AMY-P Precipath U plus (10 x 3 ml, pro USA) Kód Precipath U plus (10 x 3 ml) Kód 301

Transkript

1 Informace pro objednání Analyzátory, na kterých lze cobas c pack(y) použít α Amylase EPS Pancreatic 200 zkoušek Systémové ID Roche/Hitachi cobas c 311, cobas c 501/ Calibrator f.a.s. (12 x 3 ml) Kód Calibrator f.a.s. (12 x 3 ml, pro USA) Kód Precinorm U plus (10 x 3 ml) Kód Precinorm U plus (10 x 3 ml, pro USA) Kód Precipath U plus (10 x 3 ml) Kód Precipath U plus (10 x 3 ml, pro USA) Kód Precinorm U (20 x 5 ml) Kód Precinorm U (4 x 5 ml) Kód Precipath U (20 x 5 ml) Kód Precipath U (4 x 5 ml) Kód PreciControl ClinChem Multi 1 (20 x 5 ml) Kód PreciControl ClinChem Multi 1 (4 x 5 ml) Kód PreciControl ClinChem Multi 1 (4 5 ml, pro USA) Kód PreciControl ClinChem Multi 2 (20 x 5 ml) Kód PreciControl ClinChem Multi 2 (4 x 5 ml) Kód PreciControl ClinChem Multi 2 (4 5 ml, pro USA) Kód Diluent NaCl 9 (50 ml) Systémové ID Česky Systémové informace Pro analyzátory cobas c 311/501: AMY P: ACN 571 Pro analyzátor cobas c 502: AMY P: ACN 8571 Použití In vitro test pro kvantitativní měření pankreatické α amylázy v lidském séru, plazmě a moči na systémech Roche/Hitachi cobas c. Souhrn 1,2,3,4,5,6,7,8,9,10 α amylázy (1,4 α D glukanohydrolázy, EC ) katalyzují hydrolytický rozklad polymerických uhlovodíků, jako je amylóza, amylopektin a glykogen štěpením 1,4 α glykosidických vazeb. Glykosidické vazby polysacharidů a oligosacharidů jsou většinou hydrolyzovány souběžně. Maltotrióza, nejmenší jednotka, je konvertována na maltózu a glukózu, ale velmi pomalu. Jsou známy 2 typy α amylázy, pankreatická (P typ) a slinná (S typ). Zatímco P typ můžeme přiřadit jednoznačně ke slinivce a je tedy orgánově specifický, S typ může pocházet z různých míst. Vedle slinných žláz je možné se s ním setkat ve slzách, potu, lidském mléce, plodové vodě, plicích, varlatech a epitelu vejcovodů. Jelikož specifické klinické symptomy pankreatických onemocnění jsou omezené, má důležitou úlohu při jejich diagnostice. Stanovení pankreatické α amylázy místo celkové α amylázy je proto výhodnější. Stanovení pankreatické α amylázy je přínosem pro diagnostiku a sledování akutní pankreatitidy a akutních záchvatů chronické pankreatitidy. Posuzováno měřítkem klinické senzitivity a specifičnosti je diagnostická hodnota pankreatické α amylázy srovnatelná s hodnotou lipázy, obecně uznávaným enzymem specifickým pro pankreas. Senzitivita pankreatického izoenzymu α amylázy je o 38 vyšší než celková α amyláza v diagnostice akutní pankreatitidy, pokud je, jako obvykle, kritériem trojnásobné překročení horní hranice referenčního rozmezí. Metod pankreatické α amylázy bylo popsáno značné množství: radio a enzym immuno, jakož i částečná inhibice slinné α amylázy inhibitorem získaným z obilných klíčků a výpočet aktivity pankreatické α amylázy na základě rozdílu zbytkové a celkové aktivity amylázy. Zde popisovaná kinetická metoda je založena na inhibici aktivity lidské slinné α amylázy 2 různými monoklonálními protilátkami a rozštěpení 4,6 etyliden (G 7 ) 1,4 nitrofenyl (G 1 ) α,d maltoheptaosidu (Ethylidene Protected Substrate = EPS) pankreatickou α amylázou a následné hydrolýze všech degradačních produktů na p nitrofenol s pomocí α glukosidázy (100 uvolnění chromoforu). Výsledky této metody korelují s výsledky naměřenými na HPLC. Toto se drží doporučení IFCC, bylo ale optimalizováno pro výkon a stabilitu. Princip testu (zjednodušeně) 10,11 Kolorimetrické Po imunoinhibici s protilátkami proti lidské slinné α amyláze je selektivně měřena pankreatická α amyláza enzymatickou kolorimetrickou metodou, použitím substrátu 4,6 etyliden p nitrofenyl α D maltoheptaosid (etyliden G 7 PNP). 4 Zjednodušené schéma reakce: pankreatická α amyláza 5 etyliden G 7 PNP a) + 5 H 2 O 2 etyliden G G 2 PNP + 2 etyliden G G 3 PNP + etyliden G 3 + G 4 PNP 2 G 2 PNP + 2 G 3 PNP + G 4 PNP + 14 H 2 O a) PNP p nitrofenol α glukosidáza 5 PNP + 14 G b) b) G Glukóza Rychlost tvorby p nitrofenolu je přímo úměrná katalytické aktivitě pankreatické α amylázy. Stanovuje se fotometricky měřením nárůstu absorbance. Reagencie - pracovní roztoky R1 R3 HEPES pufr: 52.4 mmol/l, ph 7.1 (37 C); NaCl: 87 mmol/l; chlorid hořečnatý: 12.6 mmol/l; chlorid vápenatý: mmol/l; α glukosidáza (mikrobiální): 67 µkat/l; monoklonální protilátky (myší): 97 mg/l; konzervans HEPES pufr: 52.4 mmol/l, ph 7.1 (37 C); 4,6 etyliden G 7 PNP: 22 mmol/l; konzervans, stabilizátory R1 je v pozici B a R3 je v pozici C. 1 / 5

2 Bezpečnostní opatření a varování Pro diagnostické použití in vitro. Dodržujte běžná bezpečnostní opatření, nutná pro nakládání se všemi reagenciemi. Likvidace všech odpadních materiálů musí probíhat v souladu s místními předpisy. Bezpečnostní listy jsou pro odborné uživatele dostupné na vyžádání. Zacházení s reagenciemi Připravena k použití Uskladnění a stabilita AMY P Doba skladování při 2 8 C: V analyzátoru při použití a v chlazeném prostoru analyzátoru: Diluent NaCl 9 Doba skladování při 2 8 C: V analyzátoru při použití a v chlazeném prostoru analyzátoru: Čtěte datum exspirace na štítku cobas c packu. 12 týdnů Čtěte datum exspirace na štítku cobas c packu. 12 týdnů Odběr vzorků a příprava 11,12 Pro odběr a přípravu vzorků používejte vhodné zkumavky nebo odběrové nádobky. Pouze níže uvedené vzorky byly testovány a jsou přijatelné. Sérum. Plazma: Li heparin plazma. Uvedené druhy vzorků byly testovány s vybranými typy odběrových zkumavek, které byly komerčně dostupné v té době, tzn. že do testu nebyly zařazeny všechny typy zkumavek všech výrobců. Systémy odběru vzorků různých výrobců mohou obsahovat různé materiály, které mohou mít v některých případech vliv na výsledky. Při zpracování vzorků v primárních zkumavkách (systémy odběru vzorků) dodržujte pokyny jejich výrobce. Vzorky, obsahující precipitáty, centrifugujte před provedením testu. Stabilita: 13 7 dní při C Odebírejte bez aditiv. 1 měsíc při 2 8 C Stabilita: 14 2 dny při C 10 dní při 2 8 C Pankreatická α amyláza je nestabilní v kyselé moči. Neprodleně zpracujte nebo před skladováním alkalizujte ph (okolo ph 7). 13 Dodávaný materiál Reagencie jsou uvedeny v části "Reagencie - pracovní roztoky". Potřebný materiál (ale nedodávaný se soupravou) Viz část "Informace pro objednání" Celkové vybavení laboratoře Stanovení Optimálního využití dosáhnete, budete-li dodržovat pokyny uvedené v dokumentaci pro příslušný analyzátor. Pokyny ke specifické pro analyzátor vyhledejte v příslušném návodu k použití. Provádění aplikací, které nejsou schváleny Roche, je bez záruky a musí být definováno uživatelem. Aplikace pro sérum, plazmu a moč Definice zkoušky cobas c /44 56 Množství vzorku Ředění vzorku Zvýšený 4 µl Definice zkoušky cobas c /57 70 Množství vzorku Ředění vzorku Zvýšený 4 µl Definice zkoušky cobas c /57 70 Množství vzorku Ředění vzorku Zvýšený 8 µl Kalibrace Kalibrátory Typ kalibrace Frekvence kalibrace S1: H 2 O S2: C.f.a.s. Linear 2bodová kalibrace po změně šarže reagencií jestliže to vyžaduje proces kontroly kvality 2 / 5

3 Návaznost: Tato metoda byla standardizována podle reagencií Roche pomocí kalibrovaných pipet na manuálním fotometru, m absolutních hodnot a specifické absorptivity substrátu, ε. Kontrola kvality Ke kontrole kvality použijte kontrolní materiály uvedené v části "Informace pro objednání". Navíc lze použít i jiný vhodný kontrolní materiál. Kontrolní intervaly a limity by měly být uzpůsobeny pro každou laboratoř dle individuálních požadavků. Naměřené hodnoty by se měly pohybovat v definovaných mezích. Každá laboratoř by měla mít vypracovaný postup pro případ, že hodnoty kontrol překročí definované meze. Sledujte příslušná vládní nařízení a lokální směrnice kontroly kvality. Výpočet Systémy Roche/Hitachi cobas c automaticky vypočítá aktivitu analytu každého vzorku. Převodní faktor: U/L x = µkat/l Omezení - interference 12,15 Zůstatková aktivita slinné α amylázy je přibližně 3. Ve vzácných případech, kdy je aktivita slinné α amylázy vysoká, může dojít ke zvýšení naměřeného výsledku pankreatické α amylázy. Lehká změna žlutého zabarvení roztoku 2 neinterferuje s využitím testu. Nepipetujte ústy a zajistěte, aby reagencie nepřišly do styku s pokožkou. (Sliny a pot obsahují α amylázu!) Kritérium: Výtěžnost v rámci ± 10 počáteční hodnoty při aktivitě pankreatické α amylázy 50 U/L (0.84 µkat/l). Ikterus: 16 Bez významných interferencí do hodnoty I indexu 60 pro konjugovaný a nekonjugovaný bilirubin (přibližná koncentrace konjugovaného a nekonjugovaného bilirubinu: 1026 µmol/l nebo 60 mg/dl). Hemolýza: 16 Bez významných interferencí do hodnoty H indexu 200 (přibližná koncentrace hemoglobinu: 124 µmol/l nebo 200 mg/dl). Lipémie (Intralipid): 16 Bez významných interferencí do hodnoty L indexu Mezi L indexem (odpovídá zákalu) a koncentrací triglyceridů je slabá korelace. Ve vzácných případech mohou vzorky s kombinací zvýšeného zákalu (L index) a vysoké aktivity amylázy způsobit označení >React nebo >Abs. Silně zakalené a výrazně lipemické vzorky mohou být označeny Abs. Léčiva: Při terapeutických koncentracích nebyla při použití běžných panelů léků zjištěna žádná interference. 17,18 Výjimka: Bez interferencí od kyseliny askorbové až do 5.68 mmol/l (100 mg/dl). Léčiva na základě icodextrinu mohou vést ke snížení hodnot amylázy. 19 Ve velmi vzácných případech gamapatie, především u typu IgM (Waldenströmova makroglobulinémie), může způsobit nespolehlivé výsledky. 20 Pacienti s makroamylasémií mohou mít zvýšené výsledky pankreatické α amylázy. Zvýšení není způsobeno nedostatečnou inhibicí slinné amylázy v komplexu imunoglobulinů v séru. Příčinou je vyšší normální hladina p amylázy, protože tento komplex nepodléhá glomerulární filtraci. Toto zvýšení pankreatické α amylázy nediagnostikuje pankreatitidu. Měření zvýšené hladiny p amylázy v moči potvrzuje pankreatitidu, poranění slinivky či karcinom pankreatu, jelikož nedochází k úplné vazbě amylázy v komplexech s imunoglobuliny a glomerulární filtrací může proniknout do moči. 19 Léčiva: Při terapeutických koncentracích nebyla při použití běžných panelů léků zjištěna žádná interference. 18 Výjimka: O přibližně 15 nižší výtěžnost byla zjištěna při koncentracích kyseliny askorbové 22.7 mmol/l (400 mg/dl). Pro diagnostické účely je vždy nezbytné používat výsledky ve spojení s anamnestickými údaji pacienta, klinickým vyšetřením a jinými nálezy. POTŘEBNÝ KROK Programování speciálního mytí: Při zpracovávání určitých kombinací testů na systémech Roche/Hitachi cobas c je použití speciálních mycích cyklů povinné. Nejnovější verzi seznamu zamezení přenosu mezi vzorky (carry over) lze rovněž nalézt v metodickém listu NaOHD/SMS/Multiclean/SCCS nebo NaOHD/SMS/SmpCln1+2/SCCS. Pro další pokyny čtěte uživatelskou příručku. Analyzátor cobas c 502: Veškeré programování speciálního mytí nezbytné pro zamezení carry over je dostupné přes cobas link, ruční zadávání není potřebné. Tam, kde se to vyžaduje, musí být před vykazováním výsledků provedeno programování speciálního mytí/zamezení přenosu mezi vzorky (carry over). Limity a rozmezí Rozsah měření U/L ( µkat/l) Vzorky s vyššími aktivitami měřte pomocí funkce rerun. Vzorky nařeďte 1:5 pomocí funkce rerun. Výsledky ze vzorků naředěných funkcí rerun jsou automaticky vynásobeny faktorem 5. Spodní limity měření Spodní detekční limit testu 3 U/L (0.05 µkat/l) Spodní detekční limit představuje nejnižší měřitelnou hladinu analytu, kterou lze odlišit od nuly. Je vypočítána jako hodnota ležící 3 standardní odchylky nad nejnižším standardem (standard 1 + 3, opakovatelnost, n = 21). Očekávané hodnoty 10 Muži/ženy µkat/l U/L Spontánně vyloučená moč Poměr pankreatická α amyláza/kreatinin Muži Ženy Muži Ženy µkat/l µkat/l µkat/g µkat/g U/L U/L U/g U/g Poměr pankreatická α amyláza/kreatinin Kvůli potlačení vlivu odchylek aktivity pankreatické α amylázy v moči je vhodné měřit poměr pankreatické α amylázy/kreatinin. K tomu je potřeba změřit aktivitu pankreatické α amylázy a koncentraci kreatininu ve vzorku spontánně odebrané moči. Poměr [µkat/mmol nebo U/g] = pankreatická α amyláza [µkat/l nebo U/L] kreatinin [mmol/l nebo g/l] Poměr clearence amyláza/kreatinin (ACCR) 14 ACCR je vypočítáno na základě aktivity amylázy a koncentrace kreatininu. Oba vzorky, sérum i moč, musí být odebrány ve stejnou dobu. ACCR [] = Amyláza v moči [U/L] x kreatinin v séru [mg/l] x 100 Amyláza v séru [U/L] x kreatinin v moči [mg/l] ACCR se rovná přibližně 2 5. Každá laboratoř by si měla prověřit převoditelnost očekávaných hodnot na svou populaci pacientů, a je-li to nutné stanovit si vlastní referenční rozmezí. Specifické údaje o využití Údaje o využití, typické pro analyzátory, jsou uvedeny níže. Výsledky získané v různých laboratořích se mohou lišit. Preciznost Preciznost byla stanovena použitím lidských vzorků a kontrol podle interního postupu s opakovatelností (n = 21) a mezilehlou precizností (3 alikvoty na sérii, 1 série denně, 21 dní). Byly získány následující výsledky: Opakovatelnost Precinorm U 42.6 (0.71) 0.4 (0.01) 0.9 Precipath U 97.8 (1.63) 0.7 (0.01) / 5

4 Lidské sérum (0.40) 0.4 (0.01) 1.7 Lidské sérum (0.70) 0.6 (0.01) 1.5 Mezilehlá preciznost Precinorm U 42.7 (0.71) 0.6 (0.01) 1.3 Precipath U 99.6 (1.66) 1.5 (0.03) 1.5 Lidské sérum (0.40) 0.5 (0.01) 2.1 Lidské sérum (0.84) 0.6 (0.01) 1.2 Opakovatelnost Precinorm U 42.9 (0.72) 0.5 (0.01) 1.1 Precipath U 98.1 (1.64) 0.9 (0.02) (0.39) 0.3 (0.01) (2.52) 1 (0.02) 0.8 Mezilehlá preciznost Precinorm U 43.2 (0.72) 0.6 (0.01) 1.3 Precipath U 99.6 (1.66) 1.5 (0.03) (1.16) 1.3 (0.02) (3.19) 2 (0.04) 1.1 Porovnání metod Hodnoty pankreatické amylázy pro vzorky lidského séra, plazmy a moči, získané na analyzátoru Roche/Hitachi cobas c 501 (y), byly porovnány s hodnotami stanovenými použitím odpovídající reagencie na analyzátoru Roche/Hitachi 917 (x). Počet vzorků (n) = 87 Passing/Bablok 21 y = 1.004x U/L Lineární regrese τ = r = y = 1.002x U/L Aktivity vzorků byly v rozmezí 23.6 až 1410 U/L (0.394 až 23.5 µkat/l). Počet vzorků (n) = 88 Passing/Bablok 21 y = 0.982x U/L Lineární regrese τ = r = y = 0.981x U/L Aktivity vzorků byly v rozmezí 65.0 až 1270 U/L (1.08 až 21.2 µkat/l). Odkazy 1 Greiling H, Gressner AM, eds. Lehrbuch der Klinischen Chemie und Pathobiochemie, 3rd ed. Stuttgart/New York: Schattauer Verlag Keller H, ed. Klinisch-chemische Labordiagnostik für die Praxis, 2nd ed. Stuttgart/New York: Georg Thieme Verlag 1991: Tietz NW, Burlina A, Gerhardt W, et al. Multicenter Evaluation of a Specific Pancreatic Isoamylase Assay Based on a Double Monoclonal Antibody Technique. Clin Chem 1988;34: Junge W, Troge B, Klein G, et al. Evaluation of a New Assay for Pancreatic Amylase: Performance Characteristics and Estimation of Reference Intervals. Clin Biochem 1989;22: Rizzotti P, Klein G. Evaluation of a specific immunoinhibition method for the determination of pancreatic α-amylase. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1994;32: Jalali MT, Laing I, Gowenlock AH, et al. Specific radioimmunoassays for human pancreatic and salivary isoamylases. Clin Chim Acta 1985;150: Harmoinen A, Jokela H, Koivula T, et al. Evaluation of a new inhibitor test for isoamylase on Hitachi 705 analyzer. J Clin Chem Clin Biochem 1986;24: Gerber M, Wulff K. Fortschritte in der spezifischen Bestimmung der Pankreas-α-amylase. Laboratoriumsmedizin 1988;12: Kruse-Jarres JD, Hafkenscheid JCM, Hohenwallner W, et al. Evaluation of a New α-amylase Assay Using 4,6-Ethylidene- (G7)-1-4-nitrophenyl-(G1)-α-D-maltoheptaoside as Substrate. J Clin Chem Clin Biochem 1989;27: Junge W, Wortmann W, Wilke B, et al. Development and evaluation of assays for the determination of total and pancreatic amylase at 37 C according to the principle recommended by the IFCC. Clin Biochem 2001;34: Erratum Clin Biochem 2003;36: Kurrle-Weitenhiller A, Hölzel W, Engel D, et al. Method for the determination of total and pancreatic α-amylase based on 100 cleavage of the protected substrate ethylidene-4-nitrophenylmaltoheptaoside. Clin Chem 1996;42(S6): Young DS. Effects of Preclinical Variables on Clinical Laboratory Tests. AACC Press 1997, 2nd edition Tietz NW. Clinical Guide to Laboratory Tests. 3rd ed. Philadelphia, Pa: WB Saunders Co; Hohenwallner W, Hägele EO, Scholer A, et al. Bestimmung von alpha- Amylase mit p-nitrophenylmaltoheptaosid als Substrat. Ber Öster Ges Klin Chem 1983;6: Gokal R, Moberly J, Lindholm B, et al. Metabolic and laboratory effects of icodextrin. Kidney Int 2002;62(81): Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical Comparisons of Interferences in Clinical Chemistry Instrumentation. Clin Chem 1986;32: Breuer J. Report on the Symposium Drug effects in Clinical Chemistry Methods. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1996;34: Sonntag O, Scholer A. Drug interference in clinical chemistry: recommendation of drugs and their concentrations to be used in drug interference studies. Ann Clin Biochem 2001;38: Lott J. Inflammatory diseases of the pancreas. CRC critical reviews in clinical laboratory sciences 1982;17: Bakker AJ, Mücke M. Gammopathy interference in clinical chemistry assays: mechanisms, detection and prevention. Clin Chem Lab Med 2007;45(9): Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11): Tečka se v tomto metodickém listu vždy používá jako desetinný oddělovač k označení hranice mezi celými a desetinnými místy desetinného čísla. Oddělení tisíců se nepoužívá. Symboly Roche Diagnostics používá následující symboly a znaky, včetně uvedených v normě ISO GTIN Obsah soupravy Významné doplňky nebo změny jsou označeny pruhem podél textu. 2014, Roche Diagnostics Objem po rekonstituci nebo promíchání Globální číslo obchodní položky 4 / 5

5 Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D Mannheim Distribuce v USA: Roche Diagnostics, Indianpolis, IN Zákaznická podpora v / 5