Total Protein Urine/CSF Gen.3 Celkový protein moč/csf 3.gen (TPUC3)

Transkript

1 Total Protein Urine/ Gen.3 Celkový protein moč/ 3.gen () Informace pro objednání COBAS INTEGRA 150 Tests Kat. č Vyznačuje analyzátory, na kterých lze sadu cobas c použít Total Protein Urine/ Gen.3 Systémové-ID C.f.a.s. PUC 5 1 ml Kat. č Systémové-ID Precinorm PUC 4 3 ml Kat. č Systémové-ID Precipath PUC 4 3 ml Kat. č Systémové-ID NaCl Diluent ml Kat. č Systémové-ID Systémové informace COBAS INTEGRA Total Protein Urine/ Gen.3 () Test TPU3, test ID (moč) Test TPC3, test ID () Použití In vitro test pro kvantitativní stanovení koncentrace celkového proteinu v moči a mozkomíšním moku na systémech COBAS INTEGRA. Souhrn Stanovení proteinu v moči je využíváno při diagnostice a sledování stavu chorob, jakými jsou onemocnění ledvin a srdce nebo štítné žlázy, které jsou charakterizovány proteinurií nebo albuminurií. Stanovení proteinu v mozkomíšním moku je využíváno při diagnostice a sledování stavu meningitidy, nádorů mozku a infekcí centrálního nervového systému. 1 je vytvářena ultrafiltrací plazmy přes stěnu glomerulárních kapilár. Proteiny s relativně velkou molekulovou hmotností >40000 jsou většinou zcela zadrženy, zatímco menší sloučeniny snadněji prostupují do glomerulárního filtrátu. Většina proteinů do proniká difúzí z plazmy přes hemato-likvorovou bariéru. hodnot lze tedy pozorovat při zvýšené prostupnosti této bariéry nebo při zvýšení lokální syntézy imunoglobulinů. Turbidimetrické metody využívající kyselinu trichloroctovou (TCA) nebo sulfosalicylovou (SSA) vyžadují precipitaci proteinu ve vzorku v závislosti na jejich velikosti; výsledný zákal může být nestabilní a vytvářet vločky. Reagencie metod založených na schopnosti barvy vázat se na protein, jako např. Coomassie modř a pyrogalolová červeň s molybdátem reagují s proteiny v závislosti na složení aminokysein, může ale zabarvit sklo a předměty z plastu. Kvůli jejich mechanismu reakce vykazují jak turbimetrická, tak i kolorimetrická metoda rozdílnou senzitivitu na různé proteiny, obzvláště na proteinové fragmenty, jako např. Bence Jones proteiny 2 a malé proteiny, jako např. α1-mikroglobulin. Metodika, použitá v soupravě Roche Diagnostics Total Protein Urine/ Gen.3, byla popsána Iwatou a Nishikazem 3 a později ji modifikoval Luxton, Patel, Keir a Thompson. 4 V ní reaguje benzetonium chlorid s proteiny v alkalickém prostředí za vzniku zákalu, který je stabilnější a rovnoměrněji rozložen než je tomu u zákalových reakcí s SSA nebo TCA. Tato metodika má výhodu stejné reaktivity vůči albuminu i γ-globulinům a se stanovením neinterferují malé peptidy. Interference hořečnatých iontů je eliminována přídavkem EDTA. Princip testu Turbidimetrická metoda Vzorek je předinkubován v alkalickém prostředí obsahující EDTA, které denaturuje proteiny a zabraňuje interferenci hořečnatých iontů. Poté je přidán benzetonium chlorid a výsledný zákal je měřen při vlnové délce 512 nm. Reagencie - pracovní roztoky Složky Koncentrace R1 R2=SR Test Hydroxid sodný mmol/l EDTA-Na 74 44,8 mmol/l Benzetonium chlorid 32 7,75 mmol/l Bezpečnostní opatření a varování Věnujte pozornost všem varováním a bezpečnostním opatřením uvedeným v této Příručce metod, Kapitola 1, Úvod. VAROVÁNÍ. ŽÍRAVINA. R1 obsahuje hydroxid sodný. V případě kontaktu, opláchněte zasažené místo proudem vody. Vyhledejte lékařské ošetření při zasažení očí nebo při požití. POZOR. DRÁŽDIVÝ. R2 obsahuje benzetonium chlorid. Zabraňte zasažení očí, kůže a sliznic. V případě kontaktu, opláchněte zasažené místo proudem vody. Vyhledejte lékařské ošetření při zasažení očí nebo při požití. Tato souprava obsahuje složky klasifikované podle Evropské směrnice 99/45/ES: C R34 S26-37/39-45 R1 obsahuje hydroxid sodný. Žíravý Způsobuje poleptání. Při zasažení očí okamžitě důkladně vypláchněte vodou a vyhledejte lékařskou pomoc. V případech možného kontaktu s reagencií, používejte vhodné ochranné rukavice a ochranu očí/obličeje. V případě nehody nebo při nevolnosti vyhledejte neprodleně lékařské ošetření (ukažte štítek, je-li to možné). Kontaktní telefon: všechny země: , USA: Zacházení s reagenciemi Připraveno pro použití , V 9 CS 1 / 4

2 Substráty Uskladnění a stabilita Doba skladování při 15 až 25 C Systémy COBAS INTEGRA 400/400 plus Na palubě při 10 až 15 C 12 týdnů Systémy COBAS INTEGRA 800 Na palubě při 8 C 6 týdnů Viz datum exspirace na štítku obalu cobas c Odběr vzorků a příprava Pro odběr a přípravu vzorků používejte vhodné zkumavky nebo odběrové nádobky. Pouze níže uvedené vzorky byly testovány a jsou vhodné ke stanovení. Použijte náhodnou nebo 24-hod. sběr. Nepoužívat konzervans. Při sběru uchovávejte v chladničce. Mozkomíšní mok () Není třeba zvláštních aditiv. Krev ve vzorku znehodnocuje výsledek stanovení proteinu. 1 Vzorky pro stanovení proteinu v moči/ musí být odebrány před podáním fluoresceinu nebo 24 hodin poté. 5 Uvedené druhy vzorků byly testovány s vybranými typy odběrových zkumavek, které byly komerčně dostupné v té době tzn., že do testu nebyly zařazeny všechny typy zkumavek všech výrobců. Systémy odběru vzorků různých výrobců mohou obsahovat různé materiály, které mohou mít v některých případech vliv na výsledky. Při zpracování vzorků v primárních zkumavkách (systémy odběru vzorků) dodržujte pokyny jejich výrobce. Stabilita 6 : : 7 dní při 2-8 C 1 měsíc při (-15)-(-25) C 6 dní při 2-8 C >1 rok při (-15) (-25) C Před provedením stanovení centrifugujte vzorky při 3000 g po dobu 10 minut. Dodávaný materiál Reagencie jsou uvedeny v části "Reagencie - pracovní roztoky". Potřebný materiál (ale nedodávaný se soupravou) NaCl 9 (10x koncentrovaný isotonický solný roztok) pro automatické postředění a standartní ředění v sérii. Použijte NaCl Diluent 9, Kat. č , Systemové-ID nebo připravte roztok 9 NaCl z komerčně dostupných tablet chloridu sodného nebo z koncentrovaného fyziologického roztoku. Roztok NaCl je umístěn v předdefinované pozici stojánku a je stálý 28 dní na palubě analyzátorů COBAS INTEGRA 400/400 plus/800. Stanovení Nejvhodnějšího provedení stanovení dosáhnete, budete-li dodržovat pokyny uvedené v dokumentaci pro analyzátory. Instrukce, specifické pro jednotlivé analyzátory, vyhledejte v návodu k použití. Aplikace pro moč a COBAS INTEGRA 400/400 plus definice testu Způsob měření Absorbance Způsob výpočtu abs. Koncový bod Způsob reakce R1-S-SR Vlnové délky A/B 512 nm Výpočet první/posl. 33/40 Jednotka Pipetovací parametry Diluent (H 2 O) R1 100 µl Vzorek 10 µl 15 µl SR 40 µl Celkový objem 165 µl COBAS INTEGRA 800 definice testu Způsob měření Absorbance Způsob výpočtu abs. Koncový bod Způsob reakce R1-S-SR Vlnové délky A/B 512 nm Výpočet první/posl. 44/60 Jednotka Pipetovací parametry Diluent (H 2 O) R1 100 µl Vzorek 10 µl 15 µl SR 40 µl Celkový objem 165 µl Kalibrace Kalibrátor C.f.a.s. PUC Typ kalibrace logit/log 4 Poměr ředění kalibrátoru 1:1, 1:4, 1:8, 1:20, 1:40 a 0 prováděno automaticky přístrojem Opakování kalibrace Kalibrační interval Doporučen duplikát COBAS INTEGRA 400/400 plus systémy: každou kazetu a každých 43 dní a jestliže to vyžaduje proces kontroly kvality. Systémy COBAS INTEGRA 800: každou šarži a jestliže to vyžaduje proces kontroly kvality Zadejte přiřazené hodnoty celkové bílkoviny (moč a/nebo ) neředěného kalibrátoru, specifické pro šarži, jež je uvedena v příbalovém letáku kalibrátoru C.f.a.s. PUC. Návaznost: Tato metoda byla standardizována podle interní metody s návazností na NIST. Kontrola kvality Referenční rozmezí Patologické rozmezí Kontrolní interval Pořadí kontrol Kontrola po kalibraci Precinorm PUC Precipath PUC Doporučeno 24 hodin Určeno uživatelem Doporučena Ke kontrole kvality použijte kontrolní materiály uvedené v části "Informace pro objednání". Jiný vhodný kontrolní materiál může být rovněž použit. Kontrolní intervaly a meze by měly být uzpůsobeny pro každou laboratoř dle individuálních požadavků. Naměřené hodnoty by se měly pohybovat v požadovaných mezích. Každá laboratoř by měla mít vypracovaný postup pro případ, že hodnoty kontrol překročí požadované meze. Sledujte příslušná vládní nařízení a lokální směrnice kontroly kvality. Výpočet Analyzátory COBAS INTEGRA automaticky vypočítají koncentraci analytu pro každý vzorek. Pro více informací čtěte Data Analysis v Online Help (analyzátory COBAS INTEGRA 400/400 plus/800). Převodní faktor: x 0,1 = mg/dl 7 2 / , V 9 CS

3 Substráty Pro výpočet vyloučeného proteinu za 24 hod.: x TV (litry za 24 hodin) = mg/den Omezení - interference 8 Kritérium: Výtěžnost v rozmezí ±10 počáteční hodnoty. Ikterus Hemolýza Léky Ostatní Bez významných interferencí do hodnoty I indexu 35 (přibližná koncentrace konjugovaného bilirubinu: 599 µmol/l nebo 35 mg/dl). Hemoglobin interferuje. Při terapeutických koncentracích nebyla při použití běžných panelů léků zjištěna žádná interference. 9 Výjimka: Levodopa, Methyldopa a Cefoxitin sodný způsobují interferenci při terapeutických koncentracích (uměle vysoké hladiny celkového proteinu). Neprůzářné médium obsahující organicky navázaný jód (např. Hexabrix) může způsobovat falešně vysoké výsledky. Ve vzácných případech může gamapatie, především u typu IgM (Waldenströmova makroglobulinémie), způsobit nespolehlivé výsledky. Bylo prokázáno, že následující sloučeniny nezpůsobují žádnou významnou interferenci po přidání k normálnímu nebo patologickému poolu lidské moči: Chlorid amonný 187 mmol/l (10 g/l) Citrát 10 mmol/l (190 mg/dl) Kreatinin 53 mmol/l (6 g/l) Glukóza 194 mmol/l (35 g/l) Hořčík 75 mmol/l (1,8 g/l) Oxaláty 10 mmol/l (90 mg/dl) Fosfát 39 mmol/l (1,2 g/l) ovina 833 mmol/l (50 g/l) Kys. močová 5 mmol/l (85 mg/dl) Podání náhražek plazmy na základě želatiny může způsobit zvýšení hodnot proteinu v moči. Zvláštní požadavky na mytí Při zpracovávání určitých kombinací testů v analyzátorech COBAS INTEGRA je nezbytné používat speciální mycí kroky. Pro více informací o kombinacích testu vyžadujících extra mycí cykly čtěte, prosím, Příručku metod, Úvod, Extra mycí cykly (EWC). DŮLEŽITÉ V rámci omezení možnosti carry-over doporučujeme provádění stanovení ve vzorcích moče a na analyzátorech COBAS INTEGRA 800 v sériích. Doporučujeme zařadit test Extra wash cycle (extra mycí cyklus) pro vzorkové jehly (EWC-S, 0-989), dle popisu v Příručce metod, Úvod, Část III, před provedením série stanovení v nebo moči. Upozorňujeme, že reagenčnímu carryover mezi Fructosaminem a TPUC nelze předejít použitím programu předmytí na analyzátorech COBAS INTEGRA 800. Pro diagnostické účely je vždy nezbytné používat výsledky ve spojení s chorobopisem pacienta, klinickým vyšetřením a ostatními nálezy. Rozsah měření (moč a ) (4-200 mg/dl) Vzorky s vyššími koncentracemi se vyšetřují pomocí funkce rerun. Naředění vzorků pomocí funkce rerun je ředěním 1:3. Výsledky ze vzorků naředěných funkcí rerun jsou automaticky vynásobeny faktorem 3. Spodní detekční limit 40 (4 mg/dl) Detekční limit představuje nejnižší měřitelnou hladinu analytu, kterou lze odlišit od nuly. Je vypočítána jako hodnota ležící 3 standardní odchylky od vzorku s nulovou hodnotou (nulový vzorek + 3, přesnost v sérii, n = 21). Očekávané hodnoty : 10 24h: <140 mg/24 h náhodná: <150 : referenční rozmezí dle Tietze: 7 referenční rozmezí dle Thomase: (15-45 mg/dl) (20-40 mg/dl) Každá laboratoř by si měla prověřit převoditelnost očekávaných hodnot na svou populaci pacientů a je-li to nutné, stanovit si vlastní referenční rozmezí. Specifické technické údaje pro moč Údaje typické pro analyzátory COBAS INTEGRA jsou uvedeny níže. Výsledky získané v různých laboratořích se mohou lišit. Přesnost Reprodukovatelnost byla stanovena analýzou lidských vzorků a kontrol podle interního postupu (v sérii n = 21, mezi sériemi n = 21). Byly získány následující výsledky: Vzorek Mezi sériemi Precinorm PUC 245 1,22 0, ,90 0,88 Precipath PUC 789 2,67 0, ,78 0,35 Porovnání metod Hodnoty celkového proteinu ve vzorcích lidských močí, získané na analyzátoru COBAS INTEGRA 800 s použitím kazety COBAS INTEGRA Total Protein Urine/ Gen.3, byly porovnány s výsledky stanovenými použitím stejných reagencií na analyzátoru Roche/Hitachi 917 a předchozími reagenciemi (TPU-C) na analyzátoru COBAS INTEGRA 800. Analyzátor Roche/Hitachi 917 Počet vzorků (n) = 113 y = 0,981x + 6,61 y = 0,970x + 20,9 τ = 0,923 r = 0,994 (md 95) = 56,4 Sy.x = 29,2 Hodnoty byly v rozmezí 40 až 1788 (4,0 až 178,8 mg/dl). Analyzátor COBAS INTEGRA 800 Počet vzorků (n) = 137 y = 0,872x + 22,6 y = 0,770x + 35 τ = 0,762 r = 0,981 (md 95) = 87,9 Sy.x = 35,1 Hodnoty byly v rozmezí 14 až 1675 (1,4 až 167,5 mg/dl). Specifické technické údaje pro Reprezentativní technické údaje pro analyzátory COBAS INTEGRA jsou uvedeny níže. Výsledky získané v různých laboratořích se mohou lišit. Přesnost Reprodukovatelnost byla stanovena analýzou lidských vzorků a kontrol podle interního postupu (v sérii n = 21, mezi sériemi n = 21). Byly získány následující výsledky: Vzorek Mezi sériemi Precinorm PUC 329 2,11 0, ,90 0,88 Precipath PUC 789 2,67 0, ,78 0, , V 9 CS 3 / 4

4 Substráty Porovnání metod Hodnoty celkového proteinu ve vzorcích lidských, získané na analyzátoru COBAS INTEGRA 800 s použitím kazety COBAS INTEGRA Total Protein Urine/ Gen.3, byly porovnány s výsledky stanovenými použitím stejných reagencií na analyzátoru Roche/Hitachi MODULAR P a předchozími reagenciemi (TPU-C) na analyzátoru COBAS INTEGRA 800. Roche/Hitachi MODULAR P Počet vzorků (n) = 28 y = 0,976x + 1,23 y = 0,981x + 2,01 τ = 0,979 r = 0,998 (md 95) = 13,3 Sy.x = 8,2 Hodnoty byly v rozmezí 43 až 952 (4,3 až 95,2 mg/dl). Analyzátor COBAS INTEGRA 800 Počet vzorků (n) = 24 y = 0,87x + 1,35 y = 0,86x - 0,48 τ = 0,935 r = 0,996 (md 95) = 28,1 Sy.x = 15,4 Hodnoty byly v rozmezí 171 až 1296 (17,1 až 129,6 mg/dl). Odkazy 1. Tietz NW. Fundamentals of Clinical Chemistry. 3rd ed. Philadelphia: WB Saunders 1987: Boege F. Bence Jones-Proteine. J Lab Med 1999;23: Iwata I, Nishikaze O. Clin Chem 1979;25/7: Luxton R, Patel P, Keir G, Thompson E. Clin Chem 1989;35/8: Koumantakis G. Fluorescein Interference with Urinary Creatinine and Protein Measurements. Clin Chem 1991;37:10: Use of Anticoagulants in Diagnostic Laboratory Investigations. WHO Publication WHO/DIL/LAB/99.1 Rev Tietz NW, ed. Clinical Guide to Laboratory Tests. 3rd ed. Philadelphia: WB Saunders 1995: Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical Comparisons of Interferences in Clinical Chemistry Instrumentation. Clin Chem 1986;32: Sonntag O, Scholer A. Drug interferences in clinical chemistry: recommendation of drugs and their concentrations to be used in drug interference studies. Ann Clin Biochem 2001;38: Junge W, Wilke B, Halabi A, Jarausch J, Klein G. Reference Intervals for Total Protein in Collected and Random Urine using the Benzethonium Chloride Method. Clin Chem 2006;52:A157[Abstract]. 11. Thomas L. Labor und Diagnose. 6. Auflage; TH-Books Verlagsgesellschaft mbh, Frankfurt/Main, 2005: Bablok W et al. A General Regression Procedure for Method Transformation. J Clin Chem Clin Biochem 1988;26: Významné doplňky nebo změny jsou označeny pruhem podél textu Roche Diagnostics. Roche Diagnostics GmbH, D Mannheim 4 / , V 9 CS

5 V4 Total Protein Urine/ Gen.3 Vyznačuje systémy cobas c, na kterých lze reagencie použít Informace pro objednání Systémy Roche/Hitachi cobas c Total Protein Urine/ Gen.3 cobas c 311 cobas c tests Kat. č Systémové-ID C.f.a.s. PUC (5 x 1 ml) Kat. č Kód 489 Precinorm PUC (4 x 3 ml) Kat. č Kód 240 Precipath PUC (4 x 3 ml) Kat. č Kód 241 NaCl Diluent 9 (50 ml) Kat. č Systémové-ID Česky Systémové informace : ACN 708 : ACN 402 Použití In vitro test pro kvantitativní stanovení proteinu v lidské moči a na systémech Roche/Hitachi cobas c. Souhrn Stanovení proteinu v moči je využíváno při diagnostice a sledování stavu chorob, jakými jsou onemocnění ledvin a srdce nebo štítné žlázy, které jsou charakterizovány proteinurií nebo albuminurií. Stanovení proteinu v mozkomíšním moku () je využíváno při diagnostice a sledování stavu meningitidy, nádorů mozku a infekcí centrálního nervového systému. 1 je vytvářena ultrafiltrací plazmy přes stěnu glomerulárních kapilár. Proteiny s relativně velkou molekulovou hmotností >40000 jsou většinou zcela zadrženy, zatímco menší sloučeniny snadněji prostupují do glomerulárního filtrátu. Většina proteinů do proniká difúzí z plazmy přes hemato-likvorovou bariéru. hodnot lze tedy pozorovat při zvýšené prostupnosti této bariéry nebo při zvýšení lokální syntézy imunoglobulinů. Turbidimetrické metody využívající kyselinu trichloroctovou (TCA) nebo sulfosalicylovou (SSA) vyžadují precipitaci proteinu ve vzorku v závislosti na jejich velikosti; výsledný zákal může být nestabilní a vytvářet vločky. Reagencie metod založených na schopnosti barvy vázat se na protein, jako např. Coomassie modř a pyrogalolová červeň s molybdátem reagují s proteiny v závislosti na složení aminokysein, může ale zabarvit sklo a předměty z plastu. Kvůli jejich mechanismu reakce vykazují jak turbimetrická, tak i kolorimetrická metoda rozdílnou senzitivitu na různé proteiny, obzvláště na proteinové fragmenty, jako např. Bence Jones proteiny 2 a malé proteiny, jako např. α1-mikroglobulin. Metodika Roche použitá v diagnostické soupravě Urinary/ Protein byla popsána Iwatou a Nishikazem 3 a později ji modifikoval Luxton, Patel, Keir a Thompson. 4 V ní reaguje benzetonium chlorid s proteiny v alkalickém prostředí za vzniku zákalu, který je stabilnější a rovnoměrněji rozložen než je tomu u zákalových reakcí s SSA nebo TCA. Toto stanovení vykazuje nižší výtěžnost γ-globulinu v porovnání s albuminem o cca 30 5 a nevykazuje interferenci hořečnatých iontů kvůli přídavku EDTA. Princip testu Turbidimetrická metoda. Vzorek je předinkubován v alkalickém prostředí obsahující EDTA, které denaturuje proteiny a zabraňuje interferenci hořečnatých iontů. Poté je přidán benzetonium chlorid, který vytváří zákal. Reagencie - pracovní roztoky R1 Hydroxid sodný: 530 mmol/l; EDTA-Na: 74 mmol/l R2 Benzetonium chlorid: 32 mmol/l Bezpečnostní opatření a varování Pro diagnostické použití in vitro. Dodržujte běžná bezpečnostní opatření, nutná pro nakládání se všemi reagenciemi. Tato souprava obsahuje složky klasifikované podle Evropské směrnice 88/379/EHS: C - Žíravý R34, S26, S37/39, S45 (hydroxid sodný v reagencii R1) Způsobuje poleptání. Při zasažení očí okamžitě důkladně vypláchněte vodou a vyhledejte lékařskou pomoc. Používejte vhodné ochranné rukavice a ochranu očí/obličeje. V případě nehody nebo při nevolnosti vyhledejte neprodleně lékařské ošetření (viz štítek). Varování. Dráždivé. Nádobka 2 obsahuje benzetonium chlorid. Zabraňte zasažení očí, kůže a sliznic. V případě kontaktu, opláchněte zasažené místo proudem vody. Vyhledejte lékařské ošetření při zasažení očí nebo při požití. Kontaktní telefon: všechny země: Bezpečnostní listy jsou dostupné pro odborné uživatele na vyžádání. Likvidace všech odpadních materiálů musí probíhat v souladu s místními předpisy. Zacházení s reagenciemi Připraveno pro použití. Uskladnění a stabilita Doba skladování při C: Při použití a v chlazeném prostoru analyzátoru: NaCl Diluent 9 Doba skladování při 2-8 C: Při použití a v chlazeném prostoru analyzátoru: Viz datum exspirace na štítku cobas c packu. 6 týdnů Viz datum exspirace na štítku cobas c packu. 12 týdnů Odběr vzorků a příprava Pro odběr a přípravu vzorků používejte vhodné zkumavky nebo odběrové nádobky. Před provedením stanovení centrifugujte vzorky při 3000 g po dobu 10 minut. Pouze níže uvedené vzorky byly testovány a jsou vhodné ke stanovení. Použijte náhodnou nebo 24-hod. sběr. Nepoužívat konzervans. Při sběru uchovávejte v chladnici. Není třeba zvláštních aditiv. Krev ve vzorku znehodnocuje výsledek stanovení proteinu. 1 Vzorky pro stanovení proteinu v moči/ musí být odebrány před podáním fluoresceinu nebo 24 h poté. 6 Upozornění: Nepoužívejte sérum nebo kontroly na základě séra jako vzorky, neboť mohou způsobit ucpání systémů přístroje. Stabilita: 7 : : 7 dní při 2-8 C 1 měsíc při (-15)-(-25) C 6 dní při 2-8 C >1 rok při (-15) (-25) C Dodávaný materiál Reagencie jsou uvedeny v části "Reagencie - pracovní roztoky". Potřebný materiál (ale nedodávaný se soupravou) Viz část "Informace pro objednání". Destilovaná voda Celkové vybavení laboratoře Stanovení Optimálního provedení stanovení dosáhnete, budete-li dodržovat pokyny uvedené v dokumentaci pro analyzátory. Instrukce, specifické pro jednotlivé analyzátory, vyhledejte v návodu k použití , V 4 Česky 1 / 3 systémy cobas c

6 Total Protein Urine/ Gen.3 Provádění aplikací, které nejsou schváleny Roche, je bez záruky a musí být definováno uživatelem. Aplikace pro moč a cobas c 311 definice testu Typ stanovení 2 Point End Reakční čas / Body stanovení 10 / 6-14 Vlnová délka (sub/main) 700/505 nm Jednotky (mg/dl, g/l) Pipetování reagencie Diluent (H 2 O) R1 100 µl R2 40 µl Množství vzorku Vzorek Ředění vzorku Vzorek Diluent (NaCl) Běžný 6 µl Snížený 2 µl Zvýšený 12 µl cobas c 501 definice testu Typ stanovení 2 Point End Reakční čas / Body stanovení 10 / Vlnová délka (sub/main) 700/505 nm Jednotky (mg/dl, g/l) Pipetování reagencie Diluent (H 2 O) R1 100 µl R2 40 µl Množství vzorku Vzorek Ředění vzorku Vzorek Diluent (NaCl) Běžný 6 µl Snížený 2 µl Zvýšený 12 µl Kalibrace Kalibrátory Typ kalibrace Frekvence kalibrace S1: H 2 O S2-S6: C.f.a.s. PUC Vynásobte hodnoty, specifické pro jednotlivé šarže kalibrátoru, C.f.a.s. PUC faktory níže uvedenými a dostanete standardní koncentrace pro 6-ti bodovou kalibrační křivku. S2: 0,025 S3: 0,050 S4: 0,125 S5: 0,250 S6: 1,0 RCM Plná kalibrace - po změně šarže reagencií - a jestliže to vyžaduje proces kontroly kvality Návaznost: 8 Tato metoda byla standardizována podle primárního standardu s návazností na NIST. Kontrola kvality Ke kontrole kvality použijte kontrolní materiály uvedené v části "Informace pro objednání". Jiný vhodný kontrolní materiál může být rovněž použit. Kontrolní intervaly a meze by měly být uzpůsobeny pro každou laboratoř dle individuálních požadavků. Naměřené hodnoty by se měly pohybovat v požadovaných mezích. Každá laboratoř by měla mít vypracovaný postup pro případ, že hodnoty kontrol překročí požadované meze. Sledujte příslušná vládní nařízení a lokální směrnice kontroly kvality. Výpočet Systém Roche/Hitachi cobas c automaticky vypočítá koncentraci analytu každého vzorku. Převodní faktory: x 0,1 = mg/dl x 0,001 = g/l Pro výpočet vyloučeného proteinu za 24 hod.: x celkový objem (litry za 24 hodin) = mg/den. Omezení - interference 9 Kritérium: Výtěžnost v rozmezí ±10 počáteční hodnoty při koncentraci celkového proteinu 120 (12 mg/dl; 0,12 g/l). Výsledky vzorků s vysokými koncentracemi celkového proteinu nad rozsah měření do 7000 budou přístrojem označeny ABS? pro cobas c 501 >ABS pro cobas c 311 Tyto vzorky stanovte pomocí funkce rerun. Ikterus: Bez významných interferencí do hodnoty I indexu 20 pro konjugovaný bilirubin (přibližná koncentrace konjugovaného bilirubinu: 342 µmol/l (20 mg/dl)). Hemolýza: Hemoglobin interferuje. Léky: Při terapeutických koncentracích nebyla při použití běžných panelů léků zjištěna žádná interference 10,11 Výjimka: Levodopa, Methyldopa a Na 2 -cefoxitin způsobují uměle vysoké výsledky celkového proteinu a dobesilát vápenatý způsobuje uměle nízké výsledky. Neprůzářné médium obsahující organicky navázaný jód (např. Hexabrix) může způsobovat falešně vysoké výsledky. Podání náhražek plazmy na základě želatiny může způsobit zvýšení hodnot proteinu. Pro diagnostické účely je vždy nezbytné používat výsledky ve spojení s chorobopisem pacienta, klinickým vyšetřením a ostatními nálezy. Interference není známa. Zvláštní požadavky na mytí: Je nezbytné používat speciálních mycích cyklů při zpracovávání určitých kombinací testů v systémech Roche/Hitachi cobas c. Pro informace o kombinacích testu vyžadujících speciální cyklus mytí viz poslední verzi Seznamu vyhnutí se přenosu mezi vzorky (carry-over) a příručku pro obsluhu pro další pokyny. Rozsah měření (4-200 mg/dl; 0,04-2 g/l) Vzorky s vyššími koncentracemi se vyšetřují pomocí funkce rerun. Naředění vzorků pomocí funkce rerun je ředěním 1:3. Výsledky ze vzorků naředěných funkcí rerun jsou automaticky vynásobeny faktorem 3. Spodní detekční limit 40 (4 mg/dl; 0,04 g/l) Spodní detekční limit představuje nejnižší měřitelnou hladinu analytu, kterou lze odlišit od nuly. Je vypočítána jako hodnota ležící 3 standardní odchylky nad nejnižším standardem (standard 1 + 3, přesnost v sérii, n = 21). Očekávané hodnoty : 12 24h: <140 mg/24 h náhodná: <150 : referenční rozmezí dle Tietze (15-45 mg/dl) 13 referenční rozmezí dle Thomase (20-40 mg/dl) 14 Každá laboratoř by si měla prověřit převoditelnost očekávaných hodnot na svou populaci pacientů a je-li to nutné, stanovit si vlastní referenční rozmezí. systémy cobas c 2 / , V 4 Česky

7 V4 Total Protein Urine/ Gen.3 Specifické technické údaje Údaje typické pro analyzátory jsou uvedeny níže. Výsledky získané v různých laboratořích se mohou lišit. Přesnost Reprodukovatelnost byla stanovena opakovanou analýzou lidských vzorků podle interního postupu (v sérii n = 21; celkem n = 63). Byly získány následující výsledky: Precinorm PUC 159 (15,9) 1 (0,1) 0,7 Precipath PUC 1576 (158) 8 (0,8) 0,5 Lidská moč (10,1) 1 (0,1) 1,0 Lidská moč (19,1) 4 (0,4) 2,2 Celkem Precinorm PUC 156 (15,6) 2 (0,2) 1,5 Precipath PUC 1482 (148) 8 (0,8) 0,5 Lidská moč (10,6) 2 (0,2) 1,6 Lidská moč (15,4) 1 (0,1) 0,9 Control Level (28,1) 4 (0,4) 1,5 Control Level (69,1) 4 (0,4) 0,6 Lidský (35,5) 4 (0,4) 1,1 Lidský (51,7) 5 (0,5) 1,0 Celkem Control Level (27,2) 4 (0,4) 1,6 Control Level (66,0) 6 (0,6) 0,9 Lidský (34,9) 4 (0,4) 1,2 Lidský (50,1) 7 (0,7) 1,5 Porovnání metod Hodnoty celkového proteinu pro vzorky lidské moči a, získané na analyzátoru Roche/Hitachi cobas c 501 (y), byly porovnány s hodnotami stanovenými použitím stené reagencie na analyzátoru Roche/Hitachi 917 (x). Počet vzorků (n) = 70 Passing/Bablok 15 y = 0,985x + 6,23 y = 0,988x + 5,35 τ = 0,970 r = 1,000 Koncentrace vzorků byly v rozmezí 47 až 1887 (4,7 až 189 mg/dl). Odkazy 1. Tietz NW. Fundamentals of Clinical Chemistry. 3 rd ed. Philadelphia, Pa: WB Saunders Co; 1987: Boege F. Bence Jones-Proteine. J Lab Med 1999;23: Iwata I, Nishikaze O. Clin Chem. 1979;25/7: Luxton R, Patel P, Keir G, Thompson E. Clin Chem. 1989; 35/8: Hohnadel DC, Koller A. Urine protein total. In: Pesce AJ, Kaplan LA, editors. Methods in clinical chemistry. St. Louis, 1987, Mosby. 6. Koumantakis G. Fluorescein Interference with Urinary Creatinine and Protein Measurements. Clin Chem 1991;37:10: Use of Anticoagulants in Diagnostic Laboratory Investigations. WHO Publication WHO/DIL/Lab/99.1 Rev.2. Jan Standard Reference Materials from NERL, traceable to NIST (National Institute of Standards and Technology). 9. Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical Comparisons of Interferences in Clinical Chemistry Instrumentation. Clin Chem 1986;32: Report on the Symposium Drug effects in clinical chemistry methods, Breuer J, Eur J Clin Chem Clin Biochem 1996;34: Sonntag O, Scholer A. Drug interferences in clinical chemistry: recommendation of drugs and their concentrations to be used in drug interference studies. Ann Clin Biochem 2001;38: Junge W, Wilke B, Halabi A, Jarausch J, Klein G. Reference Intervals for Total Protein in Collected and Random Urine using the Benzethonium Chloride Method. Clin Chem 2006;52:A157[Abstract]. 13. Tietz NW, ed. Clinical Guide to Laboratory Tests. 3rd ed. Philadelphia: WB Saunders 1995: Thomas L. Labor und Diagnose. 6. Auflage; TH-Books Verlagsgesellschaft mbh, Frankfurt/Main, 2005: Bablok W et al. A General Regression Procedure for Method Transformation. J Clin Chem Clin Biochem 1988;26: Významné doplňky nebo změny jsou označeny pruhem podél textu Roche Diagnostics. Roche Diagnostics GmbH, D Mannheim Počet vzorků (n) = 86 Passing/Bablok 15 y = 1,015x - 7,51 y =1,010x - 5,23 τ = 0,975 r = 0,999 Koncentrace vzorků byly v rozmezí 53 až 1087 (5,3 až 109 mg/dl) , V 4 Česky 3 / 3 systémy cobas c