji před emisí světla, což znamená, že emitované světlo je depolarizované. Naproti tomu fluorescenční makromolekuly, jako fluoresceinem značený protein, rotují mnohem pomaleji. Ve stejném časovém úseku tak mezi excitací a emisí budou makromolekuly rotovat velmi pomalu a emitované světlo bude polarizované. 7 Fluorescenční polarizace je reprodukovatelnou funkcí koncentrace léčiva. Je vhodná pro semikvantitativní detekci barbiturátů v séru, plazmě nebo moči pro účely toxikologického screeningu. Kvůli zajištění disociace léčiv od sérových proteinů a zabránění nespecifických vazeb značkovače jsou přítomny povrchově aktivní látky. Reagencie - pracovní roztoky R1 R2 SR Reagencie s protilátkou Protilátka proti sekobarbitalu (ovčí polyklonální) v pufru, ph 7.5, se stabilizátory a konzervans Diluent Pufr obsahující stabilizátor a konzervans. Tracer Derivát sekobarbitalu značený fluoresceinem v pufru, ph 8.0, se stabilizátorem a konzervans R1 je v pozici A, R2 je v pozici B a SR je v pozici C. Bezpečnostní opatření a varování Věnujte pozornost všem varováním a bezpečnostním opatřením uvedeným v části 1 / Úvod této Příručky metod. Pro USA: Pouze na předpis. Zacházení s reagenciemi Připravena k použití Uskladnění a stabilita Doba skladování při 2 8 C: Analyzátor COBAS INTEGRA 400 plus Na palubě při použití při C Analyzátor COBAS INTEGRA 800 Na palubě při použití při 8 C Čtěte datum exspirace na štítku balení cobas c pack 8 týdnů 16 týdnů Reagencie nemrazit. Reagencie, které byly zmrazeny, je nutné odstranit. Odběr vzorků a příprava Pro odběr a přípravu vzorků používejte pouze vhodné zkumavky nebo odběrové nádobky. Pouze níže uvedené vzorky byly testované a jsou přijatelné. Sérum a heparinizovaná plazma: Uvedené druhy vzorků byly testované s vybranými typy odběrových zkumavek, které byly komerčně dostupné v té době, tzn., že do testu nebyly zařazené všechny typy zkumavek všech výrobců. Systémy odběru vzorků různých výrobců mohou obsahovat různé materiály, které mohou mít v některých případech zásadní vliv na výsledky. Při zpracování vzorků 1 / 5

2 v primárních zkumavkách (systémy odběru vzorků) dodržujte pokyny jejich výrobce. Vzorky obsahující precipitáty centrifugujte před provedením stanovení. Sérum a heparinizovaná plazma by měly být zpracovány do 8 hodin od odběru, jsou-li uchovávány při pokojové teplotě. Mají-li být vzorky uskladněny pro pozdější testování, lze je uchovávat po dobu 48 hodin při 2 8 C nebo po delší dobu při teplotě 20 C nebo nižší. Vzorky séra a heparinizované plazmy by se neměly opakovaně zmrazovat a rozmrazovat. Před zpracováním rozmrazený vzorek důkladně promíchejte. Moč: Vzorky moče odebírejte do čistých skleněných nebo plastových nádobek. Vzorky čerstvé moče nepotřebují zvláštní předúpravu nebo zacházení, ale měly by být ochráněny před kontaminací při pipetování. Vzorky by měly být v běžném fyziologickém rozmezí ph 5 8. Nejsou potřeba žádná aditiva ani konzervans. Doporučujeme uchovávat vzorky při teplotě 2 8 C a zpracovat je do 5 dnů od odběru. 8 Při delším skladování doporučujeme vzorek zamrazit. Velmi zakalené vzorky před analýzou zcentrifugujte. Příměs či naředění vzorků může způsobit chybný výsledek. Při podezření, že byl vzorek znehodnocen, proveďte nový odběr. Testování validity vzorku se vyžaduje u vzorků odebíraných podle Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs. 9 Varování: Ředění vzorku by mělo být použito jen při jejich přípravě pro GC/MS ale jinak není vhodné. Postup ředění, je-li použit, by měl být validován. Dodávaný materiál Reagencie jsou uvedeny v části "Reagencie - pracovní roztoky". Stanovení Optimálního využití stanovení dosáhnete, budete-li dodržovat pokyny uvedené v dokumentaci pro příslušný analyzátor. Pokyny ke stanovení specifické pro analyzátor vyhledejte v příslušném návodu k použití. Aplikace pro sérum, plazmu nebo moč Definice testu COBAS INTEGRA 400 plus Způsob měření Způsob reakce Excitační vlnová délka Emisní vlnová délka Rozmezí testu s následným ředěním FP R1-R2-S-SR 485 nm 515 nm ( µmol/l) ( µmol/l) Faktor postdiluce doporučuje se 20 Odečít. cyklus blank/test 45/61 Jednotka Pipetovací parametry Sérum, plazma, moč Diluent (H 2 O) R1 90 µl 15 µl R2 25 µl 20 µl Vzorek 5 µl 10 µl SR 15 µl 30 µl Celkový objem 210 µl Definice testu COBAS INTEGRA 800 Způsob měření Způsob reakce Excitační vlnová délka Emisní vlnová délka Rozmezí testu s následným ředěním FP R1-R2-S-SR 485 nm 515 nm ( µmol/l) ( µmol/l) Faktor postdiluce doporučuje se 20 Odečít. cyklus blank/test 40/60 Jednotka Pipetovací parametry Sérum, plazma, moč Diluent (H 2 O) R1 90 µl 15 µl R2 45 µl 15 µl Vzorek 4 µl 11 µl SR 20 µl 10 µl Celkový objem 210 µl Kalibrace Kalibrátory Mód kalibrace Logit/Log 4 Opakování kalibrace Odchylka nízká/vysoká Kalibrační interval Abuscreen OnLine Serum Barbiturates Calibrators CAL 1-5 0, 0.5, 1, 2, 4 sekobarbitalu (0, 2.1, 4.2, 8.4, 16.9 µmol/l), systémové ID Doporučen duplikát < 5 při 0.5 ( 2.1 µmol/l) Každou šarži, každých 8 týdnů a jestliže to vyžaduje proces kontroly kvality Každou šarži, každých 16 týdnů a jestliže to vyžaduje proces kontroly kvality Kalibrační křivka je vytvářena použitím kalibrátorů. Kalibrátory musí být umístěny podle hodnot od nejvyšší (5) po nejnižší (1) do CAL/QC stojánku. Vytvořená křivka je uložena v paměti systému COBAS INTEGRA a podle potřeby znovu vyvolána. Návaznost: Abuscreen OnLine Calibrators se připravují tak, aby obsahovaly známé množství sekobarbitalu v normálním lidském séru a měly návaznost na USP referenční standardy. Kontrola kvality Kontrola kvality séra, plazmy Kontrola kvality moči Pořadí kontrol Kontrola po kalibraci TDM Control Set Hladina I TDMC1, systémové ID Hladina II TDMC2, systémové ID Hladina III TDMC3, systémové ID Control Set DAT I PreciPos DAT Set I DAT1P, systémové ID PreciNeg DAT Set I DAT1N, systémové ID Určeno uživatelem Doporučena Ke kontrole kvality použijte kontrolní materiály uvedené v části "Informace pro objednání". Navíc lze použít i jiný vhodný kontrolní materiál. Koncentrace drog v Control Set DAT I byly verifikovány GC/MS. 2 / 5

3 Kontrolní intervaly a meze by měly být uzpůsobeny pro každou laboratoř dle individuálních požadavků. Naměřené hodnoty by se měly pohybovat v definovaných mezích. Každá laboratoř by měla mít vypracovaná nápravná opatření pro případ, že hodnoty překročí definované meze. Sledujte příslušná vládní nařízení a lokální směrnice kontroly kvality. Výpočet Po dokončení stanovení systémy COBAS INTEGRA vypočítají automaticky milipolarizační jednotky (mp) značené látky. Poté, co byly vypočítány hodnoty mp pro 5 kalibrátorů, systém vypočítá metodou nelineární regresní analýzy nejmenších čtverců nejvhodnější kalibrační křivku. Koncentrace analytu v každém vzorku je pak vypočtena interpolací naměřené hodnoty mp z kalibrační závislosti. Převodní faktor: = Omezení - interference Informace o látkách testovaných tímto stanovením jsou uvedeny v kapitole "Specifické údaje o využití" tohoto dokumentu. Možné však je, že mohou interferovat i jiné komponenty nebo faktory, které mohou negativně ovlivnit výsledek (např. technická chyba nebo chyba postupu). Předběžný pozitivní výsledek dosažený touto metodou indikuje přítomnost barbiturátů ve vzorku. Nevyjadřuje míru zhoršení. Koncentrace odečtená v sekobarbitalu je jen odhadem, jelikož vazebná kapacita protilátky se liší pro jednotlivé barbituráty a jejich metabolity. Pokud je potřeba specifická identifikace a kvantifikace barbiturátů, je nutné zvolit screeningový test s vyrovnanou citlivostí. Extrakční postupy musí být optimalizovány pro rozdílné barbituráty. Vzorky s vysokým fluorescenčním pozadím nebo vykazující hodnotu polarizovaného světla vyšší než má nulový kalibrátor budou systémem označeny. Sérum, plazma Vzorky sekobarbitalu při 0.7 a 3 (3.0 a 12.6 µmol/l): Hemolýza 10 nebo méně do 10 g/l hemoglobinu Vzorky sekobarbitalu při 1 a 3 (4.2 a 12.6 µmol/l): Ikterus 10 nebo méně do 24 mg/dl bilirubinu Vzorek sekobarbitalu při 1.1 a 3.2 (4.6 a 13.5 µmol/l): Lipémie 10 nebo méně do 1000 mg/dl triglyceridů Vzorek sekobarbitalu při 0.83 a 3.1 (3.5 a 13.1 µmol/l): Celkový protein 10 nebo méně od g/dl Pro diagnostické účely je vždy nezbytné používat výsledky ve spojení s anamnestickými údaji pacienta, klinickým vyšetřením a jinými nálezy. POTŘEBNÝ KROK Programování speciálního mytí: Při zpracovávání určitých kombinací testů na analyzátorech COBAS INTEGRA je použití speciálních mycích cyklů povinné. Pro další pokyny a pro nejnovější verzi seznamu Extra mycích cyklů čtěte, prosím, metodický list CLEAN. Tam, kde se to vyžaduje, musí být před vykazováním výsledků provedeno programování speciálního mytí/zamezení přenosu mezi vzorky (carry-over). Očekávané hodnoty Výsledky získané s COBAS INTEGRA cobas c pack na systémech COBAS INTEGRA jsou založené na citlivosti stanovení, křížové reaktivitě a výtěžnosti. Vzorky s indikovanou přítomností barbiturátů mohou být dále vyhodnocovány pro identifikaci přítomnosti jednotlivých barbiturátů. Specifické údaje o využití Reprezentativní údaje o využití pro analyzátory COBAS INTEGRA jsou uvedeny níže. Výsledky získané v různých laboratořích se mohou lišit. Specifické údaje o použití pro sérum a plazmu Preciznost Preciznost byla zjištěna pomocí sérových kontrol podle doporučení NCCLS EP5 T2 10 (opakovatelnost n = 80, mezilehlá preciznost 1 a) n= 80, mezilehlá preciznost 2 b) n= 80). Následující výsledky byly získány analyzátorem COBAS INTEGRA 700: Opakovatelnost (µmol/l) Hladina I 0.5 (2.1) Hladina II 1.1 (4.6) Hladina III 1.9 (8.0) Mezilehlá preciznost 1 a) (µmol/l) Hladina I 0.5 (2.1) Hladina II 1.1 (4.6) Hladina III 1.9 (8.0) Mezilehlá preciznost 2 b) (µmol/l) Hladina I 0.5 (2.1) Hladina II 1.1 (4.6) Hladina III 1.9 (8.0) a) preciznost mezi sériemi b) celková preciznost Mez detekce testu (0.27 µmol/l) pro sérum 0.03 (0.13 µmol/l) pro sérum Mez detekce představuje nejnižší měřitelnou hladinu analytu, kterou lze odlišit od nuly s 95 pravděpodobností. Správnost 175 negativních vzorků sér a plazmy bylo vyhodnoceno použitím reagencie COBAS INTEGRA (předběžně pozitivní při 0.5 ) na analyzátoru COBAS INTEGRA 700 a komerčně dostupnou EIA (předběžně pozitivní při 3 ). 100 těchto vzorků bylo negativních použitím reagencií COBAS INTEGRA a komerčně dostupnou EIA. 47 vzorků sér a plazmy, získaných z klinické laboratoře, bylo vyhodnoceno použitím reagencií COBAS INTEGRA (předběžně pozitivní při 0.5 ), komerčně dostupnou FPIA (předběžně pozitivní při 2 ), komerčně dostupnou EIA (předběžně pozitivní při 3 ) a GC/MS (pozitivní při 0.1 pro butalbital, sekobarbital a pentobarbital, 0.16 pro fenobarbital). 35 z těchto vzorků bylo předběžně pozitivních použitím reagencie COBAS INTEGRA a GC/MS a 10 bylo negativních. Zbývající 2 vzorky byly negativní stanovením COBAS INTEGRA, FPIA, EIA a pozitivní podle GC/MS. Výsledky GC/MS pro tyto 2 vzorky byly 0.77 a 0.33 pro fenobarbital. Tabulka níže uvádí souhrn výsledků studie. GC/MS COBAS INTEGRA 700 pozitivní při 0.5 ) FPIA pozitivní při 2 ) EIA pozitivní při 3 ) Analytická specifičnost Specifičnost stanovení COBAS INTEGRA pro některé běžné barbituráty a strukturálně podobné sloučeniny byla zjištěna přidáním známého množství testované sloučeniny do lidského séra bez léčiv anebo moči bez léčiv a stanoveno pomocí cobas c pack COBAS INTEGRA. Křížová reaktivita byla označena jako "nedetekovatelná" (ND), jestliže získaná hodnota byla nižší než je citlivost stanovení. Křížová reaktivita () = 100 (analytický výsledek - koncentrace analytu) koncentrace interferentu 3 / 5

4 Léčivo Testovaná hladina Křížová reaktivita v séru Křížová reaktivita v moči Allobarbital Amobarbital Amobarbital Aprobarbital Barbital Kys. barbiturová 1 ND ND Butabarbital Butabarbital Butalbital Butethal Cyklopentobarbital Kys. diallylbarbiturová Kys.1,3-dimethyl barbiturová Difenylhydantoin 1 ND ND d,l- Gluthetimid 1 ND ND Hexobarbital p-hydroxyfenobarbital p-hydroxyfenytoin 220 ND ND Mefobarbital Pentobarbital Fenobarbital Fenobarbital Thiopental Thiopental ND = nedetekovatelné - = nehodnoceno Interference léčiv Následující sloučeniny byly přidány do normálního lidského séra v koncentraci 10 (42.2 µmol/l). Žádná z těchto sloučenin při testování soupravou nevykázala hodnotu rovnající se nebo větší než 0.2. Acetaminofen Kys. acetylsalicylová Aminopyrin Amitriptylin d-amfetamin d,l-amfetamin l-amfetamin Ampicilin Kys. askorbová Aspartam Atropin Benzokain Benzoylekgonin (metabolit kokainu) Benzfetamin Bromfeniramin Kofein Lidokain L MDA MDMA Melanin Meperidin Metadon d-metamfetamin l-metamfetamin Metapyrilen Metaqualon Metylfenidat Metyprylon Morfin Naloxon Naltrexon Naproxen Chlornan vápenatý Chlordiazepoxid Chlorochin Chlorfeniramin Chlorpromazin Clemastin Kokain Kodein Cyclizin Desipramin Dextrometorfan Dextropropoxyfen Diazepam Difenhydramin Dopamin Doxylamin Ekgonin Ekgoninmetylester d-efedrin d,l-efedrin l-efedrin Epinefrin Erytromycin Estriol 17-α-Etynylestradiol Niacinamid Nordiazepam Noretindron l-norpseudoefedrin Nortriptylin Oxazepam Penicilin G Fencyklidin β-fenetylamin Fenotiazin Fentermin Fenylbutazon Fenylpropanolamin d-fenylpropanolamin d,l-fenylpropanolamin Fenyltoloxamin Prokain Procyclidin Prometazin d-pseudoefedrin l-pseudoefedrin Chinidin Chinin Sulindak Tetracyklin Fenoprofen Δ 9 THC-9-karboxylová k. Furosemid Kys. gentisová Guajakol glyceroléter Hydrochlorotiazid p-hydroxyamfetamin Ibuprofen Imipramin Izoproterenol Ketamin Tetrahydrozolin Thioridazin Trifluoperazin d,l-trihexyfenidyl Trimipramin Tripelenamin Tyramin Verapamil Zomepirac Specifické údaje o použití pro moč Preciznost Preciznost byla zjištěna použitím močových kontrol podle doporučení NCCLS EP5 T2 10 (opakovatelnost n = 80, mezilehlá preciznost 1 c) n= 80, mezilehlá preciznost 2 d) n= 80). Následující výsledky byly získány analyzátorem COBAS INTEGRA 700: Opakovatelnost (nmol/l) Hladina I (572.9) Hladina II (934.9) Hladina III (1161.7) Mezilehlá preciznost 1 c) (nmol/l) Hladina I (572.9) Hladina II (934.9) / 5

5 Mezilehlá preciznost 1 c) (nmol/l) Hladina III (1161.7) Mezilehlá preciznost 2 d) (nmol/l) Hladina I (572.9) Hladina II (934.9) Hladina III (1161.7) c) preciznost mezi sériemi d) celková preciznost Mez detekce testu 65 (274 nmol/l) pro moč 80 (345.6 nmol/l) pro moč Mez detekce představuje nejnižší měřitelnou hladinu analytu, kterou lze odlišit od nuly s 95 pravděpodobností. Správnost 114 negativních vzorků moče bylo vyhodnoceno použitím reagencií COBAS INTEGRA () (předběžně pozitivní v moči při 200 ) na analyzátoru COBAS INTEGRA 700 a jinou metodou s reagenciemi COBAS INTEGRA Barbiturates (BARB), které používají KIMS technologii (předběžně pozitivní v moči při 200 ). 100 bylo negativních použitím reagencií COBAS INTEGRA Serum Barbiturates (). 60 vzorků moči, získaných z klinické laboratoři, bylo vyhodnoceno použitím reagencie COBAS INTEGRA () (předběžně pozitivní v moči při 200 ), reagencií COBAS INTEGRA Barbiturates (BARB) (předběžně pozitivní v moči pro 200 ) a GC/MS (pozitivní při 25 pro fenobarbital, butabarbital nebo sekobarbital). V této klinické studii byl jen 1 vzorek shledán negativním GC/MS a předběžně pozitivním oběma imunometodami. Je velmi pravděpodobné, že vzorek obsahoval jiné barbituráty než fenobarbital, butabarbital a sekobarbital. Tabulka níže uvádí souhrn výsledků studie. 7 Dandliker WB, Feigen GA. Quantification of the antigen-antibody reaction by the polarization of fluorescence. Biochem Biophys Res Comm 1961;5: Toxicology and Drug Testing in the Clinical Laboratory; Approved Guideline. 2nd ed. (C52-A2). Clinical and Laboratory Standards Institute 2007;27:33. 9 Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs. Fed Regist 2008 Nov 25;73: National Committee for Clinical Laboratory Standards. User Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices; Tentative Guideline. Villanova, PA.: NCCLS;1992;4(12). NCCLS Publication EP5-T2. Tečka se v tomto metodickém listu vždy používá jako desetinný oddělovač k označení hranice mezi celými a desetinnými místy desetinného čísla. Oddělení tisíců se nepoužívá. Symboly Roche Diagnostics používá následující symboly a znaky, včetně uvedených v normě ISO GTIN Obsah soupravy Objem po rekonstituci nebo promíchání Globální číslo obchodní položky Doplnění, odstranění nebo změny textu jsou označeny pruhem podél textu. 2015, Roche Diagnostics Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D Mannheim Distribuce v USA: Roche Diagnostics, Indianpolis, IN Zákaznická podpora v GC/MS COBAS INTEGRA 700 pozitivní při 200 ) FPIA pozitivní při 200 ) Jakákoliv modifikace přístroje, jak je zde uvedeno, vyžaduje validaci laboratoří. Odkazy 1 Karch SB, ed. Drug Abuse Handbook. Boca Raton, FL: CRC Press LLC Wesson DR, Smith DE. Barbiturates: Their Use, Misuse, and Abuse. New York, NY: Human Sciences Press Robinson AE, McDowall RD. The distribution of amylobarbitone, butobarbitone, pentobarbitone and quinalbarbitone and the hydroxylated metabolites in man. J Pharm Pharmacol 1979;31: Hardman JG, Limbird LE, Gilman A, eds. Goodman and Gilman s The Pharmacological Basis of Therapeutics. 10th ed. New York, NY: McGraw Hill Pub Co Baselt RC. Disposition of Toxic Drugs and Chemicals in Man. 7th ed. Foster City, CA: Biomedical Publications Barbiturates - A Medical Dictionary, Bibliography, and Annotated Research Guide to Internet Reference. San Diego, CA: ICON Group International Inc / 5