Přínos imunohistochemie k onkologické cytologii. Doc. MUDr. Jaroslav Horáček, CSc., MUDr. Pavla Flodrová

Transkript

1 Přínos imunohistochemie k onkologické cytologii Doc. MUDr. Jaroslav Horáček, CSc., MUDr. Pavla Flodrová

2 Imunohistochemie v cytologii ØFalešně pozitivní výsledky Zhmožděné, degenerované a nekrotické buněk Histocyty/makrofágy Buňky v mitóze Velké trojdimenzionální buněčné klastry ØFalešně negativní výsledky Při absenci pozitivní vnitřní kontroly je lze obtížně verifikovat, avšak negativní výsledky jsou v případě imunocytochemie méně významné než pozitivní. ØNespecifická pozitivita pozadí Méně významná než v histologii Většinou nejde o falešnou pozitivitu, ale o pravou odráží přítomnost daného proteinu (např. pozitivita thyreoglobulinu v nátěrech ze ŠŽ, lehké řetězce Ig ve výpotcích, intracytoplazmatické antigeny v případě poškozených buněk v nátěru) Buňky mohou vykazovat falešnou pozitivitu membrány, pokud jsou přítomny v tekutině, která obsahuje daný antigen v těchto případech nutno posuzovat pouze jadernou či intracytoplazmatickou pozitivitu

3 Imunohistochemie v cytologii Podpora nádorové diagnostiky zejména ve výpotcích, kde přítomnost epitelových buněk zpravidla značí maligní buněčnou populaci Menší spolehlivost v typizaci nádoru, nikoliv v rozhodnutí o maligní cytologické diagnóze Důležitá součást diagnostiky lymfomů Významné vyšetření je Ki67 určující stupeň proliferace Markery pro dif. dg. mezi populací lymfoidní (CD45) a epitelovou (LU-5, BerEP4, MOC-31, EMA)

4 Případ č. 1 Muž, 86 let Pravostranný neregredující fluidopneumothorax léčený punkcí, ponámahová dušnost K vyšetření zaslán jantarový výpotek CT vyšetření parahilózní útvar nádorového vzhledu při pravé plíci nejv. rozměru 80 mm, mediastinální lymfadenopatie V anamnéze adenokarcinom žaludku léčený subtotální gastrektomií a adjuvantní chemoterapií před 8 lety Metastáza karcinomu žaludku nebo nádorová duplicita?

5 HE 400x

6 CK7 400x

7 Napsin A, 400x

8 Případ č. 1 Souhrn imunohistochemického vyšetření Pozitivní BerEP4 MOC31 CK7 Napsin A negativní Calretinin HBME1 TTF-1 MUC2 CDX2 Závěr Jde o bronchogenní adenokarcinom, metastáza adenokarcinomu žaludku byla vyloučena. Jde o nádorovou duplicitu. Pacient indikován k symptomatické paliativní terapii.

9 Případ č. 2 Muž, 93 let V klinickém obraze kardiální dekompenzace s městnáním v malém oběhu, kašel s expektorací bílého sputa, v posledních dnech progrese stavu V anamnéze IHCS, fibrilace síní, DM II. typu, radikální prostatektomie před 14 lety pro adenokarcinom Punktován objemný pravostranný fluidothorax, který odeslán k cytologickému vyšetření

10 MGGR, 400x

11 MGGR, 400x

12 HE 400x

13 CK7, 400x

14 Případ č. 2 Pozitivní CK7 Souhrn imunohistochemického vyšetření negativní Calretinin TTF-1 PSA Závěr cytologického vyšetření Cytologický nález vysoce suspektní z přítomnosti maligní buněčné populace při karcinóze pleury, nelze vyloučit metastazující karcinom prostaty, může se však jednat i o nádorovou duplicitu (původ v plicích, pankreatu, ). Kontrolní RTG snímek plic s nálezem bilaterálních zastínění suspektních z nádorové infiltrace. Laboratorně výrazná elevace PSA. Klinický závěr: nález uzavřen jako generalizace adenokarcinomu prostaty.

15 Případ č. 3 Žena, 75 let Mediastinální lymfadenopatie - bronchoskopický odběr, k vyšetření zaslán materiál ke zhotovení cytobloku

16 HE 400x

17 AE1AE3, 400x

18 p63, 400x

19 Případ č. 3 Pozitivní Souhrn imunohistochemického vyšetření p63 nízké intenzity v menší části populace Synaptofyzin v ojedinělých jednotlivých buňkách negativní TTF-1 napsin A p40 CK5/6 chromogranin calretinin Závěr Maligní buňky nemalobuněčného karcinomu, může se jednat o nízce diferencovaný spinocelulární karcinom, do dif. dg. vstupuje i velkobuněčný karcinom, vhodná je korelace k definitivnímu materiálu v případě resekce. Klinický závěr: pacientka indikována k horní lobektomii pravé plíce a mediastinální lymfadenektomii.

20 Případ č. 3 resekát plíce s tumorem HE 40x, HE 200x

21 Případ č. 3 resekát plíce s tumorem CD56, 100x synaptofyzin, 200x

22 Případ č. 3 resekát plíce s tumorem Ki67, 40x p63, 100x Závěr: velkobuněčný neuroendokrinní karcinom

23 Případ č. 4 Muž, 69 let Punkce uzlu štítné žlázy, dle PET-CT nodózně přestavěný zvětšený levý lalok se zvýšenou akumulací glukózy V anamnéze solitární plazmocytom obratle léčený radioterapií před 5 měsíci a maligní melanom chorioidey léčený enukleací před 5 lety

24 MGGR, 200x

25 MGGR, 200x

26 MGGR, 200x

27 MGGR, 400x

28 Melan A, 200x

29 Melan A, 400x

30 Případ č. 4 Závěr: maligní buněčná populace metastazujícího maligního melanomu, Bethesda VI. Pacient indikován k systémové biologické léčbě generalizovaného maligního melanomu.

31 Případ č. 5 Muž, 87 let Mnohouzlová netoxická struma s dominantním zvětšením pravého laloku, který je velmi suspektního vzhledu, klinický obraz možnost difuzního karcinomu štítné žlázy punkce Pacient má v anamnéze světlobuněčný karcinom ledviny před 4 lety.

32 MGGR, 400x

33 Vimentin, 400x

34 RCC, 400x

35 Případ č. 5 Pozitivní Vimentin RCC Souhrn imunohistochemického vyšetření AE1AE3 (slaběji) Negativní TTF-1 CK7 CD45R0 Melan A S-100 Závěr Maligní buňky metastazujícího tumoru, nejspíše světlobuněčného karcinomu ledviny, BethesdaVI. Klinický závěr: generalizovaný karcinom ledviny, pacient zařazen do klinické studie biologické léčby, rezistence na krku se výrazně zmenšila.

36 Případ č. 6 Muž, 36 let Punkce ascitu, provedena odlehčující paracentéza a k vyšetření zaslána peritoneální tekutina V anamnéze dlouholetý průběh špatně kompenzované ulcerózní kolitidy PET-CT suspektní ložiskový proces peritonea

37 MGGR, 400x

38 HE, 400x

39 MOC31, 400x

40 BerEP4, 400x

41 CDX-2, 400x

42 CK20, 400x

43 Případ č. 6 Pozitivní BerEP4 MOC31 CDX2 Souhrn imunohistochemického vyšetření HBME-1 v mezotelové populaci negativní CK20 CK7 Calretinin WT-1 Závěr cytologického vyšetření Nález je suspektní z přítomnosti maligní buněčné populace epitelového původu, nejspíše adenokarcinomu. IHC profil podporuje původ v duodenogastropankreatobiliární oblasti.

44 Případ č. 6 biopsie peritonea HE 40x, HE 400x

45 Případ č. 6 biopsie peritonea Müller, 100x BerEP4, 100x

46 Případ č. 6 biopsie peritonea CDX2, 100x CK20, 100x Závěr: adenokarcinom mucinózní, dle IHC profilu na prvním místě nutno zvažovat původ v tlustém střevě.

47 Literatura Ganjei-Azar P., Nadji M.: Color Atlas of Immunocytochemistry in Diagnostic Cytology, Springer, Vaculová J., Horáček J.: Contribution immunochemical methods in diagnosis and prevention of cervical dysplastic changes, Journal of Nursing, Social Studies, Public Health and Rehabilitation, 2015, roč. 6, č. 1-2, s Horáček J., Kobilková J.: Gynekologická cytodiagnostika, Maxdorf, Adamkov M, Furjelová M, Horáček J, Benčat M, Kružliak P. Relationship of mismatch repair proteins and survivin in colon polyps and carcinomas. Acta Histochem Jul;116(6): Herbeck G., Ondruš J., Dvořák V., Mortakis A.: Atlas kolposkopie, Maxdorf, Dabbs D. J.: Diagnostic Immunohistochemistry, Saunders, 2014.

48

49

50

51