MDN2. Metadon II Informace pro objednání. Analyzátory, na kterých lze cobas c pack(y) použít

Transkript

1 Informace pro objednání ONLINE DAT Methadone II 100 testů Systémové ID Preciset DAT Plus I calibrators CAL 1 6 (6 x 5 ml) Kódy C.f.a.s. DAT Qualitative Plus (6 x 5 ml) C.f.a.s. DAT Qualitative Plus Clinical (3 x 5 ml) Kód Control Set DAT I PreciPos DAT Set I (2 x 10 ml) PreciNeg DAT Set I (2 x 10 ml) Control Set DAT Clinical PreciPos DAT Clinical (2 x 10 ml) PreciNeg DAT Clinical (2 x 10 ml) Analyzátory, na kterých lze cobas c pack(y) použít Roche/Hitachi cobas c 701/702 Česky Systémové informace MD3Q0: ACN 8447: pro kvalitativní stanovení MD3S0: ACN 8448: pro semikvantitativní stanovení MD3QC: ACN 8792: pro kvalitativní stanovení; použitím C.f.a.s. DAT Qualitative Plus Clinical Použití Methadone II () je in vitro diagnostický test pro kvalitativní a semikvantitativní detekci metadonu v lidské moči na systémech Roche/Hitachi cobas c s hodnotou cut-off 300. Získat lze semikvantitativní výsledky testu, které umožňují laboratořím určit využití stanovení jako součást programu kontroly kvality. Semikvantitativní stanovení slouží k měření vhodného naředění vzorku potvrzením konfirmační metody jako je plynová chromatografie/hmotnostní spektrometrie (GC/MS). Methadone II poskytuje pouze předběžný analytický výsledek. K získání potvrzeného analytického výsledku musí být použita více specifická alternativní chemická metoda. Preferovanou konfirmační metodou je GC/MS. 1 Výsledky testů užívání drog, zvláště jsou-li předběžně pozitivní, je třeba hodnotit s klinickým zřetelem a s odborným úsudkem. Souhrn Metadon je syntetický difenylpropylamin, používaný pro detoxifikaci a dočasný doplněk narkotik při potlačení akutních a chronických bolestí. Metadon má mnoho farmakologických vlastností morfinu a jeho analgetický účinek je podobný. Na rozdíl od morfinu má opakované užívání silné sedativní účinky kvůli hromadění drogy v těle. Abstinenční příznaky má metadon kvalitativně podobné jako morfin, rozdíl je v tom, že se rozvíjejí pomaleji s menší intenzitou, ale po delší dobu. 2 Kvůli těmto vlastnostem se metadon užívá při léčbě závislosti na drogách, speciálně při eliminaci závislosti na nezákonných opiátech. Předávkování metadonem se projevuje strnulostí, dýchacími obtížemi, studenou a vlhkou kůží, hypotenzí, kómatem a kolapsem oběhu. 3 Metadon se podává intramuskulárně v případě, že jsou využívány jeho analgetické vlastnosti, a orálně v případě léčby závislosti. Po požití je metadon vcelku rychle absorbován v gastrointestinálním traktu a rychle distribuován do jater, plic, ledvin, slinivky, krve a moči. Skutečnost, že se metadon ve velké míře váže na tkáňové proteiny, vysvětluje jeho kumulativní efekt. 4 Metadon je většinou metabolizován mono a di N demethylací. Spontánní cyklizace má za následek vznik nestabilních sloučenin hlavních metabolitů: 2 etyliden 1,5 dimetyl 3,3 difenylpyrolidin (EDDP) a 2 etyl 5 metyl 3,3 difenylpyrolidin (EMDP). Obě jsou hydrolyzovány v různém rozsahu s následovnou glukuronidací. 5,6 Při udržování pacientů může vylučování nezměněného metadonu tvořit 5 50 dávky. ph moči má rovněž vliv na podílu vyloučeného metadonu v nezměněné podobě, stejně jako objem moči, dávka a individuální metabolismus. 7,8 Princip testu Toto stanovení je založeno na kinetické interakci mikročástic v roztoku (KIMS) 9,10, která se měří jako změna průchodu světla. V případě absence léčiva ve vzorku se volný konjugát léčiva váže na protilátku, vázanou na mikročástici, a vytváří agregáty. Jak probíhá agregace ve vzorku, který neobsahuje drogu, absorbance roste. Jestliže vzorek moči obsahuje příslušné léčivo, probíhá kompetice léčiva s konjugátem derivátu léčiva o protilátku vázanou na mikročástice. Protilátka vázaná na léčivo ve vzorku není již dostupná pro podporu agregace částic a následný vznik struktury částic je inhibován. Přítomnost léčiva ve vzorku úměrně snižuje nárůst absorbance vůči koncentraci drogy ve vzorku. Obsah léčiva ve vzorku se měří poměrem ke známé hodnotě cut-off koncentrace léčiva. 11 Reagencie - pracovní roztoky R1 R2 Mikročástice s konjugovaným derivátem metadonu; pufr; hovězí sérový albumin, 0.09 azid sodný Mikročástice navázané na protilátky metadonu (myší monoklonální); pufr; hovězí sérový albumin; 0.09 azid sodný R1 je v pozici B a R2 je v pozici C. Bezpečnostní opatření a varování Pro diagnostické použití in vitro. Dodržujte běžná bezpečnostní opatření, nutná pro nakládání se všemi reagenciemi. Likvidace všech odpadních materiálů musí probíhat v souladu s místními předpisy. Bezpečnostní listy jsou pro odborné uživatele dostupné na vyžádání. Zacházení s reagenciemi Připravena k použití Před použitím zásobník reagencií opatrně několikrát otočte, aby se složky reagencií promíchaly. Uskladnění a stabilita Doba skladování při 2 až 8 C: Na palubě při použití a v chlazeném prostoru analyzátoru: Na palubě Reagent Manageru: Nemrazit. Čtěte datum exspirace na štítku balení cobas c pack 2 týdny 24 hodin Odběr vzorků a příprava Pouze níže uvedené vzorky byly testovány a jsou přijatelné. Moč: Vzorky moče odebírejte do čistých skleněných či plastových nádobek. Vzorky čerstvé moče nepotřebují zvláštní předúpravu nebo zacházení, ale měly by být ochráněny před kontaminací při pipetování. Vzorky by měly být v běžném fyziologickém rozmezí ph 5 8. Nejsou potřeba žádná aditiva ani konzervans. Doporučujeme uchovávat vzorky při teplotě 2 8 C a zpracovat je do 5 dnů od odběru. 12 Při delším skladování doporučujeme vzorky zmrazit. Velmi zakalené vzorky před analýzou zcentrifugujte. Příměs či naředění vzorků může způsobit chybný výsledek. Při podezření, že byl vzorek znehodnocen, proveďte nový odběr. Testování validity vzorku se vyžaduje u vzorků odebíraných podle Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs 13. VÝSTRAHA: Ředění vzorků by se mělo používat pouze k interpretaci výsledku alarmů Calc.? a Samp.? nebo při odhadu koncentrace při přípravě 1 / 5

2 pro GC/MS. Výsledky ředění nejsou určeny pro hodnoty pacientů. Postup ředění, je-li použit, by měl být validován. Dodávaný materiál Reagencie jsou uvedeny v části "Reagencie - pracovní roztoky". Potřebný materiál (ale nedodávaný se soupravou) Viz část "Informace pro objednání" Celkové vybavení laboratoře Stanovení Optimálního využití stanovení dosáhnete, budete-li dodržovat pokyny uvedené v dokumentaci pro příslušný analyzátor. Pokyny ke stanovení specifické pro analyzátor vyhledejte v příslušném návodu k použití. Provádění aplikací, které nejsou schváleny Roche, je bez záruky a musí být definováno uživatelem. Aplikace pro moč V menu Utility, Application screen, Range tab zrušte pro tyto aplikace Automatic rerun. Definice testu cobas c 701/702 Semikvantitativní Kvalitativní Typ stanovení 2 Point End 2 Point End Reakční čas / Body stanovení 10 / / Vlnová délka (sub/main) /546 nm /546 nm Směr reakce Nárůst Nárůst Jednotka mabs Pipetování reagencie Diluent (H 2 O) R1 90 µl R2 40 µl Množství vzorku Vzorek Ředění vzorku Vzorek Diluent (H 2 O) Běžný 2.0 µl Snížený 2.0 µl Zvýšený 2.0 µl Kalibrace Kalibrátory Semikvantitativní aplikace S1 5: Kalibrátory Preciset DAT Plus I, CAL 1 5 0, 150, 300, 600, 2000 Kvalitativní aplikace S1: C.f.a.s. DAT Qualitative Plus, C.f.a.s. DAT Qualitative Plus Clinical nebo kalibrátor Preciset DAT Plus I - CAL Koncentrace látek kalibrátorů byly verifikovány GC/MS. Kalibrace K faktor Pro kvalitativní aplikace zadejte K faktor jako v nabídce Kalibrace, obrazovka Stav, okno Výsledek kalibrace. Typ kalibrace Semikvantitativní aplikace Result Calculation Mode (RCM - mód výpočtu výsledků) a) Kvalitativní aplikace Linear Frekvence kalibrace Plná (semikvantitativní) nebo blank (kvalitativní) kalibrace po změně šarže reagencií jestliže to vyžaduje proces kontroly kvality a) Čtěte část Výsledky. Návaznost: Tato metoda byla standardizována dle primární referenční metody (GC/MS). Kontrola kvality Ke kontrole kvality použijte kontrolní materiály uvedené v části "Informace pro objednání". Navíc lze použít i jiný vhodný kontrolní materiál. Koncentrace drog v Control Set DAT I a Clinical byly verifikovány GC/MS. Kontrolní intervaly a limity by měly být uzpůsobeny pro každou laboratoř dle individuálních požadavků. Naměřené hodnoty by se měly pohybovat v definovaných mezích. Každá laboratoř by měla mít vypracovaný postup pro případ, že hodnoty kontrol překročí definované meze. Sledujte příslušná vládní nařízení a lokální směrnice kontroly kvality. Výsledky Pro kvalitativní stanovení je cut-off kalibrátor použit jako reference pro odlišení předběžně pozitivních a negativních vzorků. Vzorky s pozitivní nebo "0" hodnotou absorbance se považují za předběžně pozitivní. Předběžně pozitivní vzorky jsou označeny > Test. Vzorky produkující negativní hodnotu absorbance jsou považovány za negativní. Před výsledkem negativních vzorků je znaménko minus. Pro semikvantitativní stanovení vytváří počítač analyzátoru kalibrační křivku na základě naměřených absorbancí standard pomocí 4parametrové logit log funkce (RCM). Logit log funkce proloží hladkou křivku jednotlivými body. Počítač analyzátoru interpolací naměřených absorbancí vzorků z logit log funkce vypočítá koncentraci látky nebo jejích metabolitů. UPOZORNĚNÍ: Je-li získán výsledek alarmu Calc.? nebo Samp.?, prohlédněte výstupy vzorku na obrazovce Reaction Monitor a porovnejte je s údaji Reaction Monitor pro nejvyšší kalibrátor. Nejpravděpodobnější příčinou je vysoká koncentrace analytu ve vzorku, kdy jinak by měla být hodnota absorbance menší než hodnota nejvyššího kalibrátoru. Nařeďte vzorek kalibrátorem s koncentrací 0 v potřebném poměru a zopakujte stanovení. Normální moč bez přítomnosti drog lze nahradit za 0 kalibrátor, jsou-li moč a postup validovány laboratoří. Aby nedošlo k přeředění porovnejte výsledek ředěného vzorku před vynásobením faktorem ředění s hodnotou cut-off, přesněji s polovinou hodnoty cut-off. Jestliže je ředěný výsledek menší než polovina cut-off, zopakujte stanovení s menším ředěním. Ředění, která mají výsledky v blízkosti cut-off, poskytují nejpřesnější stanovení. Chcete-li určit koncentraci předběžně pozitivního vzorku, vynásobte výsledek odpovídajícím faktorem ředění. Ředění by se mělo používat pouze k interpretaci výsledku alarmů Calc.? a Samp.? nebo při odhadu koncentrace při přípravě pro GC/MS. Při vydávání výsledků mějte na paměti, že na výsledek stanovený z moči má vliv množství faktorů, jako příjem tekutin a jiné biologické faktory. Jako u každého senzitivního testu na užívání drog na automatizovaných analyzátorech klinické chemie, existuje možnost přenosu analytu mezi vzorkem (carry over) s extrémně vysokou koncentrací a normálním (negativním) vzorkem, pokud následují ihned po sobě. Všechny předběžně pozitivní výsledky potvrďte jinou metodou. Omezení - interference 14 Informace o látkách testovaných tímto stanovením jsou uvedeny v kapitole "Specifické údaje o využití" tohoto dokumentu. Možné však je, že mohou interferovat i jiné komponenty nebo faktory, které mohou negativně ovlivnit výsledek (např. technická chyba nebo chyba postupu). Předběžný pozitivní výsledek, dosažený touto metodou, indikuje přítomnost metadonu a/či jeho metabolitů v moči. Nestanoví však míru intoxikace. Interferující látky byly přidány do moči bez drog a s koncentrací uvedenou níže. Tyto vzorky byly doplněny použitím zásobního roztoku metadonu na 300. Vzorky byly testovány na analyzátoru Roche/Hitachi 917 a byly získány následující výsledky: Látka Testované koncentrace Výtěžnost metadonu Aceton Kys. askorbová / 5

3 Bilirubin 0.25 mg/ml 92 Kreatinin 5 mg/ml 104 Etanol Glukóza Hemoglobin 7.5 g/l 112 Lidský albumin Kys. oxalová 2 mg/ml 104 Chlorid sodný 0.5 M 100 Chlorid sodný 1 M 98 Močovina Pro diagnostické účely je vždy nezbytné používat výsledky ve spojení s anamnestickými údaji pacienta, klinickým vyšetřením a jinými nálezy. POTŘEBNÝ KROK Programování speciálního mytí: Při zpracovávání určitých kombinací testů na systémech Roche/Hitachi cobas c je povinné použití speciálních mycích cyklů. Veškeré programování speciálního mytí nezbytné pro zamezení carry-over je dostupné přes cobas link, ruční zadávání není potřebné. Poslední verzi Seznamu zamezení přenosu mezi vzorky (carry over) lze rovněž nalézt u metodického listu NaOHD/SMS/Smpcln1+2/SCCS a pro další pokyny čtěte příručku pro obsluhu. Tam, kde je to vyžadováno, musí být před vykazováním výsledků provedeno programování speciálního mytí/zamezení přenosu mezi vzorky (carry over). Očekávané hodnoty Kvalitativní stanovení Výsledky tohoto stanovení rozlišují pouze předběžně pozitivní ( 300 ) vzorky od negativních. Množství detekované látky v předběžně pozitivním vzorku nelze odhadnout. Semikvantitativní stanovení Výsledky tohoto stanovení poskytují jen přibližné kumulativní koncentrace léčiva a jejich metabolitů (viz část "Analytická specifičnost"). Specifické údaje o využití Reprezentativní údaje o využití pro analyzátory Roche/Hitachi jsou uvedeny níže. Výsledky získané v různých laboratořích se mohou lišit. Preciznost Preciznost byla měřena podle interního postupu zpracováním sérií kalibrátoru a kontrol (opakovatelnost n = 21, mezilehlá preciznost n = 100). Byly získány následující výsledky: Semikvantitativní preciznost Opakovatelnost Prům. SD Hladina Hladina Hladina Mezilehlá preciznost Prům. SD Hladina Hladina Hladina Kvalitativní preciznost Cut-off (300) Počet testovaných Správné výsledky VK VK Hladina spolehlivosti 0.75x > 95 negativní odečet 1.25x > 95 pozitivní odečet Výsledky pro mezilehlou preciznost byly získány na master systému analyzátoru cobas c 501. Správnost 100 vzorků moči s negativním výsledkem získaných klinickou laboratoří v panelu testu drog bylo vyhodnoceno stanovením Methadone II. 100 těchto normálních vzorků moči bylo negativních vzhledem ke cut-off vzorků, získaných klinickou laboratoří, které byly předběžně pozitivní komerčně dostupným imunostanovením a následně potvrzeny metodou GC/MS, bylo vyhodnoceno stanovením Methadone II. 100 těchto vzorků bylo pozitivních vzhledem ke cut-off 300. Navíc 10 vzorků bylo naředěno na koncentraci metadonu hodnoty cutoff a 10 vzorků bylo naředěno na koncentraci metadonu hodnoty cut-off. Údaje ze studie správnosti popsané výše, blízké rozmezí hodnot cut-off, byly doplněny o údaje získané u ředěných pozitivních vzorků moči. Následující výsledky byly získány stanovením Methadone II na analyzátoru Roche/Hitachi 917 vzhledem k hodnotám GC/MS. Methadone II klinická korelace (cut-off = 300 ) Analyzátor Roche/Hitachi 917 Negativní vzorky GC/MS hodnoty () Blízké cut-off Další klinické vzorky byly tímto stanovením vyhodnoceny na analyzátoru Roche/Hitachi cobas c 701 a analyzátoru Roche/Hitachi cobas c vzorků moči bylo negativních stanovením Methadone II. 100 těchto normálních vzorků moči bylo negativních vzhledem k analyzátoru Roche/Hitachi cobas c vzorků moči bylo předběžně pozitivních stanovením Methadone II. 100 těchto vzorků bylo pozitivních jak na analyzátoru Roche/Hitachi cobas c 701, tak i na analyzátoru Roche/Hitachi cobas c 501. Methadone II korelace (cut-off = 300 ) Analyzátor cobas c Analyzátor cobas c Analytická specifičnost Specifičnost tohoto stanovení pro strukturálně podobné sloučeniny byla měřena vytvořením inhibiční křivky pro každou uvedenou sloučeninu a měřením přibližného množství každé sloučeniny, která je ekvivalentní reaktivitě stanovení při hodnotě stanovení cut-off 300. Při interpretaci výsledků vzorků pacientů obsahujících strukturálně příbuzné látky s křížovou reaktivitou větší než 0.5 je potřeba postupovat obezřetně. Následující výsledky byly získány analyzátorem Roche/Hitachi 917. Sloučenina Ekvivalent k 300 metadonu Přibližné křížové reaktivity Hydroxymetadon Cyamemazin Metotrimeprazin (Levomepromazin) Chlorpromazin Thiothixen Clomipramin Promazin Thioridazin Chlorprothixen l α metadol Prometazin l α acetylmetadol (LAAM) Trimipramin / 5

4 Následující sloučeniny byly dále testovány při koncentraci v poolované normální lidské moči a zjištěná hodnota křížové reaktivity byla menší než Amitriptylin Benzfetamin Carbamazepine Chlorfeniramin Cyklobenzaprin Cyproheptadin Desipramin Dextrometorfan Difenhydramin Disopyramid Doxepin Doxylamin EDDP (2 etyliden 1,5 dimetyl- 3,3-difenylpyrolidin) EMDP (2 etyl 5 metyl- 3,3 difenylpyrolin) Fluoxetin Imipramin Maprotilin Meperidin Mianserin Nordoxepin Nortriptylin Orfenadrin Perfenazin d-propoxyfen Protriptylin d,i verapamil Křížová reaktivita na Disopyramid byla testována stanovením Methadon II při koncentraci 1 mg/ml. Získaný výsledek byl < Vzorky od uživatelů Seroquelu (quetiapin fumarát) byly pozitivní na metadon. Interference léčiv Následující sloučeniny byly přidány k alikvotům poolované normální lidské moči v koncentraci Žádná z těchto sloučenin neposkytla výsledky, které by byly větší nebo rovny 0.2 křížové reaktivity a žádné výsledky nebyly větší než cut-off stanovení (300 ). Následující výsledky byly získány analyzátorem Roche/Hitachi 917. Acetaminofen Kys. acetylsalicylová Aminopyrin Amobarbital d amfetamin l amfetamin Ampicilin Kys. askorbová Aspartam Atropin Benzokain Benzoylekgonin (metabolit kokainu) Butabarbital Kofein Chlornan vápenatý Chlordiazepoxid Chlorochin Kokain Kodein Kotinin Diazepam Difenylhydantoin Dopamin Ekgonin Ekgoninmetylester Lidokain LSD MDA MDMA Melanin d metamfetamin l metamfetamin Metaqualon Metylfenidat Metyprylon Morfinsulfát Naloxon Naltrexon Naproxen Niacinamid Nikotin Nordiazepam Noretindron l norpseudoefedrin Oxazepam Penicilin G Pentobarbital Fencyklidin β fenethylamin Fenobarbital Fenotiazin d efedrin d,l efedrin I efedrin Epinefrin Erytromycin Estriol Fenoprofen Furosemid Kys. gentisová Glutetimid Guajakol glyceroléter Haloperidol Hydrochlorotiazid Ibuprofen Izoproterenol Ketamin Fentermin Fenylbutazon Fenylpropanolamin d fenylpropanolamin Prokain d pseudoefedrin l pseudoefedrin Chinidin Chinin Sekobarbital Sulindac Tetracyklin Δ 9 THC 9 karboxylová kys. Tetrahydrozolin Trifluoperazin Tyramin Křížová reaktivita na tramadol je při koncentraci Křížová reaktivita na ofloxacin je při koncentraci Odkazy 1 Karch SB, ed. Drug Abuse Handbook. Boca Raton, FL: CRC Press LLC Council Reports: Treatment of morphine-type dependence by withdrawal methods. JAMA 1972;219(12): Smialek JE, Monforte JR, Aronow R, et al. Methadone deaths in children: A continuing problem JAMA 1977;238(23): Garriott JC, Sterner WQ, Mason MF. Toxicologic findings in six fatalities involving methadone. Clin Toxicol 1973;6: Sullivan HR, Due SL, McMahon RE. The identification of three new metabolites of methadone in man and in the rat. J Am Chem Soc 1972;94(11): Baselt RC, Bickelt MH. Biliary excretion of methadone by the rat: identification of a para-hydroxylated major metabolite. Biochem Pharm 1973;22: Baselt RC, Casarett LJ. Urinary excretion of methadone in man. Clin Pharmacol Ther 1972 Jan-Feb;13(1): Bellward GD, Warren PM, Howald W, et al. Methadone maintenance: Effect of urinary ph on renal clearance in chronic high and low doses. Clin Pharmacol Ther 1977;22(1): Armbruster DA, Schwarzhoff RH, Pierce BL, et al. Method comparison of EMIT II and ONLINE with RIA for drug screening. J Forensic Sci 1993;38: Armbruster DA, Schwarzhoff RH, Hubster EC, et al. Enzyme immunoassay, kinetic microparticle immunoassay, radioimmunoassay, and fluorescence polarization immunoassay compared for drugs-ofabuse screening. Clin Chem 1993;39: Bates M, Brandle J, Casaretto E, et al. An Abuscreen immunoassay for opiates in urine on the COBAS MIRA automated analyzer. Amer Acad Forensic Sci. Abstract 1991;37(6): Toxicology and Drug Testing in the Clinical Laboratory; Approved Guideline. 2nd ed. (C52-A2). Clinical and Laboratory Standards Institute 2007;27: Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs. Fed Regist 2008 Nov 25;73: Data on file at Roche Diagnostics. Tečka se v tomto metodickém listu vždy používá jako desetinný oddělovač k označení hranice mezi celými a desetinnými místy desetinného čísla. Oddělení tisíců se nepoužívá. Symboly Roche Diagnostics používá následující symboly a znaky, včetně uvedených v normě ISO / 5

5 Obsah soupravy Objem po rekonstituci nebo smíchání Významné doplňky nebo změny jsou označeny pruhem podél textu. 2013, Roche Diagnostics Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D Mannheim Distribution v USA: Roche Diagnostics, Indianpolis, IN Zákaznická podpora v / 5