Některé analyzátory a soupravy nejsou dostupné ve všech zemích. Pro další systémové aplikace kontaktujte místní zastoupení Roche Diagnostics.

Transkript

1 Informace pro objednání Analyzátor(y), na kterých lze soupravu použít α Amylase liquid acc. to IFCC ([1] 6 x 66 ml, [2] 6 x 16 ml) Roche/Hitachi MODULAR P α Amylase liquid acc. to IFCC ([1] 12 x 22 ml, [2] 6 x 10 ml) Roche/Hitachi Calibrator f.a.s. (12 x 3 ml) Kód Calibrator f.a.s. (12 x 3 ml, pro USA) Kód Precinorm U (20 x 5 ml) Kód Precinorm U (4 x 5 ml) Kód Precinorm U plus (10 x 3 ml) Kód Precinorm U plus (10 x 3 ml, pro USA) Kód Precipath U (20 x 5 ml) Kód Precipath U (4 x 5 ml) Kód Precipath U plus (10 x 3 ml) Kód Precipath U plus (10 x 3 ml, pro USA) Kód PreciControl ClinChem Multi 1 (20 x 5 ml) Kód PreciControl ClinChem Multi 1 (4 x 5 ml) Kód PreciControl ClinChem Multi 1 (4 x 5 ml, pro USA) Kód PreciControl ClinChem Multi 2 (20 x 5 ml) Kód PreciControl ClinChem Multi 2 (4 x 5 ml) Kód PreciControl ClinChem Multi 2 (4 x 5 ml, pro USA) Kód 392 Některé analyzátory a soupravy nejsou dostupné ve všech zemích. Pro další systémové aplikace kontaktujte místní zastoupení Roche Diagnostics. Česky Systémové informace Pro analyzátor Roche/Hitachi MODULAR P: ACN 570 (ne pro USA), ACN 566 (STAT) Použití Enzymatická in vitro zkouška pro kvantitativní stanovení α amylázy v lidském séru, plazmě a moči na automatizovaných analyzátorech klinické chemie Roche. Souhrn 1,2,3,4,5,6,7,8,9 α amylázy (1,4 α D glukanohydrolázy, EC ) katalyzují hydrolytický rozklad polymerických uhlovodíků, jako je amylóza, amylopektin a glykogen štěpením 1,4 α glykosidických vazeb. Glykosidické vazby polysacharidů a oligosacharidů jsou většinou hydrolyzovány souběžně. Maltotrióza, nejmenší jednotka, je konvertována na maltózu a glukózu, ale velmi pomalu. Rozlišují se 2 typy α amyláz: pankreatická (P typ) a ze slinných žláz (S typ). Zatímco P typ můžeme přiřadit jednoznačně ke slinivce a je tedy orgánově specifický, S typ může pocházet z různých míst. Vedle slinných žláz je možné se s ním setkat ve slzách, potu, lidském mléce, plodové vodě, plicích, varlatech a epitelu vejcovodů. Jelikož specifické klinické symptomy pankreatických onemocnění jsou omezené, má stanovení α amylázy důležitou úlohu při jejich diagnostice. Proto je především užívána pro diagnostiku a monitorování akutní pankreatitidy. Hyperamylasémie se nevztahuje jen na akutní pankreatitidu nebo zánětlivou fázi chronické pankreatitidy, ale vyskytuje se rovněž ve spojitosti s renálním selháním (omezená glomerulární filtrace), nádory na plicích, vaječnících, při plicních chorobách, onemocnění slinných žláz, diabetické ketoacidóze, cerebrálním traumatu, při chirurgických zásazích nebo v případech makroamylasémie. Specifičnost pro pankreas doporučujeme potvrdit doplňujícím vyšetřením specifického enzymu pro pankreas - lipázy nebo pankreatické α amylázy. Pro stanovení α amylázy bylo popsáno mnoho metod. Jejich základem bylo stanovení poklesu substrátu měřením viskozity, turbidimetricky, nefelometricky a amyloklasticky nebo měřením degradačních produktů vznikajících sacharogenním nebo kinetickým způsobem, v enzymy katalyzovaných reakcích. Zde popisovaná kinetická metoda je založena na úplném rozštěpení 4,6 etyliden (G 7 ) 1,4 nitrofenyl (G 1 ) α,d maltoheptaosidu (Ethylidene Protected Substrate = EPS) α amylázou a následné hydrolýze všech degradačních produktů na p nitrofenol s pomocí α glukosidázy (100% uvolnění chromoforu). Výsledky této metody korelují s výsledky naměřenými na HPLC. Princip testu (zjednodušeně) 10,11 Enzymatická fotometrická metoda dle IFCC Vzorek a přidání R1 Přidání R2 a zahájení reakce: 5 etyliden G 7 PNP + 5 H 2 O 2 etyliden G G 2 PNP + 2 etyliden G G 3 PNP + ethylidene G 3 + G 4 PNP α-amyláza Definované oligosacharidy jako 4,6 etyliden (G 7 ) p nitrofenyl (G 1 ) α,d maltoheptaosid (etyliden G 7 PNP) jsou štěpeny katalytickým účinkem α amyláz. G 2 PNP, G 3 PNP a G 4 PNP fragmenty, takto vytvořené, jsou úplně hydrolyzovány na p nitrofenol a glukózu α glukosidázou. α glukosidáza 2 G 2 PNP + 2 G 3 PNP + G 4 PNP + 14 H 2 O 5 PNP + 14 G (PNP = p nitrofenol; G = glukóza) Intenzita zabarvení uvolňovaného p nitrofenolu je přímo úměrná aktivitě α amylázy a měří se fotometricky. Reagencie - pracovní roztoky R1 R2 HEPES a pufr: 52.4 mmol/l, ph 7.00 (37 C); NaCl: 87 mmol/l; chlorid hořečnatý: 12.6 mmol/l; chlorid vápenatý: mmol/l; α glukosidáza (mikroorganismy): 4 ku/l; konzervans HEPES a pufr: 52.4 mmol/l, ph 7.00 (37 C); 4,6 etyliden G 7 PNP: 22 mmol/l; konzervans; stabilizátor. a) HEPES = kys. 2-[4-(2-hydroxyetyl)-1-piperazinyl]-etansulfenová Bezpečnostní opatření a varování Pro diagnostické použití in vitro. Dodržujte běžná bezpečnostní opatření, nutná pro nakládání se všemi reagenciemi. Likvidace všech odpadních materiálů musí probíhat v souladu s místními 1 / 5

2 předpisy. Bezpečnostní listy jsou pro odborné uživatele dostupné na vyžádání. Zacházení s reagenciemi R1: Připravena k přímému použití R2: Připravena k přímému použití Uskladnění a stabilita Součásti neotevřené soupravy: Do data exspirace při 2 8 C R1: 4 týdny otevřená a v chlazeném prostoru analyzátoru R2: 4 týdny otevřená a v chlazeném prostoru analyzátoru Odběr vzorků a příprava 9,12 Sérum/plazma Pro odběr a přípravu vzorků používejte vhodné zkumavky nebo odběrové nádobky. Pouze níže uvedené vzorky byly zkoušeny a jsou přijatelné. Sérum Plazma: Li, Na, NH 4+ heparinová nebo EDTA plazma. (Hodnoty EDTA plazmy jsou o 5 10 % nižší než v séru). Stabilita: 13 7 dní při C 1 měsíc při 2 8 C Uvedené druhy vzorků byly testovány s vybranými typy odběrových zkumavek, které byly komerčně dostupné v té době, tzn. že do testu nebyly zařazeny všechny typy zkumavek všech výrobců. Systémy odběru vzorků různých výrobců mohou obsahovat různé materiály, které mohou mít v některých případech vliv na výsledky. Při zpracování vzorků v primárních zkumavkách (systémy odběru vzorků) dodržujte pokyny jejich výrobce. Moč Odebírejte bez aditiv. Stabilita: 14 2 dní při C 10 dní při 2 8 C α amyláza je nestabilní v kyselé moči. Neprodleně zpracujte nebo před skladováním alkalizujte ph (okolo ph 7). 12 Vzorky, obsahující precipitáty, centrifugujte před provedením testu. Dodávaný materiál Reagencie jsou uvedeny v části "Reagencie - pracovní roztoky". Potřebný materiál (ale nedodávaný se soupravou) Viz část "Informace pro objednání" 0.9% NaCl Celkové vybavení laboratoře Stanovení Optimálního využití stanovení dosáhnete, budete-li dodržovat pokyny uvedené v dokumentaci pro příslušný analyzátor. Pokyny ke stanovení specifické pro analyzátor vyhledejte v příslušném návodu k použití. Provádění aplikací, které nejsou schváleny Roche, je bez záruky a musí být definováno uživatelem. Kalibrace Návaznost: Tato metoda byla standardizována podle reagencií Roche pomocí kalibrovaných pipet na manuálním fotometru, stanovením absolutních hodnot a specifické absorptivity substrátu, ε. S1: 0.9% NaCl S2: C.f.a.s. (Calibrator for automated systems) Frekvence kalibrace 2bodová kalibrace se doporučuje: po změně šarže reagencií jestliže to vyžaduje proces kontroly kvality. Kontrola kvality Ke kontrole kvality použijte kontrolní materiály uvedené v části "Informace pro objednání". Navíc lze použít i jiný vhodný kontrolní materiál. Kontrolní intervaly a limity by měly být uzpůsobeny pro každou laboratoř dle individuálních požadavků. Naměřené hodnoty by se měly pohybovat v definovaných mezích. Každá laboratoř by měla mít vypracovaný postup pro případ, že hodnoty kontrol překročí definované meze. Sledujte příslušná vládní nařízení a lokální směrnice kontroly kvality. Výpočet Analyzátor automaticky vypočítá aktivitu analytu pro každý vzorek. Převodní faktor: U/L x = μkat/l Omezení - interference 12,15 Lehká změna žlutého zabarvení roztoku 2 neinterferuje s využitím testu. Nepipetujte ústy a zajistěte, aby reagencie nepřišly do styku s pokožkou. (Sliny a pot obsahují α amylázu!) Kritérium: Výtěžnost v rámci ± 10 % počáteční hodnoty. Ikterus: 16 Bez významných interferencí do hodnoty I indexu 60 pro nekonjugovaný bilirubin (přibližná koncentrace nekonjugovaného bilirubinu: 60 mg/dl nebo 1026 µmol/l). b Hemolýza: 16 Bez významných interferencí do hodnoty H indexu 500 (přibližná koncentrace hemoglobinu: 500 mg/dl nebo 310 µmol/l). b Lipémie (Intralipid): 16 Bez významných interferencí do hodnoty L indexu b Mezi koncentrací triglyceridů a L indexem (odpovídá zákalu) je slabá korelace. Analyzátory Roche/Hitachi MODULAR P: Ve vzácných případech mohou vzorky s kombinací zvýšeného zákalu (L index) a vysoké aktivity amylázy způsobit označení Limt0, Limt1, Limt2 nebo ABS?. Silně zakalené a výrazně lipemické vzorky mohou být označeny Abs. Antikoagulanty: Prokázána interference s citrátem a fluoridem. Glukóza: Bez interferencí glukózy do 2000 mg/dl (111 mmol/l). b Přibližně o 10 % nižší výtěžnost byla nalezena při koncentraci glukózy 4500 mg/dl (250 mmol/l). K. askorbová: Bez interferencí kys. askorbové do 100 mg/dl (5.68 mmol/l). b Přibližně o 10 % nižší výtěžnost byla zjištěna při koncentraci kys. askorbové 880 mg/dl (50 mmol/l). Léčiva na základě icodextrinu mohou vést ke snížení hodnot amylázy. 31 běžně používaných léčiv bylo zkoušeno in vitro. Nebyla zjištěna žádná interference. c Ve velmi vzácných případech gamapatie, především u typu IgM (Waldenströmova makroglobulinémie), může způsobit nespolehlivé výsledky. 17 Pro diagnostické účely je vždy nezbytné používat výsledky ve spojení s anamnestickými údaji pacienta, klinickým vyšetřením a jinými nálezy. b) Měřeno při hladinách α amylázy do 150 U/L (2.50 µkat/l). c) Měřeno při hladinách α amylázy do 75 U/L (1.25 µkat/l). POTŘEBNÝ KROK Programování speciálního mytí: Při zpracovávání určitých kombinací testů na analyzátorech Roche/Hitachi je použití speciálních mycích cyklů povinné. Pro další pokyny čtěte nejnovější verzi seznamu zamezení přenosu (carry over) a návod k použití. Uživatelé v USA naleznou pokyny pro speciální mycí cykly v dokumentu Special Wash Programming, dostupném na stránce usdiagnostics.roche.com, a v návodu k použití. Tam, kde se to vyžaduje, musí být před vykazováním výsledků provedeno programování speciálního mytí/zamezení přenosu mezi vzorky (carry over). Meze a rozmezí Měřící rozsah U/L ( µkat/l) Na přístrojích bez funkce rerun ručně nařeďte vzorky s vyšší aktivitou 0.9% roztokem NaCl nebo destilovanou/deionizovanou vodou (např ). Výsledek vynásobte odpovídajícím faktorem (např. 5). Vypočítaný rozšířený měřící rozsah pomocí rerunu: Analyzátor Roche/Hitachi MODULAR P, ACN 566 (sérum/plazma), ACN 570 (sérum/plazma): Vzorky s vyššími aktivitami měřte pomocí funkce rerun. Vzorky nařeďte 1:3.5 pomocí funkce rerun. Výsledky ze vzorků naředěných funkcí rerun jsou automaticky vynásobeny faktorem / 5

3 Analyzátor Roche/Hitachi MODULAR P, ACN 566 (moč), ACN 570 (moč): Vzorky s vyššími aktivitami měřte pomocí funkce rerun. Vzorky ředíme 1:11 pomocí funkce rerun. Výsledky ze vzorků naředěných funkcí rerun jsou automaticky vynásobeny faktorem 11. Dolní meze měření Mez detekce zkoušky 3 U/L (0.05 µkat/l) Mez detekce představuje nejnižší měřitelnou hladinu analytu, kterou lze odlišit od nuly. Počítá se jako hodnota ležící 3 standardní odchylky nad nejnižším standardem (standard SD, opakovatelnost, n = 21). Očekávané hodnoty 9 Sérum/plazma Muži/ženy µkat/l U/L Spontánně vyloučená moč poměr α-amyláza/ kreatinin Muži µkat/l U/L Ženy µkat/l U/L Muži µkat/g U/g Ženy µkat/g U/g poměr α amyláza/kreatinin Kvůli potlačení vlivu odchylek aktivity α amylázy v moči je vhodné stanovovat poměr α amylázy/kreatinin. K tomu je potřeba změřit aktivitu α amylázy a koncentraci kreatininu ve vzorku spontánně odebrané moči. α-amyláza [U/L nebo µkat/l] Poměr [U/g nebo µkat/mmol] = kreatinin [g/l nebo mmol/l] Poměr clearence amyláza/kreatinin (ACCR) 12 ACCR je vypočítáno na základě aktivity amylázy a koncentrace kreatininu. Oba vzorky, sérum i moč, musí být odebrány ve stejnou dobu. Amyláza v moči [U/L] x kreatinin v séru [mg/l] ACCR [%] = x 100 Amyláza v séru [U/L] x kreatinin v moči [mg/l] ACCR se rovná přibližně 2 5 % Každá laboratoř by si měla prověřit převoditelnost očekávaných hodnot na svou populaci pacientů, a je-li to nutné stanovit si vlastní referenční rozmezí. Specifické údaje o využití Údaje o využití, typické pro analyzátory, jsou uvedeny níže. Výsledky získané v různých laboratořích se mohou lišit. Preciznost Preciznost byla měřena použitím lidských vzorků a kontrol podle interního protokolu s opakovatelností (n = 21) a mezilehlou precizností (3 alikvoty na sérii, 1 série denně, 21 dní). Byly získány následující výsledky: Vzorek Opakovatelnost Průměr SD VK U/L µkat/l U/L µkat/l % Lidské sérum I Lidské sérum II Precinorm U Vzorek Mezilehlá preciznost Průměr SD VK U/L µkat/l U/L µkat/l % Lidské sérum I Mezilehlá preciznost Lidské sérum II Precinorm U Porovnání metod Sérum/Plazma A. Porovnání stanovení α amylázy použitím kapalných reagencií Roche pro α amylázu (y) a metodou α amyláza EPS s hodnotami převedenými na hodnoty PNP (x) poskytlo následující korelaci (U/L): y = 0.449x τ = y = 0.450x Počet stanovených lidských vzorků séra: 129 Aktivity vzorků byly v rozmezí 40 až 2716 U/L (0.67 až 44.3 µkat/l). B. Uživatele v USA Porovnání stanovení α amylázy použitím kapalných reagencií Roche pro α amylázu (y) a metodou α amyláza EPS s hodnotami nepřevedenými na hodnoty PNP (x) poskytlo následující korelaci (U/L): y = 1.08x τ = y = 1.08x Počet stanovených lidských vzorků séra: 51 Aktivity vzorků byly v rozmezí 16.4 až U/L (0.27 až 23.3 µkat/l). Moč A. Porovnání stanovení α amylázy použitím kapalných reagencií Roche pro α amylázu (y) a metodou α amyláza EPS s hodnotami převedenými na hodnoty PNP (x) poskytlo následující korelaci (U/L): y = 0.447x τ = 0.98 y = 0.448x Počet stanovených lidských vzorků séra: 222 Aktivity vzorků byly v rozmezí 38 až 1747 U/L (0.62 až 29.2 µkat/l). B. Uživatele v USA Porovnání stanovení α amylázy použitím kapalných reagencií Roche pro α amylázu (y) a metodou α amyláza EPS s hodnotami nepřevedenými na hodnoty PNP (x) poskytlo následující korelaci (U/L): y = 1.15x τ = y = 1.14x r = Počet stanovených lidských vzorků moči: 51 Aktivity vzorků byly v rozmezí 7.8 až U/L (0.13 až 20.9 µkat/l). Odkazy 1 Greiling H, Gressner AM, eds. Lehrbuch der Klinischen Chemie und Pathobiochemie, 3rd ed. Stuttgart/New York: Schattauer Verlag Keller H, ed. Klinisch-chemische Labordiagnostik für die Praxis, 2nd ed. Stuttgart/New York: Georg Thieme Verlag 1991: Salt WB II, Schenker S. Amylase - its clinical significance: a review of the literature [Review]. Medicine 1976;55: Steinberg WM, Goldstein SS, Davies ND, et al. Diagnostic assays in acute pancreatitis [Review]. Ann Intern Med 1985;102: Tietz NW, Huang WY, Rauh DF, et al. Laboratory tests in the differential diagnosis of hyperamylasemia. Clin Chem 1986;32(2): Junge W, Troge B, Klein G, et al. Evaluation of a New Assay for Pancreatic Amylase: Performance Characteristics and Estimation of Reference Intervals. Clin Biochem 1989;22: / 5

4 7 Rauscher E, von Bülow S, Hägele EO, et al. Ethylidene protected substrate for the assay of human α-amylase. Fresenius Z Anal Chem 1986;324: Kruse-Jarres JD, Hafkenscheid JCM, Hohenwallner W, et al. Evaluation of a New α-amylase Assay Using 4,6-Ethylidene- (G7)-1-4-nitrophenyl-(G1)-α-D-maltoheptaoside as Substrate. J Clin Chem Clin Biochem 1989;27: Junge W, Wortmann W, Wilke B, et al. Development and evaluation of assays for the determination of total and pancreatic amylase at 37 C according to the principle recommended by the IFCC. Clin Biochem 2001;34: Lorentz K. Approved recommendation on IFCC methods for the measurement of catalytic concentration of enzymes. Part 9. IFCC Method for α-amylase. (1,4-α-D-Glucan 4-Glucanohydrolase, EC ). Clin Chem Lab Med 1998;36(3): Kurrle-Weitenhiller A, Hölzel W, Engel D, et al. Method for the determination of total and pancreatic α-amylase based on 100 % cleavage of the protected substrate ethylidene-4-nitrophenylmaltoheptaoside. Clin Chem 1996;42(S6): Young DS. Effects of Preclinical Variables on Clinical Laboratory Tests. AACC Press, 1997, 2nd edition. 13 Tietz NW, ed. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. Philadelphia PA: WB Saunders Company 1995; Hohenwallner W, Hägele EO, Scholer A, et al. Bestimmung von alpha- Amylase mit p-nitrophenylmaltoheptaosid als Substrat. Ber Öster Ges Klin Chem 1983;6: Gokal R, Moberly J, Lindholm B, et al. Metabolic and laboratory effects of icodextrin. Kidney Int 2002;62(81): Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical Comparisons of Interferences in Clinical Chemistry Instrumentation. Clin Chem 1986;32: Bakker AJ, Mücke M. Gammopathy interference in clinical chemistry assays: mechanisms, detection and prevention. Clin Chem Lab Med 2007;45(9): Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11): Nastavení přístroje Uživatelé v USA: Doplňující informace o ovládání vyhledejte v aplikačním letáku a dokumentu Special Wash Programming, dostupném na stránce usdiagnostics.roche.com. Uživatelé analyzátorů Roche/Hitachi MODULAR: Zadejte aplikační parametry prostřednictvím letáku s čárovým kódem. Analyzátor Roche/Hitachi 902 č. <Chemistry> STAT application 1 Test Name 2 Assay Code (Mthd) Rate A 3 Assay Code (2. Test) 0 4 Reaction Time Assay Point Assay Point Assay Point Assay Point Wavelength (SUB) Wavelength (MAIN) Sample Volume R1 Volume R1 Pos R1 Bottle Size Small 15 R2 Volume R2 Pos R2 Bottle Size Small 18 R3 Volume R3 Pos R3 Bottle Size Small 21 Calib. Type (Type) Linear 22 Calib. Type (Wght) 0 23 Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc Calib. Pos S1 ABS 0 36 K Factor K2 Factor K3 Factor K4 Factor K5 Factor A Factor 0 42 B Factor 0 43 C Factor 0 44 Mez SD Duplicate Limit Sens. Limit S1 Abs. Limit (L) S1 Abs. Limit (H) Abs. Limit Abs. Limit (D/I) Increase 51 Prozone Limit 0 52 Proz. Limit (Upp/Low) Lower 53 Prozone (Endpoint) Expect. Value (L) Expect. Value (H) Instr. Fact. (a) 1 57 Instr. Fact. (b) 0 58 Key setting Data vložená obsluhou Více informací je uvedeno v příslušném návodu k použití určeném pro analyzátor, v odpovídajících aplikačních letácích a metodických listech všech potřebných komponent. Tečka se v tomto metodickém listu vždy používá jako desetinný oddělovač k označení hranice mezi celými a desetinnými místy desetinného čísla. Oddělení tisíců se nepoužívá. 4 / 5

5 Symboly Roche Diagnostics používá následující symboly a znaky, včetně uvedených v normě ISO GTIN Obsah soupravy Reagencie Kalibrátor Objem po rekonstituci nebo promíchání Globální číslo obchodní položky Významné doplňky nebo změny jsou označeny pruhem podél textu. 2014, Roche Diagnostics Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D Mannheim Distribuce v USA: Roche Diagnostics, Indianpolis, IN Zákaznická podpora v / 5