Laboratorní příručka

Transkript

1 Sanatrium Helis, spl.s r.. Pracviště: Labratř lékařské genetiky Štefánikva 12, resp Brn Telefn: texlva.k@sanatriumhels.cz Labratrní příručka A. ÚVOD A - 1 ÚVODNÍ SLOVO Sanatrium Helis je nestátní gyneklgické lůžkvé zařízení, které se nachází v centru Brna. Byl zalžen v rce Přínsem pr pacienty je individuální přístup, bližší kntakt s pacientem a zkrácení dby hspitalizace na minimum. Sučástí Sanatria Helis je perační sál a lůžkvá část. S výjimku prdů nabízí Sanatrium Helis kmplexní gyneklgicku péči. Vedle běžných gyneklgických ambulancí a prvádění gyneklgických perací pskytuje specializvanu péči v blastech: diagnstika a léčba pruch pldnsti genetická pradna cytgenetická labratř PGD (preimplantační genetická diagnstika) prenatální diagnstika ultrazvukvá diagnstika 3D pradna rizikvéh těhtenství nemcnění dělžníh čípku - nklgické prevence - knsiliární klpskpie miniinvazivní chirurgie - laparskpie a hysterskpie Péči zajišťují zkušení lékaři erudvaní v nejmdernějších pstupech. Zaměstnanci lůžkvéh zařízení, ambulancí a labratří splňují svým vzděláním pdmínky dbrné způsbilsti. V rce 2002 Sanatrium Helis získal licenční smluvu s australsku firmu Genea (dříve Sydney IVF), která je v celsvětvém měřítku leaderem v blasti IVF, genetiky a PGD (preimplantační genetické diagnstiky). Od rku 2004 je Sanatrium Helis držitelem certifikace DSN ISO 9001:2000. ISO pskytuje systematicku specifikaci pr zlepšvání prvzníh výknu, služí jak mdel pr zajištění jaksti a kntrly a řízení těcht prcesů. Název LABORATORNÍ PŘÍRUČKA Čísl verze 1 Typ dkumentu řízená dkumentace - dkument Datum vydání / platí d: Autr: Bc. Kateřina Texlvá Schválil: RNDr. Vendula Wernervá Kód dkumentu: A-LLG-002 Zdrj: STRANA 1 (CELKEM 29)

2 Sanatrium Helis, spl.s r.. Pracviště: Labratř lékařské genetiky Štefánikva 12, resp Brn Telefn: texlva.k@sanatriumhels.cz V prsinci 2009 byl Sanatriu Helis udělen certifikát ČSN ISO 27001:2006 týkající se systému managementu infrmační bezpečnsti (=ISMS) pr pskytvání zdravtnických služeb v blasti diagnstické, léčebné a šetřvatelské péče. Labratř lékařské genetiky je sučástí Sanatria Helis již d rku Více zaměření labratře viz kapitla B-3 a B-5. Název LABORATORNÍ PŘÍRUČKA Čísl verze 1 Typ dkumentu řízená dkumentace - dkument Datum vydání / platí d: Autr: Bc. Kateřina Texlvá Schválil: RNDr. Vendula Wernervá Kód dkumentu: A-LLG-002 Zdrj: STRANA 2 (CELKEM 29)

3 Sanatrium Helis, spl.s r.. Pracviště: Labratř lékařské genetiky Štefánikva 12, resp Brn Telefn: texlva.k@sanatriumhels.cz A 2 OBSAH A. ÚVOD... 1 A - 1 ÚVODNÍ SLOVO... 1 A 2 OBSAH... 3 A - 3 SEZNAM POUŽITÝCH ZKRATEK... 6 B. INFORMACE O LABORATOŘI... 7 B 1 IDENTIFIKACE LABORATOŘE A DŮLEŽITÉ ÚDAJE (KONTAKTY)... 7 B 2 ZÁKLADNÍ INFORMACE O LABORATOŘI... 7 B 3 ZAMĚŘENÍ LABORATOŘE, ÚROVEŇ A STAV AKREDITACE PRACOVIŠTĚ... 7 B 4 ORGANIZACE LABORATOŘE... 8 Schéma labratře... 9 B 5 SPEKTRUM NABÍZENÝCH SLUŽEB LABORATOŘE... 9 Seznam labratrních vyšetření... 9 Seznam primárních materiálů (vzrků) Indikace k vyšetření C. MANUÁL PRO ODBĚRY PRIMÁRNÍCH VZORKŮ C - 1 ZÁKLADNÍ INFORMACE C 2 ŽÁDANKA NA LABORATORNÍ VYŠETŘENÍ C 3 POUŽÍVANÝ ODBĚROVÝ SYSTÉM C 4 PŘÍPRAVA PACIENTA PŘED VYŠETŘENÍM, ODBĚR VZORKU Příprava pacienta Infrmvané suhlasy Odběrvá místnst C 5 IDENTIFIKACE PACIENTA NA ŽÁDANCE A OZNAČENÍ VZORKU C 6 MNOŽSTVÍ VZORKU Pr stanvení karytypu a ZCHA Název LABORATORNÍ PŘÍRUČKA Čísl verze 1 Typ dkumentu řízená dkumentace - dkument Datum vydání / platí d: Autr: Bc. Kateřina Texlvá Schválil: RNDr. Vendula Wernervá Kód dkumentu: A-LLG-002 Zdrj: STRANA 3 (CELKEM 29)

4 Sanatrium Helis, spl.s r.. Pracviště: Labratř lékařské genetiky Štefánikva 12, resp Brn Telefn: texlva.k@sanatriumhels.cz Pr PGD vyšetření C 7 NEZBYTNÉ OPERACE SE VZORKEM, STABILITA C 8 ZÁKLADNÍ INFORMACE K BEZPEČNOSTI PŘI PRÁCI SE VZORKY C 9 INFORMACE K DOPRAVĚ VZORKŮ A K ZAJIŠTĚNÍ SVOZU VZORKŮ Krevní vzrky Vzrky pr PGD vyšetření D. PREANALYTICKÉ PROCESY V LABORATOŘI D 1 PŘÍJEM ŽÁDANEK A BIOLOGICKÝCH VZORKŮ D 2 KRITÉRIA PRO PŘIJETÍ NEBO ODMÍTNUTÍ NESTANDARDNÍCH (KOLIZNÍCH) PRIMÁRNÍCH VZORKŮ Důvdy pr dmítnutí přijetí vzrku d labratře Pstupy při nesprávné identifikaci vzrku neb žádanky Pstup při dplňvání neúplně neb chybně vyplněné žádanky Pstup při zjištění nestandardníh, klizníh vzrku (nádby s materiálem) D 3 VYŠETŘOVÁNÍ SMLUVNÍMI LABORATOŘEMI E. VYDÁVÁNÍ VÝSLEDKŮ A KOMUNIKACE S LABORATOŘÍ E 1 HLÁŠENÍ VÝSLEDKŮ V KRITICKÝCH INTERVALECH E 2 INFORMACE O FORMÁCH VYDÁVÁNÍ VÝSLEDKŮ, TYPY NÁLEZŮ A LABORATORNÍCH ZPRÁV E 3 ZMĚNY VÝSLEDKŮ A NÁLEZŮ E 4 INTERVALY OD DODÁNÍ VZORKU K VYDÁNÍ VÝSLEDKU E 5 ZPŮSOB ŘEŠENÍ STÍŽNOSTÍ E 6 KONZULTAČNÍ ČINNOST LABORATOŘE, VYDÁVÁNÍ POTŘEB LABORATOŘÍ E 7 SKLADOVÁNÍ VYŠETŘENÝCH VZORKŮ F. SEZNAM LABORATORNÍCH VYŠETŘENÍ VČETNĚ POPISU Přehled prváděných vyšetření a příslušné SOP = standardní perační pstupy F-1 STANOVENÍ KARYOTYPU Princip metdy Název LABORATORNÍ PŘÍRUČKA Čísl verze 1 Typ dkumentu řízená dkumentace - dkument Datum vydání / platí d: Autr: Bc. Kateřina Texlvá Schválil: RNDr. Vendula Wernervá Kód dkumentu: A-LLG-002 Zdrj: STRANA 4 (CELKEM 29)

5 Sanatrium Helis, spl.s r.. Pracviště: Labratř lékařské genetiky Štefánikva 12, resp Brn Telefn: texlva.k@sanatriumhels.cz Pžadavky na primární vzrek Skladvání debrané krve Transprt vzrku d labratře F 2 STANOVENÍ HODNOTY ZÍSKANÝCH CHROMOZOMÁLNÍCH ABERACÍ (ZCHA) Princip metdy Pžadavky na primární vzrek F- 3 FISH VYŠETŘENÍ Princip metdy F 4 PGD FISH (NUMERICKÉ ABERACE) Princip metdy F - 5 PGD FISH (STRUKTURÁLNÍ ABERACE-TRANSLOKACE) Princip metdy F 6 PGD PCR - VYŠETŘENÍ MONOGENNÍCH CHOROB Princip metdy F 7 PGD CGH COMPARATIVNÍ GENOMOVÁ HYBRIDIZACE Princip metdy G. POKYNY PRO SPOLUPRACUJÍCÍ LÉKAŘE H. POKYNY PRO PACIENTY I. DALŠÍ INFORMACE I 1 LIKVIDACE BIOLOGICKÉHO MATERIÁLU Název LABORATORNÍ PŘÍRUČKA Čísl verze 1 Typ dkumentu řízená dkumentace - dkument Datum vydání / platí d: Autr: Bc. Kateřina Texlvá Schválil: RNDr. Vendula Wernervá Kód dkumentu: A-LLG-002 Zdrj: STRANA 5 (CELKEM 29)

6 Sanatrium Helis, spl.s r.. Pracviště: Labratř lékařské genetiky Štefánikva 12, resp Brn Telefn: texlva.k@sanatriumhels.cz A - 3 SEZNAM POUŽITÝCH ZKRATEK SH LLG PGD IVF AR CAR FISH PCR acgh WGA ZCHA BM Sanatrium Helis labratř lékařské genetiky preimplantační genetická diagnstika in vitr fertilizace asistvaná reprdukce centrum asistvané reprdukce Flurescenční In Situ Hybridizace plymerázvá řetězvá reakce mikrčipvá kmparativní genmvá hybridizace celgenmvá amplifikace získáné chrmzmální aberace bilgický materiál Název LABORATORNÍ PŘÍRUČKA Čísl verze 1 Typ dkumentu řízená dkumentace - dkument Datum vydání / platí d: Autr: Bc. Kateřina Texlvá Schválil: RNDr. Vendula Wernervá Kód dkumentu: A-LLG-002 Zdrj: STRANA 6 (CELKEM 29)

7 Sanatrium Helis, spl.s r.. Pracviště: Labratř lékařské genetiky Štefánikva 12, resp Brn Telefn: texlva.k@sanatriumhels.cz B. INFORMACE O LABORATOŘI B 1 IDENTIFIKACE LABORATOŘE A DŮLEŽITÉ ÚDAJE (KONTAKTY) PRACOVIŠTĚ: LABORATOŘ LÉKAŘSKÉ GENETIKY Štefánikva 8, resp. 12 Adresa: CZ - Brn Zřizvatel: Sanatrium Helis s.r.. IČ: DIČ: CZ Jednatel splečnsti Klinický genetik Veducí labratře lékařské genetiky / veducí cytgenetické labratře Veducí PGD - cytgenetická labratře/ manažer kvality Veducí PGD - mlekulárně genetické labratře MUDr. Pavel Texl MUDr. Věra Hřínvá RNDr. Wernervá Vendula Bc. Texlvá Kateřina Mgr. Raszykvá Lenka Tel.: texl@sanatriumhelis.cz Tel.: hrinvav@sanatriumhelis.cz Tel.: karytyp@seznam.cz Tel.: texlva.k@sanatriumhelis.cz Tel.: lraszykva@sanatriumhelis.cz B 2 ZÁKLADNÍ INFORMACE O LABORATOŘI Labratř lékařské genetiky je členěna dle svéh zaměření na tři funkční ddíly, a t: labratř cytgenetická PGD mlekulárně genetická labratř PGD cytgenetická labratř Více viz kntakty (B-1) a rganizace labratře (B-4). Spektrum služeb je ppsán v kapitle B-5. B 3 ZAMĚŘENÍ LABORATOŘE, ÚROVEŇ A STAV AKREDITACE PRACOVIŠTĚ Název LABORATORNÍ PŘÍRUČKA Čísl verze 1 Typ dkumentu řízená dkumentace - dkument Datum vydání / platí d: Autr: Bc. Kateřina Texlvá Schválil: RNDr. Vendula Wernervá Kód dkumentu: A-LLG-002 Zdrj: STRANA 7 (CELKEM 29)

8 Sanatrium Helis, spl.s r.. Pracviště: Labratř lékařské genetiky Štefánikva 12, resp Brn Telefn: texlva.k@sanatriumhels.cz Cytgenetická labratř zahájila svůj prvz v lednu Zabývá se základní cytgeneticku analýzu chrmzmů - stanvením karytypu. Pužívá tradiční metdy zpracvání vzrků periferní krve - kultivace buněk in vitr s jejich následnu chrmzmvu analýzu. PGD labratř funguje již d rku 2006 jak sučást centra AR (asistvané reprdukce), nabízí preimplantační geneticku diagnstiku embryí před jejich zavedením d dělhy. Vyšetřvaným materiálem jsu buňky trfblastu, případně blastmery. PGD cytgenetická labratř využívá především FISH metdy k dhalení numerických aneuplidií chrmzmů, případně strukturálních chrmzmálních aberací u embryí. PGD mlekulárně genetická labratř se zabývá především vyšetřváním mngenních chrb pmcí metdy PCR a numerických chrmzmálních aberací pmcí acgh. Pracviště labratří jsu technicky a persnálně vybavena v suladu s legislativu platnu pr prvádění všech nabízených labratrních vyšetření. V rce 2004 Sanatrium Helis získal certifikaci ISO 9001:2000. ISO pskytuje systematicku specifikaci pr zlepšvání prvzníh výknu, služí jak mdel pr zajištění jaksti a kntrly a řízení těcht prcesů byla labratř lékařské genetiky začleněna d certifikace ISO 9001:2000, jehž držitelem je Sanatrium Helis již d rku V sučastné dbě se labratř připravuje k auditu I NASKL (ISO ) a je evidvána v Registru labratří Nárdníh autrizačníh střediska pr klinické labratře při ČLS JEP a je zapjena d prgramu zvyšvání kvality ve zdravtnictví garantvaném MZ ČR. V sučasnsti pdala labratř žádst akreditaci dle ČSN ISO B 4 ORGANIZACE LABORATOŘE Název LABORATORNÍ PŘÍRUČKA Čísl verze 1 Typ dkumentu řízená dkumentace - dkument Datum vydání / platí d: Autr: Bc. Kateřina Texlvá Schválil: RNDr. Vendula Wernervá Kód dkumentu: A-LLG-002 Zdrj: STRANA 8 (CELKEM 29)

9 Sanatrium Helis, spl.s r.. Pracviště: Labratř lékařské genetiky Štefánikva 12, resp Brn Telefn: texlva.k@sanatriumhels.cz Pracvní dba labratře Příjem vzrků Pndělí - pátek* 7:00 15:30 7:00-15:30 * v případě PGD vyšetření zajištěn i víkendvý prvz 7:00 12:00 Labratř lékařské genetiky je sučástí splečnsti Sanatrium Helis s.r.. Činnst labratře řídí veducí labratře, který je v rámci mateřské rganizace pdřízen klinickému genetikvi. Vnitřně se LLG člení na tři labratře viz schéma. Cytgenetická labratř se nachází v budvě na adrese Štefánikva 8, bě labratře PGD jsu umístěny v bezprstřední blízksti centra asistvané reprdukce v Sanatriu Helis na Štefánikva 12, nebť s tímt centrem velice úzce funkčně suvisí. Schéma labratře není sučástí labratře ředitel Sanatria Helis není sučástí labratře klinický genetik VŠ nelékař veducí labratře klinické genetiky VŠ nelékaři cytgenetická labratř PGD cytgenetická labratř PGD mlekulárně genetická labratř zdravtní labranti B 5 SPEKTRUM NABÍZENÝCH SLUŽEB LABORATOŘE Seznam labratrních vyšetření Název LABORATORNÍ PŘÍRUČKA Čísl verze 1 Typ dkumentu řízená dkumentace - dkument Datum vydání / platí d: Autr: Bc. Kateřina Texlvá Schválil: RNDr. Vendula Wernervá Kód dkumentu: A-LLG-002 Zdrj: STRANA 9 (CELKEM 29)

10 Sanatrium Helis, spl.s r.. Pracviště: Labratř lékařské genetiky Štefánikva 12, resp Brn Telefn: texlva.k@sanatriumhels.cz stanvení karytypu z periferní krve u dětí i dspělých (zejména u párů s pruchami reprdukce a dárců gamet) klasicku cytgeneticku analýzu stanvení hdnty získaných chrmzmvých aberací z periferní krve kultivace periferní krve pr další vyšetření FISH vyšetření PGD FISH (numerické chrmzmální aberace) PGD FISH (strukturální chrmzmální aberace) PGD PCR vyšetření mngenních chrb acgh kmparativní genmvá hybridizace Seznam primárních materiálů (vzrků) periferní krev kapilární krev blastmery buňky trfblastu Indikace k vyšetření Stanvení karytypu z periferní krve: páry s pruchami reprdukce (sterilita, infertilita) páry s výskytem ptvrzené neb suspektní chrmzmální aberace u nich samtných neb u rdinnéh příslušníka abnrmální fentyp pacienta dárci gamet (cytů, spermií) Stanvení hdnty ZCHA z periferní krve: pacienti vystavení škdlivinám v živtním prstředí (prfesní rizik) plánující těhtenství pacienti p léčbě cytstatiky neb p transplantaci plánující těhtenství pacienti, u kterých byla při stanvení karytypu z periferní krve nalezena zvýšená hdnta ZCHA a plánují těhtenství neb darvání gamet Název LABORATORNÍ PŘÍRUČKA Čísl verze 1 Typ dkumentu řízená dkumentace - dkument Datum vydání / platí d: Autr: Bc. Kateřina Texlvá Schválil: RNDr. Vendula Wernervá Kód dkumentu: A-LLG-002 Zdrj: STRANA 10 (CELKEM 29)

11 Sanatrium Helis, spl.s r.. Pracviště: Labratř lékařské genetiky Štefánikva 12, resp Brn Telefn: texlva.k@sanatriumhels.cz PGD vyšetření mngenních chrb ptvrzený výskyt mngenní chrby u jednh z páru ptvrzený výskyt mngenní chrby u příméh rdinnéh příslušníka PGD metdu FISH, případně acgh pakvaně neúspěšné IVF spntánní abrty v histrii pacienta věk pacientky, pacienta nález chrmzmální aberace při předchzím cytgenetickém vyšetření páru chrby vázané na phlaví zjištěné v rdině C. MANUÁL PRO ODBĚRY PRIMÁRNÍCH VZORKŮ C - 1 ZÁKLADNÍ INFORMACE V labratři lze vyšetřit tyt primární vzrky: periferní krev kapilární krev blastmery buňky trfblastu Základním pžadavkem je bezpečná a jednznačná identifikace pacienta na nádbě s bilgickým materiálem a specifikace pžadvanéh vyšetření na žádance. Vzrky se debírají vždy d předem značené nádby. viz ZÁSADY SPRÁVNÉHO ODBĚRU PRIMÁRNÍHO VZORKU, dstavec C - 4. C 2 ŽÁDANKA NA LABORATORNÍ VYŠETŘENÍ Pukaz na vyšetření / šetření musí být řádně vyplněn a musí bsahvat následující infrmace: jmén, příjmení, rdné čísl, pjišťvna pacienta (pkud ze jména pacienta jednznačně nevyplývá phlaví pacienta, musí být uveden) jmén, dbrnst, IČZ a pdpis indikujícíh lékaře razítk s kntaktem na indikujícíh lékaře druh, případně tkáňvý půvd zaslanéh vzrku, datum dběru vzrku diagnózu a klinicku indikaci k vyšetření Název LABORATORNÍ PŘÍRUČKA Čísl verze 1 Typ dkumentu řízená dkumentace - dkument Datum vydání / platí d: Autr: Bc. Kateřina Texlvá Schválil: RNDr. Vendula Wernervá Kód dkumentu: A-LLG-002 Zdrj: STRANA 11 (CELKEM 29)

12 Sanatrium Helis, spl.s r.. Pracviště: Labratř lékařské genetiky Štefánikva 12, resp Brn Telefn: texlva.k@sanatriumhels.cz druh pžadvanéh vyšetření pžadavek urgentníh vyšetření musí být na žádance značen STATIM Vzrky patřené takt kmpletně vyplněnými žádankami mhu být bez prdlení zařazeny ke zpracvání v labratři. Vzrky bez žádanek neb s neúplně vyplněnými žádankami budu zhdnceny na příjmu materiálu a dle pvahy nedstatků na žádance s nimi bude dále nakládán. Viz bdy D - 1, D - 2 a D - 3., dále také viz směrnice S-LLG-004 Příjem a zpracvání standardníh bilgickéh materiálu a S-LLG-005 Příjem a zpracvání nestandardníh bilgickéh materiálu. Všechny žádanky jsu p prvedení vyšetření ulženy v jedntlivých labratřích p dbu pěti let. Ústní pžadavky na vyšetření nelze akceptvat. Všechny pžadavky na ddatečná / pakvaná vyšetření musí být dlžena nvu žádanku se všemi údaji dle bdu C - 2. Přípustný je ddatečný ústní pžadavek lékaře na přednstní zhdncení již přijatéh vzrku, který nebyl na žádance značen jak STATIM. Periferní krev je mžn skladvat nejdéle šest dnů d dběru, p tét dbě krev hemlyzuje a není z ní již mžn stanvit karytyp. Ddatečné vyšetření lze tedy pžadvat d pěti dnů d dběru. V případě PGD vyšetření jsu vzrky zpracvány v den dběru, případně zamraženy a uchvány pr pzdější analýzu při -20 C. Zamražené vzrky jsu zpracvány nejpzději d 1 měsíce. Ddatečná vyšetření lze knzultvat p dmluvě s veducími jedntlivých labratří. C 3 POUŽÍVANÝ ODBĚROVÝ SYSTÉM K dběru krve je třeba pužít uzavřený dběrvý systém viz níže. V Sanatriu Helis je t. č. pužíván dběrvý systém firmy Sarstedt, stříkačka Mnvette 109 Název dběru Katalgvé čísl Velikst stříkačky karytyp Li - Heparin ,9 ml C 4 PŘÍPRAVA PACIENTA PŘED VYŠETŘENÍM, ODBĚR VZORKU Název LABORATORNÍ PŘÍRUČKA Čísl verze 1 Typ dkumentu řízená dkumentace - dkument Datum vydání / platí d: Autr: Bc. Kateřina Texlvá Schválil: RNDr. Vendula Wernervá Kód dkumentu: A-LLG-002 Zdrj: STRANA 12 (CELKEM 29)

13 Sanatrium Helis, spl.s r.. Pracviště: Labratř lékařské genetiky Štefánikva 12, resp Brn Telefn: texlva.k@sanatriumhels.cz Příprava pacienta - dieta není pžadván, žádné mezení - léky, vitamíny není žádné mezení - v případě akutníh nemcnění knzultace s lékařem Infrmvané suhlasy K PGD vyšetření je vždy pžadván písemný suhlas s vyšetřením embryí d bu partnerů, který je devzdán a pdepsán při příjmu pacientky k dběru cytů. Obsahuje identifikační údaje bu partnerů, důvd testvání, infrmace úskalích vyšetření, infrmace pplatcích atd. Pr každý typ vyšetření existuje knkrétní typ suhlasu, jsu k dispzici na QM Prtále Sanatria Helis. Infrmvaný suhlas s preimplantační geneticku diagnstiku metdu FISH Infrmvaný suhlas s preimplantační geneticku diagnstiku metdu acgh Infrmvaný suhlas s preimplantační geneticku diagnstiku metdu PCR Odběrvá místnst Odběry periferní krve a kapilární dběry prvádí kvalifikvaný zdravtnický persnál Sanatria Helis v místnsti pr tyt účely určené. Pracvník debírající primární vzrek svým pdpisem na žádance ptvrzuje, že primární vzrek byl debrán v suladu s pžadavky uvedenými v Labratrní příručce. Odběrvá místnst pr dběry krve se nachází v 2.NP Sanatria Helis a je vybavena plhvacími dběrvými křesly s nastavitelnu plhu pdruček, pěradla zad, hlavy a nhu. Nezbytným vybavením je kntejner na dkládání pužitých jehel a stříkaček z dstatečně pevnéh materiálu patřený víčkem a příslušně značený. Odběr periferní krve: Pr dběry periferní krve se pužívají supravy firmy SARSTEDT (viz bd C-4) s náplní heparinu bjemu 2,5-5 ml, ihned p dběru jemně prmíchat! Vzrky krve určené k vyšetření v labratři Sanatria Helis, musí být bezprstředně p dběru ulženy d chladničky. Pracvník labratře lékařské genetiky si je na výzvu pracvníka prvádějícíh dběr vyzvedne. Odběry kapilární krve: Pr dběry kapilární krve se pužívají jednrázvé sterilní dběrvé pmůcky. Název LABORATORNÍ PŘÍRUČKA Čísl verze 1 Typ dkumentu řízená dkumentace - dkument Datum vydání / platí d: Autr: Bc. Kateřina Texlvá Schválil: RNDr. Vendula Wernervá Kód dkumentu: A-LLG-002 Zdrj: STRANA 13 (CELKEM 29)

14 Sanatrium Helis, spl.s r.. Pracviště: Labratř lékařské genetiky Štefánikva 12, resp Brn Telefn: texlva.k@sanatriumhels.cz Lehce se napíchne lůžk prstu a vzniklá kapka krve se nechá vsáknut d příslušnéh kénka FTA kartičky (FTA Micr Card, Cat N. WB120210). Ta se nechá na vzduchu zaschnut. Pracvník labratře lékařské genetiky si je na výzvu pracvníka prvádějícíh dběr vyzvedne. Odběry periferní a kapilární krve mim zařízení: Transprt vzrků, debraných mim Sanatrium Helis zajišťuje p dmluvě svz Sanatria Helis vlastními vzy a pršklenými pracvníky za ddržení zásad manipulace s BM. Objednání je mžné na tel. čísle každý pracvní den v dbě d hd. K dběru periferní krve je nutné pužít jednrázvu sterilní dběrvu supravu s náplní heparinu bjemu 2,5-5 ml, ihned p dběru nutn prmíchat, nedezinfikvat míst vpichu jódem. Odběry periferní krve a FTA se musí řídit ZÁSADAMI SPRÁVNÉHO ODBĚRU PRIMÁRNÍHO VZORKU PERIFERNÍ KREV (bd C 4). Ihned p dběru musí být vzrky ulženy d chladničky, kde jsu uschvány až d jejich vyzvednutí dpravcem Sanatria Helis. Ke svzu periferní krve se pužívá transprtní nádba termska, ve které je během transprtu mnitrvána a při příjmu vzrků kntrlvána a zaznamenána teplta. Za ddržvání správné teplty při transprtu BM je zdpvědný pracvník, který prvádí svz. Externí žadatel musí prvést dběr tak, aby byly splněny pdmínky kapitl C - 1 až C 9. Transprtní bx musí být vždy p transprtu desinfikván dle aktuálníh Desinfekčníh řádu Sanatria Helis zdpvídá labratř. Žádanky žadatelů jsu skladvány a transprtvány dděleně d BM tak, aby byl zamezen přístup neprávněných sb k jejich bsahu a nedšl k jejich kntaminaci BM. ZÁSADY SPRÁVNÉHO ODBĚRU PRIMÁRNÍHO VZORKU PERIFERNÍ KREV 1. Seznámení pacienta s pstupem dběru. 2. Pacient se usadí d dběrvéh křesla, před dběrem by měl být 15 min v klidu. 3. Výběr vhdné injekční stříkačky a veliksti jehly pdle pžadavků na vyšetření a pdle stáří pacienta. Vizuální kntrla stavu jehly, injekční stříkačky a dběrvých nádbek. 4. Prvede se kntrlní pzitivní identifikace a značení dběrvých nádb štítkem s identifikačními údaji pacienta (tázka na jeh jmén a datum narzení musí být stejné jak na žádance). 5. Označení dběrvých nádb štítkem s identifikačními údaji pacienta viz C-6. Název LABORATORNÍ PŘÍRUČKA Čísl verze 1 Typ dkumentu řízená dkumentace - dkument Datum vydání / platí d: Autr: Bc. Kateřina Texlvá Schválil: RNDr. Vendula Wernervá Kód dkumentu: A-LLG-002 Zdrj: STRANA 14 (CELKEM 29)

15 Sanatrium Helis, spl.s r.. Pracviště: Labratř lékařské genetiky Štefánikva 12, resp Brn Telefn: texlva.k@sanatriumhels.cz 6. Zajištění vhdné plhy paže k dběru. Odběr krve se prvádí v plze vsedě neb vleže, paže se vlně svěsí dlů neb plží na pěradl dběrvéh křesla. 7. Psuzení kvality žilníh systému v lketní jamce: mál zřetelné žíly je mžn zvýraznit velmi šetrnu masáží paže d zápěstí k lkti. Nešetrná masáž i palpace ruky může způsbit změny některých kmpnent. 8. Pacient může být vyzván k sevření pěsti. Opakvané pumpvání paží je nevhdné. Jsu-li žíly dbře viditelné neb hmatné, je lépe škrtidl nepužít. 9. Desinfekce místa vpichu desinfekčním prstředkem na bázi lihu nedesinfikvat míst vpichu jódem!!! Desinfekci aplikujeme pmcí čtverečku z buničité vaty neb pstřikem z rzprašvače přím na paži. Desinfekční činidl se musí nechat zaschnut. P zaschnutí je další palpace místa vpichu nepřípustná. 10. Pracvník prvádějící dběr nasadí jehlu na dběrvu stříkačku, palcem ve vzdálensti 2 až 5 cm pd pístem dběru stabilizuje plhu žíly. Prvede venepunkci. Tahem za píst djde k nabrání krve. 11. Při dběru více zkumavek se naplněná zkumavka vyjme a nasadí se na zavedenu jehlu další. První se plní zkumavka srážlivu krví. Zkumavky s prtisrážlivými činidly je nutné debrat krev p značku na zkumavce, aby nedšl ke zkreslení neb ke sražení vzrku. Ihned p dběru se musí jemně prmíchat s nabranu krví, ne třepat. 12. Jakmile začne krev vtékat d dběrvé zkumavky, uvlní se škrtidl. P dběru je míst vpichu překryt čtverečkem buničité vaty. Na čtvereček se jemně zatlačí a jehla je pmalým tahem dstraněna ze žíly. 13. Ošetření místa vpichu je prveden náplastí, kteru je dpručen pnechat na místě vpichu nejméně 15 minut, a paži p dběru nezatěžvat a fyzicky nenamáhat. 14. Pacientvi je dpručen tisknut na míst vpichu tampnek nejméně 2 minuty. 15. P dběru krve je pacientvi dpručen 15 min. klid v čekárně. 16. Vždy je nutn zaznamenat na žádanku mim jiné čas dběru (hdina, minuta), parafu a razítkem (jmenvku) debírajícíh. Bez těcht údajů nebude vyšetření prveden. Pžadavky na vyplnění žádanky jsu shrnuty v bdě C Pužitý dběrvý materiál je ulžen d kntejneru na pužité injekční stříkačky a jehly. ZÁSADY SPRÁVNÉHO ODBĚRU PRIMÁRNÍHO VZORKU KAPILÁRNÍ KREV 1. Pacient se usadí d dběrvéh křesla, před dběrem by měl být 15 min v klidu. 2. Výběr vhdné veliksti injekční jehly. Vizuální kntrla stavu jehly. Název LABORATORNÍ PŘÍRUČKA Čísl verze 1 Typ dkumentu řízená dkumentace - dkument Datum vydání / platí d: Autr: Bc. Kateřina Texlvá Schválil: RNDr. Vendula Wernervá Kód dkumentu: A-LLG-002 Zdrj: STRANA 15 (CELKEM 29)

16 Sanatrium Helis, spl.s r.. Pracviště: Labratř lékařské genetiky Štefánikva 12, resp Brn Telefn: texlva.k@sanatriumhels.cz 3. Prvede se kntrlní pzitivní identifikace a značeni FTA kartičky identifikačními údaji pacienta. 4. Označení FTA kartičky identifikačními údaji pacienta viz C Zajištění vhdné plhy paže k dběru. Odběr krve se prvádí v plze vsedě neb vleže, paže se vlně svěsí dlů neb plží na pěradl dběrvéh křesla. 6. Desinfekce místa vpichu plštářku prstu) desinfekčním prstředkem na bázi lihu nedesinfikvat míst vpichu jódem!!! Desinfekci aplikujeme pmcí čtverečku z buničité vaty neb pstřikem z rzprašvače přím na paži. Desinfekční činidl se musí nechat zaschnut. P zaschnutí je další palpace místa vpichu nepřípustná. 7. Pracvník lehce bdne d lůžka prstu a pnechá krev vytvřit kapičku. 8. Prst přilžíme k FTA kartičce a kapičku krve necháme vsáknut d místa na FTA kartičce značenéh klečkem. Krevní skvrnku necháme zaschnut vlně na vzduchu. NEURYCHLUJEME SCHNUTÍ FOUKÁNÍM! 9. Ošetření místa vpichu je prveden náplastí, kteru je dpručen pnechat na místě vpichu nejméně 15 minut. 10. Vždy je nutn zaznamenat na žádanku m. j. parafu a razítkem (jmenvku) debírajícíh. Bez těcht údajů nebude vyšetření prveden. Pžadavky na vyplnění žádanky jsu shrnuty v bdě C Pužitý dběrvý materiál je ulžen d kntejneru na pužité injekční stříkačky a jehly. Odběry blastmer a buněk trfblastu v Sanatriu Helis: Jedná se dběr materiálu z embryí vykultivvaných v rámci IVF léčby. Bipsie je mžn prvádět 3., 5., případně 6. den kultivace. Odběry prvádí vysce specializvaný embrylg v embrylgické labratři (2.NP Sanatria Helis, Štefánikva 12). - Bipsie 3. den kultivace: Pmcí mikrskpu s mikrmanipulátrem a laseru jsu debrány 1-2 blastmery. - Bipsie 5., 6. den: Pmcí mikrskpu s mikrmanipulátrem a laseru je debrán asi 5 buněk trfblastu z embrya ve stádiu hatchující blastcysty. V bu případech jsu debrané buňky transprtvány v kultivačním médiu nejpzději d 30 minut d susedící PGD labratře - viz příjem vzrků, bd D - 1 Odběry blastmer a buněk trfblastu mim zařízení: Odběr blastmer a buněk trfblastu mim zařízení není v tut chvíli mžný. Název LABORATORNÍ PŘÍRUČKA Čísl verze 1 Typ dkumentu řízená dkumentace - dkument Datum vydání / platí d: Autr: Bc. Kateřina Texlvá Schválil: RNDr. Vendula Wernervá Kód dkumentu: A-LLG-002 Zdrj: STRANA 16 (CELKEM 29)

17 Sanatrium Helis, spl.s r.. Pracviště: Labratř lékařské genetiky Štefánikva 12, resp Brn Telefn: texlva.k@sanatriumhels.cz C 5 IDENTIFIKACE PACIENTA NA ŽÁDANCE A OZNAČENÍ VZORKU Žádanka musí bsahvat údaje ppsané v bdě C - 2 tét příručky. Označení vzrku na nádbě s bilgickým materiálem štítek bsahující minimální pvinné údaje: jmén, příjmení a rdné čísl pacienta. Odběr vzrku se prvádí výhradně d předem značených nádb! C 6 MNOŽSTVÍ VZORKU Pr stanvení karytypu a ZCHA Odebírá se žilní krev pacienta z paže, 1-4 ml d jednrázvé sterilní dběrvé nádbky s náplní heparinu bjemu 2,5-5l, ihned p dběru prmíchat táčením nádbky 180 C. Pr každé vyšetření je třeba minimální mnžství krve 1 ml. Pr PGD vyšetření Odběry blastmer a buněk trfblastu 1-2 blastmery neb cca 5 buněk trfblastu z embrya ve stadiu hatchující blastcysty Více dběrech viz C - 4. C 7 NEZBYTNÉ OPERACE SE VZORKEM, STABILITA Periferní krev může být skladvána nejdéle pět dnů d dběru u zákazníka v lednici, za teplty 4-8 C (krev nesmí zmrznut!), p tét dbě krev hemlyzuje a není z ní již mžn stanvit karytyp. V případě PGD vyšetření musí být vzrky dručeny d labratře d 60 min. C 8 ZÁKLADNÍ INFORMACE K BEZPEČNOSTI PŘI PRÁCI SE VZORKY S každým vzrkem BM je zacházen jak s ptenciálně infekčním. Více infrmací viz kapitla I (Likvidace bilgickéh materiálu). C 9 INFORMACE K DOPRAVĚ VZORKŮ A K ZAJIŠTĚNÍ SVOZU VZORKŮ Krevní vzrky Název LABORATORNÍ PŘÍRUČKA Čísl verze 1 Typ dkumentu řízená dkumentace - dkument Datum vydání / platí d: Autr: Bc. Kateřina Texlvá Schválil: RNDr. Vendula Wernervá Kód dkumentu: A-LLG-002 Zdrj: STRANA 17 (CELKEM 29)

18 Sanatrium Helis, spl.s r.. Pracviště: Labratř lékařské genetiky Štefánikva 12, resp Brn Telefn: texlva.k@sanatriumhels.cz a) debrané v Sanatriu Helis pracvník, který prvedl dběr, si v labratři vyžádá vyzvednutí vzrku (telefnicky či sbně), zajistí ulžení vzrku d chladničky. Pracvník labratře p převzetí vzrků v dběrvé místnsti zkntrluje jmén, příjmení, rdné čísl na žádance a vzrku a jejich shdu. K transprtu periferní krve se pužívá plastvá transprtní nádba, ve které se p dbu přepravy udržuje teplta 4-25 C a která je mnitrvána vlženým teplměrem. Žádanky k vyšetření jsu přepravvány sučasně v samstatném balu. Nádba je p pužití vždy desinfikvána. b) debrané mim Sanatrium Helis splupracující klinické pracviště si v labratři vyžádá svz vzrku (telefnicky na č neb em slamva@sanatriumhelis.cz, vrchní sestra Jarmila Slámvá), d dby vyzvednutí vzrku dpravcem Sanatria Helis vzrek ulží d chladničky při 4-8 C Ke svzu periferní krve se pužívá transprtní nádba termska, ve které se p dbu přepravy udržuje teplta 4-25 C, která je mnitrvána vlženým teplměrem. Teplta v transprtní nádbě se kntrluje při vlžení a vyjmutí vzrků a zaznamenává se na přilženu žádanku. Nádba je p pužití vždy desinfikvána. Žádanky žadatelů jsu skladvány dděleně d BM, tak aby byl zamezen přístup neprávněných sb k jejich bsahu a jejich kntaminace BM. Kntakt pr dmluvu svzu vzrků při dběru mim zařízení: tel. č.: slamva@sanatriumhelis.cz Labratř nezdpvídá za ddržení pdmínek transprtu při dpravě vzrků externím dpravcem. Pracvník prvádějící svz d externích žadatelů musí vždy vyčkat na fyzické převzetí BM d pracvníka LLG. Pracvník labratře před dpravcem zkntrluje správnst údajů na žádankách a stav BM. Je nezbytné zajistit svz bilgickéh materiálu resp. předání na příjmvý úsek labratře d externích lékařů tak, aby byly ddrženy všechny pdmínky uvedené v LP. Vzrky pr PGD vyšetření Vzrky pr PGD vyšetření jsu ihned p dběru předány d susedící PGD labratře v kultivačním médiu. Název LABORATORNÍ PŘÍRUČKA Čísl verze 1 Typ dkumentu řízená dkumentace - dkument Datum vydání / platí d: Autr: Bc. Kateřina Texlvá Schválil: RNDr. Vendula Wernervá Kód dkumentu: A-LLG-002 Zdrj: STRANA 18 (CELKEM 29)

19 Sanatrium Helis, spl.s r.. Pracviště: Labratř lékařské genetiky Štefánikva 12, resp Brn Telefn: texlva.k@sanatriumhels.cz D. PREANALYTICKÉ PROCESY V LABORATOŘI D 1 PŘÍJEM ŽÁDANEK A BIOLOGICKÝCH VZORKŮ Viz bdy C 1 až C ) Dpravce (labrantka, pracvník Sanatria Helis) předá bilgický materiál se žádankami pracvníkvi labratře, který prvádí příjem bilgickéh materiálu a vyčká jeh převzetí. 2) Pracvník pvěřený příjmem bilgickéh materiálu prvádí při převzetí kntrlu úplnsti vyplnění údajů na žádance a vzrku. 3) Pkud žádanka i vzrek splňují všechny frmální pžadavky dle bdů C - 2 (žádanka) a C - 6 (vzrek), zaeviduje přijatý vzrek d Knihy příjmu a značí vzrky i žádanku přadvými čísly. 4) V Knize příjmu se zaznamenávají tyt údaje: datum přijetí v labratři, datum dběru vzrku (pkud se neshduje s datem přijetí), přadvé čísl vzrku, jmén a příjmení pacienta, rdné čísl, pjišťvna a další infrmace dle typu vzrku. Všechny dchylky d pžadavků na vzrky a žádanky, viz bd. C - 2 (žádanka) a C - 6 (vzrek), jsu pvažvány za klizní vzrky / žádanky a za jejich psuzení z hlediska mžnsti dalšíh zpracvání je dpvědný pracvník labratře prvádějící příjem materiálu viz D - 2. viz Směrnice Příjem a zpracvání standardníh a nestandardníh bilgickéh materiálu (S-LLG-005). D 2 KRITÉRIA PRO PŘIJETÍ NEBO ODMÍTNUTÍ NESTANDARDNÍCH (KOLIZNÍCH) PRIMÁRNÍCH VZORKŮ Za nestandardní, klizní vzrky jsu pvažvány všechny vzrky, které se svými vlastnstmi či náležitstmi dchylují d pžadavků uvedených v těcht bdech: C - 2 žádanka, C - 6 značení vzrku, C - 3 dběrvé nádby (dběrvý systém) a C - 6 mnžství vzrku Důvdy pr dmítnutí přijetí vzrku d labratře vzrky v neznačených zkumavkách, s nečitelným zápisem na zkumavce vzrky bez žádanky Název LABORATORNÍ PŘÍRUČKA Čísl verze 1 Typ dkumentu řízená dkumentace - dkument Datum vydání / platí d: Autr: Bc. Kateřina Texlvá Schválil: RNDr. Vendula Wernervá Kód dkumentu: A-LLG-002 Zdrj: STRANA 19 (CELKEM 29)

20 Sanatrium Helis, spl.s r.. Pracviště: Labratř lékařské genetiky Štefánikva 12, resp Brn Telefn: texlva.k@sanatriumhels.cz vzrky, u nichž se ani na výzvu ze strany labratře nepdařil zajistit stprcentní identifikaci pacienta, tedy shdu údajů na nádbě s materiálem a žádanku vzrky se sraženu krví, viditelně kntaminvané vzrky periferní krve debrané d zkumavky s jiným prtisrážlivým rztkem, než s heparinem zkumavka se vzrkem ptřísněná bilgickým materiálem neb mechanicky pškzená krevní vzrky skladvané neb transprtvané mim pžadvané rzmezí teplt, vzrky skladvané déle než 5 dnů d dběru pkud indikujícím lékařem není smluvně zajištěný klinický genetik Odmítnuté vzrky jsu evidvány v Knize nestandardních událstí Pstupy při nesprávné identifikaci vzrku neb žádanky Neshdu zjištěnu při příjmu žádanky se vzrkem, tedy výskyt klizníh vzrku či žádanky (chybějící neb evidentně špatné údaje, rzdíly vedlejších údajů na žádance a vzrku, nejasný pžadavek na vyšetření netýká se zásadních údajů typu rdné čísl neb příjmení) řeší pracvník prvádějící příjem materiálu kamžitě při příjmu dle zásad při příjmu vzrků směrnic S-LLG-004 a S-LLG-005 Pstup při dplňvání neúplně neb chybně vyplněné žádanky Údaje na neúplně neb chybně vyplněné žádance, která ale umžňuje jednznačnu identifikaci vzrku a pacienta, lze za určitých pdmínek dplnit ddatečně. Dplnění údajů prvádí pracvník přijímající bilgický materiál ihned p nalezení nedstatku telefnicky u vyšetření pžadujícíh lékaře. Zjištěné údaje dplní d žádanky, není-li t mžné, vyžádá si žádanku nvu. Údaje pravené neb upravené na riginální žádance pracvníkem/pracvníky labratře musí být jasně značeny datem a pdpisem pracvníka, který změnu prvedl. Pstup při zjištění nestandardníh, klizníh vzrku (nádby s materiálem) V případě, že jsu nestadardní primární vzrky přijaty a zpracvány, musí být ve výsledkvém listu ppsána pvaha prblému či dchylky d nrmy (ppis stavu přijatéh vzrku a případný vliv tht stavu na výsledek vyšetření). Drbné nedstatky v značení vzrku (překlepy, nesprávně uvedené jmén, ale suhlasící rdné čísl) jsu řešeny s indikujícím lékařem, prjednání je veden záznam na žádance s uvedením dpvědnéh pracvníka labratře. Název LABORATORNÍ PŘÍRUČKA Čísl verze 1 Typ dkumentu řízená dkumentace - dkument Datum vydání / platí d: Autr: Bc. Kateřina Texlvá Schválil: RNDr. Vendula Wernervá Kód dkumentu: A-LLG-002 Zdrj: STRANA 20 (CELKEM 29)

21 Sanatrium Helis, spl.s r.. Pracviště: Labratř lékařské genetiky Štefánikva 12, resp Brn Telefn: texlva.k@sanatriumhels.cz D 3 VYŠETŘOVÁNÍ SMLUVNÍMI LABORATOŘEMI Labratř lékařské genetiky Sanatria Helis v sučasnsti nevyužívá služeb žádné smluvní ani splupracující labratře. E. VYDÁVÁNÍ VÝSLEDKŮ A KOMUNIKACE S LABORATOŘÍ E 1 HLÁŠENÍ VÝSLEDKŮ V KRITICKÝCH INTERVALECH Veducí labratře při zjištění patlgickéh nálezu neprdleně infrmuje sbně neb telefnicky indikujícíh lékaře. E 2 INFORMACE O FORMÁCH VYDÁVÁNÍ VÝSLEDKŮ, TYPY NÁLEZŮ A LABORATORNÍCH ZPRÁV Všechna vyšetření prvedená labratří lékařské genetiky Sanatria Helis jsu uzavřena výsledkvým listem. Tent se liší dle prvedených vyšetření. Cytgenetická zpráva pr stanvení karytypu, případně hdnty ZCHA bsahuje: identifikaci labratře (jmén a adresa) identifikační údaje pacienta (jmén, rdné čísl, pjišťvna) identifikační údaje indikujícíh lékaře (IČZ, pracviště) kód diagnózy pacienta druh primárníh vzrku a datum dběru vzrku vlastní výsledek včetně stručnéh ppisu pužité metdy interpretaci výsledku datum závěrečné zprávy identifikaci pracvníka zdpvědnéh za správnst výsledku Cytgenetická zpráva pr FISH, acgh vyšetření bsahuje: identifikaci labratře (jmén a adresa) identifikační údaje pacienta (jmén, rdné čísl, pjišťvna) vlastní výsledek včetně stručnéh ppisu pužité metdy Název LABORATORNÍ PŘÍRUČKA Čísl verze 1 Typ dkumentu řízená dkumentace - dkument Datum vydání / platí d: Autr: Bc. Kateřina Texlvá Schválil: RNDr. Vendula Wernervá Kód dkumentu: A-LLG-002 Zdrj: STRANA 21 (CELKEM 29)

22 Sanatrium Helis, spl.s r.. Pracviště: Labratř lékařské genetiky Štefánikva 12, resp Brn Telefn: texlva.k@sanatriumhels.cz interpretaci výsledku datum závěrečné zprávy identifikaci pracvníka zdpvědnéh za správnst výsledku Výsledky z cytgenetické labratře vydává atestvaný cytgenetik a patřuje je svým razítkem a pdpisem. Výsledky splu se zápisem průběhu cytgenetické analýzy jsu uchvávány v písemné pdbě ve spisvně cytgenetické labratře a zárveň v elektrnické pdbě v databázi systému pr pčítačvu analýzu brazu Lucia firmy Labratry Imaging. Údaje pacientvi jsu přístupné puze pracvníkům labratře, kteří vyšetření prvádějí. Elektrnická databáze je pravidelně zálhvána a přístup k ní mají puze právnění pracvníci labratře pd heslem. Za chranu dat a jejich zálhvání dpvídá správce sítě, viz interní směrnice SH Zálhvání a bnva dat Zprávy jsu cytgeneticku labratří předávány puze indikujícímu lékaři lékaři právněnému pžadvat genetické vyšetření, tedy smluvně zajištěnému klinickému genetikvi. Výsledky jsu indikujícím lékařům Sanatria Helis vydány veducím lékařem LLG v tištěné frmě, také jsu zapisvány d interní databáze pacientů Sanatria Helis PC-dktr. Lékařům pracujícím mim Sanatrium Helis jsu výsledky zasílány pštu dpručeným dpisem neb dručvány svzvu službu Sanatria Helis (sbní předání). Sdělvání výsledků telefnicky se prvádí puze výjimečně, a t puze indikujícímu lékaři a puze v případě, že je mžn se přesvědčit, že kmunikace prbíhá jednznačně s vlanu sbu. Výsledky stanvení karytypu a hdnty ZCHA nejsu předávány přím pacientvi. Zpráva z PGD vyšetření (z PGD cytgenetickéh vyš. a PGD mlekulárně genetickéh vyš.) bsahuje: identifikaci labratře (jmén a adresa) identifikační údaje pacienta (jmén, rdné čísl, pjišťvna) indikaci k testvání druh primárníh vzrku a datum dběru vzrku vlastní výsledek status vyšetřvanéh embrya a jeh další sud (embrytransfer, mražení, příp. likvidace) identifikaci pracvníka zdpvědnéh za správnst výsledku Výsledky jsu splu se záznamy průběhu IVF cyklu uchvávány v písemné pdbě ve spisvně labratří a zárveň v elektrnické pdbě v databázi přístupné puze pracvníkům labratře. Elektrnická databáze je pravidelně zálhvána. Za chranu dat a jejich zálhvání dpvídá správce sítě. Název LABORATORNÍ PŘÍRUČKA Čísl verze 1 Typ dkumentu řízená dkumentace - dkument Datum vydání / platí d: Autr: Bc. Kateřina Texlvá Schválil: RNDr. Vendula Wernervá Kód dkumentu: A-LLG-002 Zdrj: STRANA 22 (CELKEM 29)

23 Sanatrium Helis, spl.s r.. Pracviště: Labratř lékařské genetiky Štefánikva 12, resp Brn Telefn: texlva.k@sanatriumhels.cz Pvěřený pracvník labratře zprávy zalží d zdravtnické dkumentace v elektrnické i tištěné pdbě. Tištěná verze je rvněž předána pacientce jak sučást suhrnné zprávy léčebném IVF cyklu. Pvěřený pracvník labratře výsledky pacientkám telefnicky nesděluje. Sdělvání výsledků telefnicky se prvádí puze výjimečně, a t puze indikujícímu lékaři a puze v případě, že je mžn se přesvědčit, že kmunikace prbíhá jednznačně s vlanu sbu. E 3 ZMĚNY VÝSLEDKŮ A NÁLEZŮ Pkud djde k nalezení chyby v již vydaném výsledku, veducí labratře známí tut skutečnst ihned indikujícímu lékaři a prvede vydání nvéh pravenéh výsledku. Dále se prvede prava výsledku ve všech databázích a spisvnách, ve kterých výsledky cytgenetická labratř uchvává. Půvdní frmulace výsledku je sučástí archivvanéh pravenéh nálezu. E 4 INTERVALY OD DODÁNÍ VZORKU K VYDÁNÍ VÝSLEDKU Přijaté vzrky jsu vyhdncvány v přadí, ve kterém byly dručeny d labratře. Vzrky značené STATIM se zpracvávají a hdntí přednstně, výsledek vyšetření je lékaři sdělen neprdleně p dknčení vyšetření, ve lhůtě d 10 pracvních dní. Pkud nález vyžaduje další labratrní vyšetření pacienta jinu metdu, je v tmt termínu mžn vydat dílčí výsledek a lékař je infrmván dalším průběhu vyšetření. Karytyp z periferní krve 3 4 týdny STATIM d 10 pracvních dnů FISH D 10 pracvních dnů STATIM d 5 pracvních dnů PGD PCR a FISH D 24 hd. - PGD acgh D 20 pracvních dnů - Při nálezu patlgickéh karytypu je v některých případech nutné dplnit klasicku cytgeneticku analýzu labratrním vyšetřením pmcí jiné metdy, buď v Sanatriu Helis, neb na jiném smluvním pracvišti. V tm případě lze vydat cytgeneticku labratří v uvedeném termínu dílčí výsledek a p bdržení dplňujících výsledků bude pak vydán knečný výsledek cytgenetické analýzy. Název LABORATORNÍ PŘÍRUČKA Čísl verze 1 Typ dkumentu řízená dkumentace - dkument Datum vydání / platí d: Autr: Bc. Kateřina Texlvá Schválil: RNDr. Vendula Wernervá Kód dkumentu: A-LLG-002 Zdrj: STRANA 23 (CELKEM 29)

24 Sanatrium Helis, spl.s r.. Pracviště: Labratř lékařské genetiky Štefánikva 12, resp Brn Telefn: texlva.k@sanatriumhels.cz E 5 ZPŮSOB ŘEŠENÍ STÍŽNOSTÍ Případné stížnsti na činnst labratře je mžn pdat písemně na adresu Sanatria Helis, elektrnicky na adrese texlva.k@sanatriumhelis.cz, telefnicky na tel.: , neb sbně. Všechny stížnsti řeší veducí labratře a infrmuje ředitele Sanatria Helis. Stížnsti lze pdávat z jakéhkliv důvdu, zejména na: Průběh a rzsah prvedenéh labratrníh vyšetření Termín vydání výsledku Výsledky labratrníh vyšetření Způsb jednání pracvníků Sanatria Helis Jiné důvdy Stížnsti je vyřízena c nejdříve, nejpzději d 30 dnů. Výsledek sdělí veducí labratře písemně sbě, která stížnst uplatnila. Oprávněné stížnsti budu pdnětem pr zkvalitnění další práce v naší labratři. E 6 KONZULTAČNÍ ČINNOST LABORATOŘE, VYDÁVÁNÍ POTŘEB LABORATOŘÍ Cytgenetická labratř v sučasné dbě nepskytuje labratrní knzultace. E 7 SKLADOVÁNÍ VYŠETŘENÝCH VZORKŮ Z důvdu mžnéh kultivačníh neúspěchu a ptřeby pakvání kultivace se vzrek periferní krve v cytgenetické labratři uchvává následujících 7 dnů p dběru. Periferní krev se uchvává v chladničce při tepltě 4-8 C. P uplynutí tét dby jsu vzrky likvidvány, viz kapitla I - Likvidace bilgickéh dpadu a Prvzní-prtiepidemický řád (PPŘ). Vzrky pr PGD vyšetření (v labratři cytgenetické i mlekulárně genetické) nadále skladvány nejsu, prtže jsu kmpletně pužity pr analýzu. F. SEZNAM LABORATORNÍCH VYŠETŘENÍ VČETNĚ POPISU Přehled prváděných vyšetření a příslušné SOP = standardní perační pstupy Název LABORATORNÍ PŘÍRUČKA Čísl verze 1 Typ dkumentu řízená dkumentace - dkument Datum vydání / platí d: Autr: Bc. Kateřina Texlvá Schválil: RNDr. Vendula Wernervá Kód dkumentu: A-LLG-002 Zdrj: STRANA 24 (CELKEM 29)

25 Sanatrium Helis, spl.s r.. Pracviště: Labratř lékařské genetiky Štefánikva 12, resp Brn Telefn: texlva.k@sanatriumhels.cz Stanvení karytypu z periferní krve Stanvení hdnty ZCHA (získaných chrmzmálních aberací) z periferní krve Dplňující barvící techniky (C-pruhy, NOR-barvení) Kultivace periferní krve FISH Flurescenční In Situ Hybridizace PGD - FISH Preimplantační genetická diagnstika metduí FISH PGD - PCR Preimplantační genetická diagnstika metdu PCR Extrakce DNA z kapilární krve PGD acgh Preimplantační genetická diagnstika metdu acgh SOP-LLG-001 SOP-LLG-002 SOP-LLG-003 SOP-LLG-004 SOP-LLG-010 SOP-LLG-011 SOP-LLG-012 SOP-LLG-013 SOP-LLG-014 F-1 STANOVENÍ KARYOTYPU Princip metdy Při klasické cytgenetické analýze hdntíme pmcí mikrskpu pčet a strukturu chrmzmů získaných z T- lymfcytů pacienta. Periferní krev pacienta nejdříve 3-4 dny kultivujeme v kultivačním médiu, následně připravíme suspenzi vhdnu ke kapání na mikrskpická skla. Preparáty barvíme pmcí G-barvení (SOP-LLG- 001), případně dplňujícími barvícími technikami (SOP-LLG-003) neb prvedeme FISH (SOP-LLG-010). Cytgenetická analýza prbíhá v suladu s mezinárdními nrmami ECA a dle nmenklatury ISCN 2005, hdntí se mitóz. Pkud je při nálezu patlgickéh karytypu třeba upřesnit nalezenu chrmzmální aberaci, jsme schpni zajistit vyšetření CGH, SKY, micrarray, MLPA neb mband na splupracujících pracvištích. Pžadavky na primární vzrek dběr periferní krve - zajišťuje lékař - klinický genetik Odebírá se žilní krev, 1-4 ml d jednrázvé sterilní dběrvé supravy s náplní heparinu bjemu 2,5-4 ml, ihned p dběru lehce prmíchat, nesmí se třepat! Skladvání debrané krve Název LABORATORNÍ PŘÍRUČKA Čísl verze 1 Typ dkumentu řízená dkumentace - dkument Datum vydání / platí d: Autr: Bc. Kateřina Texlvá Schválil: RNDr. Vendula Wernervá Kód dkumentu: A-LLG-002 Zdrj: STRANA 25 (CELKEM 29)

26 Sanatrium Helis, spl.s r.. Pracviště: Labratř lékařské genetiky Štefánikva 12, resp Brn Telefn: texlva.k@sanatriumhels.cz Zkumavka s krví se uchvává v ledničce při tepltě 4-8 C (nesmí zmrznut!). Odebranu krev je mžn skladvat za těcht pdmínek až pět dní, nejpzději d pěti dnů je třeba ji dpravit d labratře. Transprt vzrku d labratře Transprt prvádí zaměstnanci labratře, svz z jiných zařízení zajišťuje pvěřený a pršklený zaměstnanec Sanatria Helis firemním vzidlem. Vzrky musí být přepravvány v transprtní nádbě při tepltě 4-8 C (vhdná je termska) a ihned p dručení ulženy v ledničce při tepltě 4-8 C. Vzrek je přijat v labratři puze s řádně vyplněnu žádanku, neznačené vzrky neb vzrky bez žádanek nemhu být přijaty. F 2 STANOVENÍ HODNOTY ZÍSKANÝCH CHROMOZOMÁLNÍCH ABERACÍ (ZCHA) Princip metdy Při stanvení hdnty získaných chrmzmálních sledujeme pmcí mikrskpu pčet aberantních buněk v periferní krvi pacienta. Pstup přípravy mikrskpických preparátů je bdbný, jak u stanvení karytypu z periferní krve, puze dba kultivace periferní krve je v tmt případě 48 hdin a k hdncení se pužívají nepruhvané preparáty (SOP-LLG-002). Hdntíme 100 buněk. Pžadavky na primární vzrek Pžadavky jsu stejné jak u vzrků periferní krve pr stanvení karytypu. Pkud je debrané mnžství krve dstatečné - alespň 2ml, lze stanvení ZCHA a karytypu prvést z téhž vzrku periferní krve. F- 3 FISH VYŠETŘENÍ Princip metdy Flurescenční In Situ hybridizace je metda zalžena na principu značení úseků chrmzmů neb interfázních buněčných jader kmplementární flurescenčně značenu DNA sndu. Pužívá se především k dplnění a upřesnění nálezu cytgenetickéh vyšetření. Název LABORATORNÍ PŘÍRUČKA Čísl verze 1 Typ dkumentu řízená dkumentace - dkument Datum vydání / platí d: Autr: Bc. Kateřina Texlvá Schválil: RNDr. Vendula Wernervá Kód dkumentu: A-LLG-002 Zdrj: STRANA 26 (CELKEM 29)

27 Sanatrium Helis, spl.s r.. Pracviště: Labratř lékařské genetiky Štefánikva 12, resp Brn Telefn: texlva.k@sanatriumhels.cz Labratř pužívané kmerční centrmerické, telmerické, celchrmzmvé a lkus-specifické FISH sndy. (SOP-LLG-010) F 4 PGD FISH (NUMERICKÉ ABERACE) Princip metdy V PGD nám FISH metda pskytuje infrmace numerických chrmzmálních aberacích aneuplidiích zastupených v buňkách embrya. Je zpravidla pužívána pětibarevná kmerční snda, detekující chrmzmy 13, 18, 21 a X, Y. Aneupldie těcht chrmzmů jsu nejčastějšími příčinami VV. Tt vyšetření může být případně rzšířen detekci chrmzmů 16 a 22, jejichž aneuplidie bývají častými příčinami abrtů. (SOP-LLG- 011) F - 5 PGD FISH (STRUKTURÁLNÍ ABERACE-TRANSLOKACE) Princip metdy FISH metda se rvněž využívá k detekci translkací. Umžňuje nám dlišit embrya s nebalancvanu frmu translkace d embryí bez translkace a embryí s balancvanu translkací. Pužívají se kmbinace 2-3 lkus-specifických, telmerických a centrmerických snd navržených specificky pr každý případ. (SOP-LLG-011) F 6 PGD PCR - VYŠETŘENÍ MONOGENNÍCH CHOROB Princip metdy PGD-PCR je určen k vyšetření embryí partnerů pdstupujících IVF, v jejichž rdině byl diagnstikván knkrétní mngenní nemcnění (děděné autzmálně dminantně, recesivně neb vázané na phlaví). Principem metdy je kmbinace přímé analýzy vlastníh místa genvé alterace a segregační nepřímé DNA diagnstiky na základě vyšetření plymrfních mikrsatelitních markerů předem charakterizvaných v rdině nsiče genvé alterace. Labratrně se využívá PCR technika s kmerčně dstupnými primery, fragmentační analýza a sekvence. (SOP-LLG-012) F 7 PGD CGH COMPARATIVNÍ GENOMOVÁ HYBRIDIZACE Název LABORATORNÍ PŘÍRUČKA Čísl verze 1 Typ dkumentu řízená dkumentace - dkument Datum vydání / platí d: Autr: Bc. Kateřina Texlvá Schválil: RNDr. Vendula Wernervá Kód dkumentu: A-LLG-002 Zdrj: STRANA 27 (CELKEM 29)

28 Sanatrium Helis, spl.s r.. Pracviště: Labratř lékařské genetiky Štefánikva 12, resp Brn Telefn: texlva.k@sanatriumhels.cz Princip metdy acgh je metda zalžená na kvantitativní dvubarevné flurescenční in situ hybridizaci, kdy rzdílné genmy (testvaný a kntrlní) jsu p izlaci DNA značeny různými flurchrmy, hybridizvány zkarytypvány a pak hdnceny. Sftware kvantifikuje změny v testvaném genmu na základě prvnání flurescenčních intenzit. Tat metda nám umžňuje identifikvat kvantitativní změny (zisky a ztráty materiálu) v celém genmu testvaných embryích získaných v rámci IVF cyklu, prti FISH metdy nám tedy dává mnhem více infrmací genetickém statusu testvanéh embrya. (Viz SOP-LLG-014) G. POKYNY PRO SPOLUPRACUJÍCÍ LÉKAŘE Infrmace dběrech viz ddíl C infrmace vydávání výsledků v ddíle E Kntakty viz ddíl B - 1 Pžadavkvé listy - Pr žádanky nejsu pžadvané speciální frmuláře, lze pužít běžný Pukaz na vyšetření/šetření typ K. H. POKYNY PRO PACIENTY Infrmvané suhlasy před genetickým vyšetřením viz ddíl C - 4. I. DALŠÍ INFORMACE I 1 LIKVIDACE BIOLOGICKÉHO MATERIÁLU Nebezpečný dpad Veškerý dpad se ihned třídí v místě vzniku a separuje d vhdných přepravních balů. Nebezpečný dpad se ukládá d barevných přepravních balů, drbný dpad, včetně jednrázvých jehel, se ukládá d pevnstěnných, uzavíratelných a spalitelných balů bez další manipulace. Tyt baly jsu značeny na viditelném místě štítky s katalgvým číslem, názvem shrmažďvanéh dpadu, značením půvdcem, jménem zdpvědné sby za bsluhu a údržbu shrmažďvanéh dpadu a datem vzniku. Odpad je denně dnášen z pracviště pracvníky úklidu d vyčleněné místnsti, která služí pr shrmáždění nebezpečnéh dpadu. Tat místnst je uzamčená a zabezpečená před vlným přístupem veřejnsti. V tét místnsti je chladicí bx, který splňuje pžadavek Název LABORATORNÍ PŘÍRUČKA Čísl verze 1 Typ dkumentu řízená dkumentace - dkument Datum vydání / platí d: Autr: Bc. Kateřina Texlvá Schválil: RNDr. Vendula Wernervá Kód dkumentu: A-LLG-002 Zdrj: STRANA 28 (CELKEM 29)